Глава 2 материалы и методы исследования

Данная работа является проспективным аналитическим сплошным исследо- ванием женщин с ХРКГ и РБВ, выполненным с января 2006 года по май 2013 года на базе многопрофильной клиники им. Н. И. Пирогова, микологической клиники и консультативно-диагностического отделения НИИ медицинской микологии им. П. Н. Кашкина СЗГМУ им. И. И. Мечникова.

2.1 Объекты исследования

Обследовано 534 женщины с длительными патологическими вагинальными выделениями в возрасте от 18 до 45 лет.

Критерии включения в исследование:

– подтвержденный диагноз КГ и/или БВ;

– длительность заболевания более двух месяцев. Критерии исключения:

– наличие ИППП и неспецифических вульвовагинитов;

– беременность;

– лактация;

– прием антибактериальных препаратов в течение шести месяцев, предше- ствовавших исследованию.

Из исследования исключили пациенток с наличием гонококков, трихомо- над, хламидий, вирусов простого герпеса и папилломы человека, неспецифиче- ских вульвовагинитов.

Основную группу составили 103 женщины в возрасте 18 – 43 лет, страдаю- щих ХРКГ и РБВ.

Критерии включения:

– длительность заболевания более четырех месяцев;

– частота рецидивов не менее четырех в течение года, предшествующего исследованию [40].

В дальнейшем эта основная группа была разделена на три подгруппы по этиологическому принципу:

I подгруппа – 53 женщины с ХРКГ (возраст 19 – 43 года); II подгруппа – 32 женщины с РБВ (возраст 21 – 39 лет);

III подгруппа – 18 женщин с ХРКГ в сочетании с БВ (возраст 18 – 41 год). Контрольную группы составили 30 здоровых женщин в возрасте 18 – 39 лет. Подробная характеристика подгрупп будет представлена в главе 3 настоя-

щей диссертации.

2.2 Методы обследования больных

Обследование проводили клиническими, лабораторными (микологические, бактериологические, цитоморфологические, биохимические, иммунологические) и инструментальными (рентгенологические, ультразвуковые, эндоскопические) методами.

2.2.1 Диагностика хронического рецидивирующего кандидоза гениталий и рецидивирующего бактериального вагиноза

В ходе клинического обследования анализировали анамнестиче ские дан- ные (возраст, особенности менструальной, сексуальной и репродуктивной функций, контрацептивное поведение, длительность заболевания, частота р е- цидивов, основные жалобы и их динамика, фоновая гинекологическая и экстр а- генитальная патология и т.д.), проводили общий и гинекологический осмотр пациенток.

Диагнозы ХРКГ и РБВ устанавливали на основании клинических и лабора- торных признаков в соответствии с рекомендациями, принятыми в современной клинической практике [48, 166].

Для диагностики КГ использовали следующие признаки: жалобы на выде- ления из половых путей различной интенсивности, зуд и жжение наружных поло- вых органов, дизурию, диспареунию; объективные проявления заболевания: вос- паление слизистых оболочек вульвы, влагалища, экто- и эндоцервикса, кожи пе- ригенитальной и перианальной области, наличие выделений, в том числе творо- жистых.

Диагноз КГ подтверждали выявлением почкующихся дрожжевых клеток (ПДК) и/или псевдомицелия (ПМ) Candida spp. путем микроскопии мазков из слизистых оболочек вульвы, влагалища, экто- и эндоцервикса, окрашенных по Граму [20]. Микологическое исследование включало выделение культуры Candida spp. из патологического материала и видовую идентификацию выделен- ного возбудителя.

Патологический материал из заднебокового свода влагалища засевали на среду Сабуро с последующим количественным учетом дрожжевых колоний. Ви- довую идентификацию C.albicans проводили экспресс-тестом на образование ростковых трубок in vitro [40]. Биохимическое изучение культур Candida spp., не- способных к образованию ростковых трубок, выполняли тест-системами Auxacol- or-2, Fongiscreen-4h (BIORAD), Api 20 CAUX (BIOMERIEUX).

_{Диагноз БВ подтверждали, основываясь на стандартных критериях Амстела}

[20]:

– патологический характер вагинальных выделений;

_{– рН вагинального отделяемого более 4,5. Для выполнения рН-метрии ис-}

пользовали универсальную индикаторную бумагу с эталонной шкалой;

– положительный аминный тест. При выполнении данного теста на пред- метное стекло с выделениями пациентки добавляли две капли 10% раствор гид- роксида калия. Тест оценивали как положительный, если появлялся или усили- вался запах гнилой рыбы;

– выявление ключевых клеток (КК) при микроскопическом исследовании нативных и/или окрашенных по Граму мазков из слизистой оболочки влагалища. Ключевые клетки — это зрелые эпителиальные клетки с адгезированными на них грамвариабельными микроорганизмами.

Диагноз БВ считали подтвержденным при наличии трех из четырех выше- описанных критериев.

Выраженность воспалительной реакции слизистых оболочек влагалища и шейки матки оценивали по количеству лейкоцитов.

Для подробной оценки состава микробиоты нижнего отдела гениталий и уретры проводили бактериологическое исследование материала, взятого из слизи- стых оболочек задне-бокового свода влагалища, эндо- и эктоцервикса, уретры. Качественный и количественный состав условно-патогенных и патогенных мик- роорганизмов определяли бактериологическими (с использованием питательных сред и культуры клеток), иммунологическими (с использованием стандартных наборов моно- и поликлональных антител) и молекулярно-биологическими мето- дами (полимеразная цепная реакция).