3.3. Взятие материала

Правильное взятие биологического материала обеспечивается слаженной работой лечащего врача и клинико-диагностической лаборатории. В любом случае лаборатория должна информировать клиническое отделение о правилах взятия и транспортировки биологического материала и контролировать этот процесс. Существенное значение при этом имеет вид биологического материала и вид назначенных исследований. Тем не менее, существуют общие требования, которые необходимо соблюдать, чтобы обеспечить получение достоверного результата:

• забор материала проводить натощак (через 12 часов после приема пищи), за исключением исследований, требующих иной подготовки пациента;

• исследование выполнять до начала лечения. В случаях, когда это невозможно, материал следует забирать до утреннего приема лекарств;

• взятие материала не следует проводить у пациентов после физической нагрузки, ночной смены, находящихся в состоянии нервного напряжения и т.п.;

• стандартизировать время забора материала (как правило, утренние часы, например, 7:00 -9:00);

• за исключением тяжело больных, кровь у пациентов забирать в положении сидя;

• обеспечить сопровождение биологического материала, поступающего в лабораторию, необходимой информацией (см. выше);

• доставить биологический материал в лабораторию в оптимальные сроки с соблюдением необходимых условий транспортировки.

Наиболее часто используемым в клинико-диагностической лаборатории биологическим материалом является кровь и моча, особенности получения которых приведены в таблице.

Таблица 3.1 – Наиболее часто используемый в КДЛ биологический материал и правила его получения

Цельная капиллярная кровь	Капиллярная кровь забирается, как правило, из дистальной фаланги кисти. У детей – из мочки уха или пятки.
Цельная венозная кровь	Берется из крупных вен (чаще из локтевой) в пробирку, содержащую антикоагулянты. Этот материал после соответствующего разведения физиологическим раствором хлористого натрия или цитратом может быть использован для исследования СОЭ. ВНИМАНИЕ! Кровь для исследований не должна забираться из вены, в которую проводятся инфузии растворов.
Плазма	Кровь необходимо взять с антикоагулянтом*. Затем производят отстаивание или центрифугирование, отделяют клеточные элементы и получают плазму.
Сыворотка	Кровь на сыворотку берут в сухую стеклянную или пластиковую пробирку, содержащую активаторы свертывания. После того, как произошло свертывание крови, кровь следует отцентрифугировать и отделить сыворотку от сгустка.
Моча для «общего анализа»	Используется вся утренняя порция мочи.
«Суточная» моча	Первая утренняя порция мочи не учитывается, затем собирают все порции мочи в течение суток, включая утреннюю порцию мочи следующего дня. Перемешивают, отмечают объем, отливают 50 мл мочи в отдельную емкость, доставляют в лабораторию вместе с информацией об объеме суточной мочи

* - антикоагулянты – вещества, препятствующие свертыванию крови и увеличивающие сохранность клеток крови. В клинической лабораторной диагностике в качестве антикоагулянтов наиболее часто используют соли этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) – К₂ЭДТА, К₃ЭДТА и Nа₂ЭДТА, цитрат натрия, оксалат натрия и гепарин. Действие ЭДТА обусловлено образованием комплекса с кальцием, что препятствует свертыванию и обеспечивает в течение первых 3-5 часов минимальные изменения клеточной морфологии. Цитрат натрия (Na₃C₆Н₅O₇) используется, как правило, для определения СОЭ. Механизм действия основан на связывании ионов кальция. Оксалат натрия (Na₂C₂O₂) используется при подсчете количества клеток крови и их морфологии. Механизм действия аналогичен цитрату натрия. Гепарин (чаще применяют гепаринат натрия или лития) является физиологическим антикоагулянтом, используется в гематологических и иммунологических исследованиях. Гепарин препятствует переходу протромбина в тромбин и фибриногена в фибрин. Следует помнить, что выбор антикоагулянта определяется конкретной методикой исследования!

