- •I. Введение. Грипп — заболевание с неизменяющейся симптоматикой, вызываемое изменяющимся вирусом
- •II. Таксономия вирусов гриппа
- •IV. Структурное и функциональное родство вирусов гриппа с другими рнк-содержащими вирусами
- •V. Антигенная изменчивость вируса гриппа и ее отличие от антигенной изменчивости других инфекционных агентов
- •VI. Нерешенные вопросы
- •Структура вируса гриппа
- •I. Введение
- •1. Число и функции полипептидов
- •4. Нейраминидаза
- •5.Белок нуклеокапсида
- •7. Количество полипептидов в вирионе
- •8. Вирусы гриппа в и с
- •1. Гемагглютинин
- •2. Нейраминидаза
- •IV. Сборка вирионов
- •V. Заключение. Модель вириона гриппа
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Гемагглютинин
- •II. Реакция гемагглютинации
- •1. Количественное определение гемагглютинации
- •2. Гемадсорбция
- •3. Ингибирование гемагглютинации
- •III. Структура гемагглютинина
- •1. Химический состав изолированных гликопептидов
- •2. Антигенные свойства гликопептида hAt
- •4. Структура субъединицы на
- •5. Антигенная гомогенность субъединиц на
- •1. Моновалентный гемагглютинин
- •2. Агрегация и диссоциация моновалентного гемагглютинина
- •IV. Функции гемагглютинина
- •V. Заключение
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Нейраминидаза
- •II. Специфичность нейраминидазы
- •III. Субстраты для нейраминидазы
- •IV. Химические свойства нейраминидазы
- •V. Содержание нейраминидазы в оболочке вируса
- •1. Использование протеолитических ферментов
- •2. Использование детергентов
- •VI. Свойства изолированной нейраминидазы а. Состав аминокислот
- •VII. Структура нейраминидазы
- •VIII. Антигенные свойства нейраминидазы
- •IX. Лектины и нейраминидазы
- •X. Ингибиторы активности нейраминидазы
- •XI. Роль нейраминидазы
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Активность транскриптазы в клетках и вирионах гриппа
- •I. Введение
- •II. Активность рнк-полимеразы в инфицированных клетках
- •IV. Заключение
- •Рибонуклеиновые кислоты вирусов гриппа
- •I. Введение
- •II. Методы
- •1. Экстракция рнк из вирионов
- •1. Анализ экстрагированной рнк с помощью градиентного центрифугирования
- •2. Анализ экстрагированной рнк с помощью электрофореза в полиакриламидном геле (паагэ)
- •IV. Комплекс рнк с белком (рнп) а. Физические и химические свойства
- •2, Созревание и упаковка рнк в вирионы
- •1. Внутриклеточная локализация вкРнк
- •2. Кинетика синтеза вкРнк
- •3. Физические свойства информационной рнк (мРнк)
- •VI. Действие ингибиторов на синтез рнк
- •VII. Заключение
- •Генетика вируса гриппа
- •I. Введение. Исторический обзор
- •1. Исследования по генетике, проведенные Burnet и сотрудниками
- •2. Исследования по генетике, проведенные Hirst и Gotlieb
- •II. Геном вируса гриппа
- •III. Мутации, изменчивость, адаптация
- •1. Модификация вирусных гликопротеидов
- •2. Модификация вирусной оболочки
- •3„ Модификации с помощью протеолитических ферментов
- •1964) Или к гуанидвнгидрохлориду (David-West, 1973) явля
- •2. Фенотипы, относящиеся к нейраминидазе
- •3. Морфология вириона
- •1. Чувствительность к клетке-хозяину
- •2. Патогенность
- •3. Механизм рекомбинации
- •10% От выхода вируса при разрешающей температуре. Шля1
- •V!. Фенотипическое смешение и гетерозигозис
- •VII. Изучение функции генов с помощью ts-мутантов
- •VIII. Заключение
- •Репликация вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Адсорбция, проникновение, «раздевание» вируса
- •III. Транскрипция а. Последовательность синтеза рнк
- •2. Циклогексимид
- •3. Глюкозамин
- •IV. Синтез вирусных белков
- •2. Белок нуклеокапсида
- •3. Неструктурные белки
- •4. Мембранный м-белок
- •5. Гемагглютинин
- •VI. Синтез липидов
- •VII. Сборка (см. Также гл. 2)
- •IX. Неправильные формы размножения
