2. Развернутая (р-я Видаля, Грубера)

Проводят в пробирках (объемная РА). Используется для обнаружения антител и определения их количества (титра).

Титр реакции агглютинации – наибольшее разведение сыворотки, вызвавшее + реакцию агглютинации.

П оследовательное разведение сыворотки крови больного в ряду пробирок физраствором. Добавляют диагностикум, около 2 часов инкубируют в термостате при 37 ⁰С, оставляют на сутки при комнатной температуре, определяют титр реакции.

Повторение через 5-7 дней позволяет выявить нарастание титра антител у больного человека (метод парных сывороток).

• Разные родственные бактерии могут агглютинироваться с одной и той же диагностической агглютинирующей сывороткой, поэтому пользуются адсорбированными агглютинирующими сыворотками, из которых удалены перекрёстно реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактерий. Т.е. в этих сыворотках есть антитела, которые специфичны только к данной бактерии.

5. Варианты реакции агглютинации.

• Прямая реакция геммаглютинации

• НЕ ОТНОСИТСЯ К СЕРОЛОГИЧЕСКИМ, т.к. нет участия иммунной сыворотки.

• Склеивание эритроцитов при адсорбции на них определенных АГ (например, вирусов).

• Непрямая (пассивная) реакция гемагглютинации (РНГА, РПГА)

В ыявление антител с помощью антигенного эритроцитарного диагностикума – эритроциты с адсорбированнными на них антигенами.

+ реакция: выпадение эритроцитов в осадок в виде «зонтика»; надосадочная жидкость прозрачная; если встряхнуть, то осадок не поднимется.

– реакция: осадок в виде маленького диска или «пуговки» в центре дна пробирки; надосадочная жидкость мутная.

Применяется для выявления поверхностных АГ микробов и эритроцитов и АТ к ним.

Применяется для диагностики инф.заболеваний, определения ХГЧ в моче для установления беременности, выявления гиперчувствительности к лек.препаратам, гормонам и в др. случаях.

+ Реакция обратной непрямой агглютинации (РОНГА): выявление антигена с помощью антительного эритроцитарного диагностикума – эритроцитов с адсорбированными на них антителами. Учет результатов как в РНГА.

• Реакция торможения агглютинации (РТГА)

Основана на подавлении антигенов вирусов антителами иммунной сыворотки

• Вирусы теряют способность агглютинировать эритроциты.

И спользуют для диагностики вирусных инфекций, возбудители которых способны агглютинировать эритроциты (грипп, корь, краснуха, клещевой энцефалит и др.)

NB!!!

+ реакция: осадок в виде «пуговки»

- реакция: осадок в виде «зонтика»

• Р еакция коагглютинации

Возбудителя определяют с помощью стафилококков*, обработанных иммунной диагностической сывороткой.

*Стафилококки содержат белок А, имеющий сродство к Fc-фрагменту иммуноглобуинов

• Определяют АГ с помощью АТ, адсорбированных на стафилококках.

• Эти АТ взаимодействуют с соответствующими микробами, выделенными от больных.

• В результате РКА образуются хлопья, состоящие из стафилококков, АТ и определяемых микробов

• Реакция латекс-агглютинации (РЛА)

• Частицы полистерольного латекса служат носителями АГ.

• Латексные частицы выполняют роль искуственных эритроцитов, но более устойчивы к внешним воздействиям, чем стафилококки.

Ревматоидный фактор – аутоантитела анти-IgG (к Fc-фрагменту IgG), относящиеся к классу IgM. В сыворотке ревматоидный фактор присутствует в виде комплекса с IgG. В высоком титре ревматоидный фактор выявляется в крови у 80% больных с прогрессирующим ревматоидным артритом.

• Реакция Кумбса

Для выявления неполных АТ (одновалентных), например, антирезусных (Rh+).

• В систему антирезусные АТ +резус-положительные эритроциты добавляют антиглобулиновую сыворотку.

• Это вызывает агглютинацию эритроцитов.

• Используют при гемолитической болезни новорожденных.