3. Синтетическая функция. Представители нормальной микробиоты участвуют:

• в синтезе и всасывании витаминов группы В (В1, В2, В3, В5, В6, В7, В9 и В12) и витамин К

• в синтезе незаменимых аминокислот

• в синтезе ферментов: протеаз, липаз, амилаз.

Сюда же можно отнести метаболическую функцию. Микробиота кишечника участвует в следующих обменных процессах:

• обмене белков, разлагая белки до конечных продуктов;

• обмене липидов (ТАГ, ВЖК, ФЛ, ХЛ);

• метаболизме билирубина, образовании стеркобилиногена, копростерина и дезоксихолевой кислоты;

• брожении полисахаридов, негидролизуемых собственными пищеварительными ферментами организма. При этом образуются низкомолекулярные метаболиты: газы (Н₂, СО₂, СН₄), монокарбоновые кислоты, янтарная и молочная кислоты.

4. Пищеварительная функция. Микробиота ЖКТ участвует в процессах пищеварения в восходящем отделе толстой кишки, разлагая непереваренные в верхних отделах ЖКТ остатки пищи. Микроорганизмы располагаются в гаустрах толстого кишечника.

Микробиота способствует усвоению из кишечника ионов кальция и витамина D, предотвращая тем самым развитие рахита в детском возрасте; участвует в рецикле некоторых макро- (железа) и микроэлементов (цинка, кобальта). Кислоты и газы, образующиеся при микробной ферментации углеводов, активируют перистальтику.

Энергетическая функция: благодаря активному метаболизму, нормальная микробиота кишечника является генератором тепла.

7. Методы определения микробиоты организма человека.

Бактериоскопический метод имеет большое значение для тех биотопов организма человека, в которых обитает большое количество различных видов микроорганизмов (полость рта, кишечник, влагалище). Он позволяет получить общее представление о составе микробиоты, а также выявить те микроорганизмы, которые не удается культивировать на питательных средах.

Бактериологический метод является наиболее доступным, однако недостаточно точным.

Основные принципы бактериологического исследования:

• использование качественной и количественной оценки микрофлоры;

• первичный посев материала без предварительного обогащения, обогащение нарушает количественные соотношения видов;

• использование большого набора различных питательных сред, подбор условий культивирования.

Из 1000 различных видов микроорганизмов толстого кишечника культивируется только 10%. В связи с этим актуальным является использование генетических методов (ПЦР).

В настоящее время некоторые лаборатории используют косвенные методы диагностики дисбактериоза, направленные на определении некоторых метаболитов кишечной микробиоты.

1. Высоковольтный электрофорез на бумаге для обнаружения β-аланина и гамк.

Электрофорез – процесс разделения заряженных частиц в электрическом поле. Белки, аминокислоты, нуклеиновые кислоты в биологических жидкостях существуют в виде катионов и анионов.

Электрофорез проводят на поддерживающей среде, на каком-либо инертном носителе (бумага, целлюлоза). При электрофорезе ионы будут двигаться к противоположно заряженному полюсу и распределятся на носителе в виде отчетливых зон.

Этот метод может быть использован для обнаружения производных углеводов, содержащих заряженную группу, и для нейтральных соединений, способных образовывать заряженные комплексы с такими электролитами, как борат, арсенит.

2. Ионная хроматография, определяющая в фекалиях биогенные амины, желчные и карбоновые кислоты.

Ионная хроматография — это вариант ионообменной хроматографии, включающий ионообменное разделение ионов и кондуктометрическое определение концентрации хроматографически разделенных ионов. Ионообменная хроматография основана на способности некоторых твердых веществ (ионитов) обмениваться ионами с подлежащими разделению веществами. Способность к ионному обмену определяется строением ионита, представляющего собой каркас, на котором закреплены активные группы (-СООН, -SO3H, - NH3Cl, -NH2Cl и др.).

3. Газожидкостная хроматография (ГЖК). ГЖК — метод разделения летучих компонентов, при котором подвижной фазой служит инертный газ (водород, углекислый газ, аргон, гелий), протекающий через неподвижную фазу с большой поверхностью. Инертный газ (газ-носитель) не реагирует с неподвижной фазой и разделяемыми веществами. То есть газо-жидкостная хроматография — разделение газовой смеси вследствие различной растворимости компонентов пробы в жидкости или различной стабильности образующихся комплексов.

Это достаточно информативный метод, хотя он и используется для индикации лишь некоторых анаэробных бактерий. Данный метод основан на установлении спектра и уровня летучих жирных кислот, которые продуцируются смесью микроорганизмов. Также определяется концентрация индола, крезола, фенола, скатола.