- •Культивирование вирусов гриппа человека в лабораторных условиях, круг хозяев среди лабораторных животных и выделение вируса из клинического материала
- •I. Введение
- •II. Культивирование вирусов в лабораторных условиях
- •1. Продуктивная инфекция
- •2. Абортивная инфекция
- •3. Персистентная инфекция
- •4. Параметры инфекции
- •IV. Выделение вируса
- •Антигенная изменчивость вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Грипп в историческом аспекте (см. Также гл. 15)
- •III. Свойства генома вируса гриппа
- •IV. Субъединицы гемагглютинина
- •V. Механизм антигенного дрейфа
- •1955, 1956; Magill, 1955; Hamre et al., 1958). Эпидемиологиче
- •1956, 1957; Takatsy, Furesz, 1957), антигены постепенно за
- •VI. Механизм антигенных сдвигов (значительных антигенных изменении)
- •VII. Дополнительные доказательства,
- •2. Естественная передача вируса и селекция
- •3. Селекция и передача «нового» вируса гриппа в системе in vivo
- •1. Антигенные соотношения между вирусами гриппа человека, низших млекопитающих и птиц
- •2. Круг хозяев
- •Иммунология гриппа
- •I. Введение
- •II. Проявления иммунитета
- •1. Устойчивость к инфекции
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •4. Механизм действия антител к na
- •V. Влияние антигенного дрейфа на иммунитет
- •VII. «первородный антигенный грех»
- •VIII. Клеточный иммунитет и грипп
- •IX. Заключение
- •Грипп у человека
- •2. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа а
- •3. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа в
- •7. Изменения бактериальной флоры
- •8. Функция легких при неосложненном гриппе
- •9. Выделение больными вируса в окружающую среду
- •10. Интерферон
- •11. Продукция антител
- •1. Пневмония
- •2. Острые заболевания нижних дыхательных путей у детей
- •3. Обострение хронического бронхита
- •III. Экспериментальная гриппозная инфекция у человека
- •3. Продукция интерферона при заболевании
- •IV. Выводы и заключение
VII. Заключение
Из приведенного 'Обсуждения химических, биологических и морфологических свойств РНК и РНП вирионов гриппа ясно, что геном этого вируса состоит из нескольких фрагментов однонитчатой РНК. Анализ концевых групп различных фрагментов РНК и наличие в составе каждого фрагмента молекул полимеразы делает вполне .вероятной индивидуальную репликацию каждого фрагмента. Однако менее ясен вопрос, как нужное число фрагментов нужного типа упаковывается при формировании инфекционной вирусной частицы. Находится ли процесс отбора фрагментов под контролем какого-то регуляторного механизма или происходит случайно? За счет чего в процессе этого отбора исключается молекула вкРНК? Ответы на эти вопросы ищут в настоящее время в нескольких лабораториях.
С этими проблема1ми связаны также вопросы регуляции транскрипции, трансляции и репликации РНК в инфицированных вирусом клетках. Об этих процессах известно очень мало, хотя они и являются объектом 'Многих исследований. Некоторые ответы на поднятые здесь вопросы будут, по всей вероятности, получены при использовании in' vitro РНК- и белоксинтезирующих систем.
ЛИТЕРАТУРА
Ada G. L., Perry В. Т. Aust. J. exp. Biol. Med. Sci., 1954, v. 32, p. 453.
Ada G. L., Perry B. T. J. gen. Microbiol., 1956, v. 14, p. 623. Agrawal H. O., Bruening G. Proc. nat. Acad. Sci. U. S.; 1966, v. 55, p. 818. Barry R. D. Virology, 1961, v. 14, p. 398.
Barry R. D. Cell. biol. Myxovirus Infect., Ciba Found. Symp., 1964, p. SIBarry R. D., Ives D. R., Cruickshank J. G. Nature (London), 1962
Bean W. J., Simpson R. W. Virology, 1973, v, 56, p. 646. Bishop D. H., Roy P., Bean W. J., Jr., Simpson R. W. J. Virol., 1972
Blair С D., Duesberg P. H. Ann, rev. Microbiol., 1970, v. 24, p. 539. Blobel G. Proc. nat. Acad. Sci. U. S., 1971, v. 68, p. 832.
