- •Заняття 8
- •У полікриламідному гелі ” План:
- •1. Теоретична частина
- •Основи електрофорезу
- •1.1.1 Принцип електрофоретичного розділення
- •1.1.2 Умови електрофоретичного розділення
- •1.1.3 Застосування методу електрофорезу
- •1.2 Види електрофорезу
- •1.3 Електрофорез у поліакриламідному гелі (пааг)
- •1.3.1 Полімеризація поліакриламідного гелю
- •Щільність гелю (розмір пор)
- •Концентрація поліакриламідних гелів, які використовуються для розділення макромолекул з різними молекулярними масами
- •1.3.3 Зв'язок між рухливістю білків і концентрацією гелю
- •1.3.4 Електрофорез у пааг з використанням додецилсульфату натрію
- •Практична частина
- •2.1Стокові розчини
- •2.1.1 Концентрат гелю – 15 %(14% т, 1% с):
- •Буфер для зразків:
- •2.4 Розчин для відмивання (для другого варіанту фарбування)
- •Література:
2.4 Розчин для відмивання (для другого варіанту фарбування)
Фарбу відмивають від гелю сумішшю ізопропанол:оцтова кислота у співвідношенні 2:1
Фарбу відмивають від гелю сумішшю ізопропанол:етанол:оцтова кислота:вода у співвідношенні 2:1:1:6
Література:
Остерман Л.А. «Методи дослідження білків і нуклеїнових кислот. Електрофорез і ультрацентрифугирование», Москва, «Наука» 1981.
«Protein electrophoresis)), Amersham Biosciences (www.amershambiosciences.com)
Laemmliu.K..Cleavageofstructuralproteinsduringtheassemblyoftheheadofbacteriophaget4. Naturе1970;227:680-685.
Schaggerh.,vonjagowww. Tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kda. Anal. Biochem., 1987; 166: 368-379
Практикум по биохимии: Учеб. пособие / Под ред. С.Е. Северина, Г.А. Соловьевой. - Изд-во МГУ, 1989. - 509 с.