В современных лабораториях для взятия венозной крови все более широко используются специальные пробирки с вакуумными системами (Vacutainer). Они производятся из стекла или прозрачного безлатексного полиэтилентерефталата (ПЭТ), который легче и практически не бьется, в отличие от стекла. Пробирки защищены безлатексными крышками, имеющими цветовые коды в соответствии с типом содержащихся в них химических реагентов (например, зеленый код указывает на содержание в пробирке гепарина, черный – цитрата натрия, белый – К₂ЭДТА и т.д.). Коды отвечают международным стандартам. Стерильные иглы в данных системах имеют ультратонкие стенки и могут использоваться для отбора нескольких проб за одну процедуру венепункции. Иглы снабжены защитным колпачком, что значительно снижает риск случайной травмы от укола иглы и передачи инфекции. Имеются специально разработанные комплекты для забора крови из труднодоступных вен и специальные одноразовые педиатрические иглы. Применение пробирок типа Vacutainer позволяет унифицировать такие преаналитические параметры как порядок отбора крови, время наложения жгута, перемешивание, условия транспортировки.

3.4. Правила транспортировки и хранения биологического материала

Все биологические материалы должны быть максимально сохранены и доставлены в лабораторию в максимально короткие сроки. Для этого необходимо строго соблюдать оптимальные режимы транспортировки образцов от места забора до лаборатории, учитывая влияние времени, температуры и механических воздействий во время транспортировки. В целом, способы доставки проб в отдаленные лаборатории и хранение проб в лаборатории должны быть стандартизированы. Сроки доставки и способы хранения материала различаются в зависимости от вида биологического материала и планируемого исследования. Приведем некоторые примеры.

Капиллярную кровь для общего анализа крови получают в лаборатории и исследуют на месте или осуществляют получение материала в отделении и доставляют в лабораторию.

Венозная кровь из отделений в лабораторию транспортируется в пластиковых или стеклянных пробирках, закрытых резиновыми пробками. Пробирки располагаются в штативах, последние устанавливают в транспортные контейнеры, на дно которых положена белая ткань в 3-5 слоев. Сопроводительные документы запрещено вкладывать внутрь контейнеров.

Во время сбора суточной мочи материал следует хранить в холодильнике, а если это невозможно, то следует добавить в сосуд для сбора мочи консервирующий раствор (около 5 мл 10% раствора тимола в изопропаноле или несколько кристаллов тимола).

Для общего анализа мочи берут утреннюю порцию мочи, которую следует как можно быстрее доставить в лабораторию (в течение 1 часа).

Спинномозговую жидкость для клинического исследования следует доставить в лабораторию немедленно.

3.5. Порядок приема и регистрации проб для исследования

Материал для исследований в плановом режиме принимается в рабочие дни в фиксированное утреннее время (например, с 8:0 до 10:00).

Материал для исследований в неотложном режиме ("cito") принимается ежедневно и круглосуточно в лаборатории неотложного анализа. Результаты исследований, выполняемых в неотложном режиме, подготавливаются и доступны для передачи в отделения больницы в течение 1 часа с момента поступления материала в лабораторию на бумажном носителе или по телефону.

Как указывалось выше, пробирки (или иные емкости) с биологическим материалом, поступающие в лабораторию, должны сопровождаться надежно закрепленным и правильно оформленным направлением на лабораторное исследование. При поступлении материала в лабораторию проверяют соответствие проб прилагаемому направлению, состояние проб, отмечают время поступления. Лаборатория может и должна отказать в приеме материала на исследование в следующих случаях: при наличии расхождения между данными заявки и маркировки на пробирке; при отсутствии этикетки на пробирке или невозможности прочесть заявку или этикетку. Не могут быть приняты к исследованию пробы биологического материала с превышением сроков доставки.

Весь поступающий материал регистрируется лаборантом или фельдшером-лаборантом. Регистрация биологического материала подразумевает запись в специальном журнале регистрации проб, присвоение образцу кодового идентификационного номера и маркирование пробирок с материалом. Если в лаборатории налажен механизированный учет, на пробирки наносится специальный штрих-код, который считывается лаборантами на последующих этапах обработки и анализа проб с помощью специальных детекторов (ридеров).

Пробоподготовка проводится на специально оборудованных рабочих местах (или в отдельном помещении) и предусматривает первичную обработку образцов биоматериалов (термостатирование, центрифугирование, отделение сыворотки, дозирование отдельных проб и.т.д.). Для этого рабочее место оснащается специальным оборудованием и устройствами (центрифуги, термостаты и др.), о чем указывалось выше. Режим центрифугирования регламентируется определенным стандартным протоколом.

После проведения центрифугирования могут быть забракованы пробы, имеющие высокую степень гемолиза, липемии в зависимости от метода измерения аналита.