- •Курсовая работа на тему:
- •§1.2. Общая характеристика и свойства рибофлавина в 3% калия йодиде.
- •§1.3.Получение
- •§1.4. Качественный анализ
- •§1.5.Методы количественного анализа
- •§1.6.Фармакологические свойства, применение, форма выпуска и условия хранения
- •Глава II. Экспериментальная часть. Валидационная оценка методики качественного и количественного определения.
- •§2.1. Определение специфичности методики качественного анализа.
- •§2.2.Определение линейности
- •§2.3.Определение прецизионности
- •§2.4.Определение правильности
§1.2. Общая характеристика и свойства рибофлавина в 3% калия йодиде.
Рибофлави́н (лактофлавин, витамин B2) — один из наиболее важных водорастворимых витаминов, кофермент многих биохимических процессов.
Рибофлавин представляет собой жёлто-оранжевого цвета игольчатые кристаллы, собранные в друзы, горького вкуса. Рибофлавин является производным гетероциклического соединения изоаллоксазина, связанного с многоатомным спиртом рибитом.
Плохо растворим в воде (0,11 мг/мл при 27,5 °C) и этаноле, не растворим в ацетоне, диэтиловом эфире, хлороформе, бензоле.
Рибофлавин стабилен в кислой и быстро разрушается в щелочной среде.
Рибофлавин является биологически активным веществом, играющим важную роль в поддержании здоровья человека. Биологическая роль рибофлавина определяется вхождением его производных флавинмононуклеотида (FMN) и флавинадениндинуклеотида (FAD) в состав большого числа важнейших оксилительно-восстановительных ферментов в качестве коферментов.
Флавиновые ферменты принимают участие в окислении жирных, янтарной и других кислот; инактивируют и окисляют высокотоксичные альдегиды, расщепляют в организме чужеродные D-изомеры аминокислот, образующиеся в результате жизнедеятельности бактерий; участвуют в синтезе коферментных форм витамина B6 и фолацина; поддерживают в восстановленном состоянии глутатион и гемоглобин.
В ферментах коферменты функционируют как промежуточные переносчики электронов и протонов, отщепляемых от окисляемого субстрата.
§1.3.Получение
Рибофлавин можно получить из животного или растительного сырья. Однако процесс этот трудоёмок и даёт очень низкий выход. Чтобы выделить 1,0 г рибофлавина, нужно переработать 5,4 т молочной сыворотки.
В промышленности рибофлавин синтезируют путём конденсации 3,4- диметиланилина с D-рибозой. Полученный имингидрируют, затем через реакцию азосочетания образует арилрибамин и конденсирует его с аллоксаном:
В настоящее время рибофлавин получают с помощью микробиологического синтеза. Использование современных достижений в области физиологии микроорганизмов и генной инженерии позволило увеличить выход при биосинтезе рибофлавина в 4-5тыс раз.
§1.4. Качественный анализ
Рибофлавин медленно растворим в воде (1 г в 15 000-25 ООО мл). Практически нерастворим в этаноле и хлороформе. Рибофлавин растворим в растворах кислот и шелочей, т. к. является амфотерным соединением. Его кислотные свойства обусловлены наличием подвижного атома водорода им ид ной группы, а основные — наличием нескольких гетероциклических атомов азота.
Идентифицировать рибофлавин можно по ИК-спектру, который должен соответствовать спектру, полученному с его стандартным образцом, или спектру сравнения (МФ). Для испытаний производных изоаллоксазина используют химические реакции, основанные на окислительно-восстановительных свойствах сопряженных двойных связей, окислении и этерификации рибитильной части молекулы, комплсксообразовании, гидролизе, наличии в молекуле третичного атома азота, иона натрия и связанной фосфорной кислоты.
Подлинность рибофлавина устанавливают по характерной яркой зеленовато-желтой окраске и интенсивной зеленой флуоресценции водного раствора (в ультрафиолетовом излучении). Флуоресценция исчезает при добавлении растворов хлороводородной кислоты или щелочи. Если к водному раствору рибофлавина прибавить гидросульфит натрия (сильный восстановитель), то окраска и флуоресценция исчезают вследствие образования лейкорибофлавина (химизм см. выше). Свойство флуоресцировать используют для флуориметрического определения рибофлавина.
В качестве реактива используют также концентрированную серную кислоту, от которой при смачивании крупинка рибофлавина приобретает вишнево-красное окрашивание. Раствор нингидрина при кипячении в щелочной среде образует в присутствии рибофлавина зеленую окраску. Как азотсодержащее органическое основание, рибофлавин дает положительную реакцию с реактивом Драгендорфа и другими общеалкалоидными (осадительными) реактивами. С солями металлов (серебра, кобальта, меди, ртути и др.) рибофлавин образует нерастворимыеокрашенные комплексные соединения. Например, с раствором нитрата серебра — оранжево-красного, переходящего вкрасный, а с солями ртути (И) — оранжевого цвета. Эти реакции используют для фотокол ори метрического определения рибофлавина в лекарственных формах.
В рибофлавине устанавливают допустимое содержание примеси люмифлавина путем извлечения его хлороформом. Затем либо измеряют его оптическую плотность относительно хлороформа при длине волны 440 нм (рибофлавин), либо сравнивают окраску хлороформного извлечения относительно раствора дихромата калия определенной концентрации.