Bryan R. N.. Hayashi M. Nature (London), New Biol., 1973, v. 244, p. 271. Burnet F. M., Science, 1956, v. 123, p. 1101. Choppin P. W. Virology, 1969, v. 39, p. 130. Choppin P. W., Pons M. W. Virology, 1970, v. 42, p. 603. Chow N.. Simpson R. W. Proc. nat. Acad. Sci. U. S., 1971, v. 68, p. 752. Compans R. W., Choppin P. W. Proc. nat. Acad. Sci. U. S., 1967
Compans R. W., Content J., Duesberg P. H. J. Virol., 1972, v. 10,' p. 795. Compans R. W., Dimmock N. J., Meier-Ewert H. In: The Biology of Large
RNA Viruses (R. D. Barry and B. W. J. Mahy, eds.), New York, Acad.
Content J., Duesberg P. H. J. mol. Biol., 1971, v. 62, p. 273. Darnell J. E., Philipson, L., Wall R., Adesnik M. Science, 1971,. v. 174
Генетика вируса гриппа
А. СУГИУРА (A. SUGIURA)
I. Введение. Исторический обзор
Данная глава написана не с целью дать обзор всей литературы, относящейся ж исследованию генетики вируса гриппа. Более подробно это сделано в обзорах Kjlbourne (1963) и Hoyle (1968). Я попытался проследить, стараясь придерживаться хронологического порядка, только за теми данными, которые непосредственно привели к важным концепциям и теориям ;в этой области. Я также попытался дать новые объяснения некоторым более старым экспериментальным данным, используя употребляемвую ныне терминологию, и модифицировать некоторые прежние интерпретации, оказавшиеся несостоятельными, в свете современных знаний. История исследований генетики вируса гриппа разбита на два периода. Первая фаза охватывает примерно все 50-е годы, тогда как события с начала 60-х годов до настоящего временя будут рассматриваться как второй период, наступление которого было отмечено широким использованием культур клеток и применением -метода бляшек.
А. ИССЛЕДОВАНИЯ ПО ГЕНЕТИКЕ В ПЕРВОМ ПЕРИОДЕ
Первые свидетельства генетических взаимодействий виру
сов гриппа были получены Burnet и Lind (1949) при изуче
нии феномена 'интерференции в мозге мышей. Из мозга мы
шей, зараженных одновременно нейротропным вариантом
(NWS) штамма WS я другими ненейротропными штаммами,
WSM или SW-15, они выделяли штаммы вируса, которые яв
но наследовали признаки обоих вводимых вирусов, а именно
обладали нейровирулентностыо NWS, но имели либо устой
чивый к нагреванию НА WSM, либо серологический тип
штамма SW-15. В течение последующих 10 лет Burnet и его
сотрудники были ведущими исследователями генетики вируса
гриппа.
В 1951 г. Henle и Liu нашли, что множественная инфекция клеток аллантоиса штаммом PR8 (А) или Lee (В) вирусов гриппа, инактивированных ультрафиолетовым облучением или нагреванием, приводит к частичному восстановлению утерянной инфекционности. Они интерпретировали этот феномен как аналог множественной реактивации у Т-четных бактериофагов, т. е. .как форму генетических взаимодействий между различными вирусными геномами внутри одного и того же штамма.
В 1952 г. Appleby сообщил о выделении нового штамма вируса из куриных эмбрионов, получивших смесь штаммов NWS и Kunz, инактивированных ультрафиолетовым облучением. Этот новый вирус имел серологические свойства штамма Kunz, но в отношении тканевого тропизма вел себя аналогично родительскому штамму NWS, т. е. обладал нейрови-рулентностью и латогенностью при интраназальнои инокуляции мышам. Появление этого вируса объяснили рекомбинацией.
В 1953 г. Hirst и Gotlieb (1953a) начали работы по генетике вируса гриппа, и их группа вместе с группой Burnet составили две основные школы в этой области в 50-е годы. Среди других комбинационных форм штаммов WSN и Mel Hirst и Gotlieb получили вирус ХЗ, который, по-видимому, наследовал антигены от обоих родительских вирусов и был стабилен при повторяющихся пассажах при предельных разведениях.
В 1955 г. Baron .и Jensen установили, что генетические признаки штаммов NWS или Wright, инактивированных ультрафиолетовым облучением, могут быть спасены в смешанной инфекции с активным вирусам. Вирус-потомок имел генетические характеристики неактивного родительского штамма, а серотип—активного штамма.
Таким образом, существование генетических взаимодействий или генетической рекомбинации было твердо установлено .несколькими группами исследователей, работавшими независимо.