Вопрос 5. Техника приготовления мазков

1. На стекло петлей нанести каплю воды, внести в нее культуру и растереть, чтобы получить тонкий и равномерный мазок. Диаметр мазка должен быть равен 1 см.

2. Высушить на воздухе.

3. Зафиксировать: предметное стекло мазком вверх 3 раза провести через пламя горелки.

4. Окрасить.

Вопрос 6. Простые методы окраски препаратов

Методы окраски препаратов бывают простые и сложные.При простой окраске используется один краситель. Например: тушь в окраске по Бурри. При сложной окраске используется несколько красителей. Например, по Граму.

Последовательность действий

1. На стекло петлей нанести каплю спиртового раствора туши

2. Внести туда культуру и растереть

3. Высушить

4. Не фиксировать!

5. Микроскопировать с объективом х40

На черном или сером фоне видны неокрашенные клетки бактерий

№ п/п

Последовательность действий

Время

1.

На мазок нанести бумажку, пропитанную раствором генцианвиолетта

1-2 мин

2.

Нанести раствор Люголя

1-2 мин

3.

Нанести этиловый спирт

30 сек

4.

Промыть водой

5.

Нанести бумажку, пропитанную раствором фуксина

2 мин

6.

Промыть водой

7.

Высушить и микроскопировать с объективом х90

Что увидим?

Грамположительные бактерииокрашиваются вфиолетовыйцвет,

Грамотрицательные – врозовый.

Органоид

Строение

Функция

А. Обязательные структуры

Нуклеоид

Эквивалент ядра, суперспирализованная замкнутая в кольцо молекула ДНК

Несет генетическую информацию жизненно важную для бактериальной клетки

Цитоплазма

Коллоидная система, состоит из воды, полисахаридов, липидов, белков и минеральных соединений

Осуществляет связь органоидов клетки между собой

Цитоплазмати-ческая мембрана (ЦПМ)

Трехслойная структура, состоит в основном из белков и липидов и небольшого количества углеводов и РНК

1. регуляция поступления в клетку метаболитов и ионов,

2. участие в метабо-лизме и репликации ДНК

Клеточная стенка (КС)

Пептидогликан – основа, а также уникальные кислоты: диаминопимелиновая и изомеры глутаминовой кислоты и аланина

1. придает форму,

2. защита от внешних воздействий,

3. участие в транспорте веществ и метаболитов,

4. на поверхности КС несет рецепторы для химических веществ, бактериофагов и бактериоцинов

Мезосомы

Выросты ЦПМ, аналоги митохондрий

1. «энергетические станции» клетки,

2. участие в делении и спорообразовании

Рибосомы

Глобулярные образования, состоят из РНК и связанных с ними молекулами белков

Осуществляют синтез белка

Б. Необязательные структуры

Капсула (микрокапсула, макрокапсула, слизистый слой)

Слой мукополисахаридных микрофибрилл

Защита бактерий от фагоцитоза

Жгутики

Вращающиеся спирально изогнутые нити белка флагеллина

Органоид движения

Пили:

А первого порядка

Б) второго порядка

Белковые волоски

Полые белковые трубочки

1.прикрепление бактерий к субстратам,

2. увеличение площади поверхности

участие в конъюгации бактерий

Плазмиды

Дополнительные кольцевые молекулы ДНК, по размеру меньше бактериальной хромосомы

Несут генетическую информацию, которая не является жизненно важной для бактериальной клетки (способность к конъюгации, синтез токсинов, резистентность к лекар-ственным препаратам

Включения

Волютин, сера, крахмал, гликоген

Запасные питательные вещества

Спора

Нуклеоид и органоиды клетки, окруженные трехслойной оболочкой, почти не содержит воды

Сохранение вида в неблагоприятных условиях