1. Оснащення, необхідне для визначення групи крові перехресним методом:
А) Стандартні тест-еритроцити груп О(І), А(ІІ), В(ІІІ).
Б) Сироватка хворого та еритроцити хворого.
В) Стандартні сироватки групи О(І), А(ІІ), В(ІІІ) двох різних серій кожної групи і стандартна сироватка
АВ(І\/) групи.
Г) Ізотонічний розчин хлористого натрію.
Д) Білі порцелянові або інші планшети з поверхнею, що має здатність зволожуватись. Е) Голки. Є) Піпетки. Ж) Скляні палички або предметні скельця.
2. Умови, необхідні для визначення групи крові, - ті ж самі, що й для визначення по стандартних сироватках.
3. Техніка визначення групи крові перехресним методом:
А) Визначення групи крові перехресним методом базується на паралельному визначенні наявності
або відсутності групових антигенів на еритроцитах і групових ізоаглютинінів у сироватці
досліджуваної крові. Б) Під відповідними позначеннями груп крові на пластинку наносять у два ряди по великій краплі
(0,1 мл) стандартних сироваток груп 0(1), А(ІІ), В(ІІІ) двох різних серій. В) Нижче сироваток (третій і четвертий ряди) наносять по одній маленькій краплі (0,01 мл)
стандартних еритроцитів відповідних груп різних серій (табл. 3.3).
Таблиця 3.3 Оцінка результатів визначення групи крові перехресним методом
|
№ п/п |
Реагенти, які наносять на пластинку |
0(1) |
А(Н) |
В(ІІІ) |
|
1 |
Стандартна сироватка різних серій |
ар |
Р |
а |
|
2 |
Стандартна сироватка різних серій |
ар |
Р |
а |
|
3 |
Стандартні еритроцити різних серій |
0 |
А |
В |
|
4 |
Стандартні еритроцити різних серій |
0 |
А |
В |
Г) Із пробірки з досліджуваною кров'ю піпеткою набирають сироватку і наносять її по одній
великій краплі на кожну краплю стандартних еритроцитів. Д) Після цього тією ж піпеткою набирають із дна пробірки еритроцити і наносять їх по маленькій
краплі (0,01 мл) поруч із кожною краплею стандартної сироватки.
Е) У всіх краплях сироватку змішують із еритроцитами сухою скляною паличкою, ретельно промиваючи її після перемішування кожної краплі. Є) Планшет з нанесеними змішаними краплями періодично погойдують і спостерігають за появою
аглютинації. Ж) У ті краплі, де з'явилась аглютинація, через 3 хвилини від початку дослідження вносять по
одній краплі (0,05 мл) 0,9% розчину хлористого натрію і продовжують спостереження при
погойдуванні пластинки до закінчення 5 хвилин. 4. Трактування результатів реакції:
А) Оцінку результатів проводять шляхом зіставлення результатів, отриманих за допомогою
стандартних сироваток і стандартних еритроцитів. Б) Можливі чотири комбінації результатів (рис. 3.6; табл. 3.4).
Таблиця 3.4
Схема визначення групи крові перехресним методом
|
Наявність аглютинації при реакції зі стандартними ізогемаглюти-нуючими сироватками |
Наявність аглютинації при реакції зі стандартними еритроцитами |
Група крові | ||||
|
0(І)ар |
А(П)Р |
В(ІІІ)а |
0(1) |
А(ІІ) |
В(ІІІ) |
|
|
- |
- |
- |
- |
+ |
+ |
0(1) ар |
|
+ |
- |
+ |
- |
- |
+ |
А(И)Р |
|
+ |
+ |
- |
- |
+ |
- |
В(ІІІ) а |
|
+ |
+ |
+ |
- |
- |
- |
АВ(ІУ) |
Примітка:при визначенні групи крові АВ(ІУ) необхідно провести контрольне дослідження із сироваткою групи АВ(ІУ).
Помилки при визначенні групової приналежності крові