6. Реакция преципитации – определение, компоненты, применение.

Реакция преципитации (РП) - осаждение антигена под воздействием специфических антител в растворе электролита.

Компоненты:

• Преципитин – антитело, участвующее в РП

• Преципитиноген – антиген, участвующий в РП

• Преципитат – иммунный комплекс (осадок), образующийся в результате РП

Применение РП:

• Диагностика инфекционных заболеваний (менингококковые инф., полиомиелит, сибирская язва, малярия, гепатит В и т.п.)

• Судебная медицинская экспертиза: определение видовой принадлежности белков – при анализе кровавых пятен, спермы и т.п.

• Санитарная практика

• Выявление фальсификации рыбных и мясных изделий

7. С пособы постановки реакции преципитации.

• Кольцепреципитация (в пробирке)

На иммунную сыворотку наслаивают растворимый АГ.

+ реакция: на границе растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата

• Реакция термопреципитации

АГ получают кипячением и фильтацией водного экстракта органов или тканей (реакция Асколи – сибирская язва)

• Реакция флоккуляции (по Рамону)

В качестве АГ участвует токсин или анатоксин.

Н а границе между АГ и АТ помутнение в виде «облака».

Применяют для определения активности антитоксической сыворотки или анатоксина.

Наиболее интенсивная и ранняя (инициальная) флоккуляция в пробирке, где АГ и АТ в эквивалентных соотношениях.

• Реакция преципитации в геле

• Радиальная иммунодиффузия по Манчини

В агаровом геле с иммунной сывороткой делают лунки, в них помеают антиген, он диффундирует в гель.

Антиген в геле образует с АТ кольца преципитации вокруг лунок.

• Встречная иммунодиффузия по Оухтерлони

В лунки раздельно помещают АГ и АТ. Они диффундируют в агар, навстречу друг другу. Между ними образуются полосы - «усы» преципитации.

В многокомпонентных системах появляется несколько линий преципитата:

- у идентичных АГ – линии сливаются

- у неидентичных АГ – линии пересекаются

8. Реакция связывания комплемента – компоненты, фазы, применение.

Основана на активации комплемента комплексом АГ-АТ

Применяют для диагностики многих инфекционных заболеваний, в частности сифилиса (реакция Вассермана).

Фазы реакции:

• 1 фаза: инкубация смеси трёх компонентов: антиген+антитело+комплемент

• 2 Фаза (индикаторная):

добавление гемосистемы – эритроциты барана + гемолитическая сыворотка

У баранов эритроциты осмотически резистентны.

Гемолитическая сыворотка – антитела к эритроцитам барана. Получают путём иммунизации кроликов эритроцитами барана.

9. Механизм, учет результатов реакции связывания комплемента.

• П ри соответствии антитела антигену образуется иммунный комплекс, к которому через Fc-фрагмент антител присоединяется комплемент.

В этом случае гемолиза НЕ происходит (+ реакция).

• Если антиген и антитело НЕ соответствуют друг другу: ИК НЕ образуется, комплемент остаётся свободным и во 2 фазе присоединяется к комплексу эритроцит+гемолитическая сыворотка

В этом случае происходит гемолиз эритроцитов

(–реакция).