20. Опишите биохимические причины накопления липидов в печени (жировое перерождение печени). Липотропные факторы в лечении этой патологии.

Жировая инфильтрация печени (жировой гепатоз, стеатоз печени, жировая дистрофия) заключается в накоплении в цитозоле и межклеточном пространстве печени триацилглицеролов в виде жировых капель и в функциональной невозможности клеток их удалить. Последствием являются нарушение функций гепатоцитов, стеатогепатит с фиброзом, киста, цирроз печени и печеночная недостаточность.

Главной причиной жировой инфильтрации печени является метаболический блок синтеза ЛПОНП, ответственных за транспорт ТАГ из печени. Так как ЛПОНП включают разнородные соединения, то блок может возникнуть на разных уровнях синтеза:

• нарушение секреции липопротеинов в кровь – патологии мембран гепатоцитов при активации перекисного окисления липидов вследствие недостаточности антиоксидантных систем (в первую очередь гиповитаминозы С, А, Е, дефицит цинка и железа),

• часто причиной может быть относительная недостаточность апобелков и фосфолипидов при избытке ТАГ: при избыточном синтезе жирных кислот из глюкозы, при поступлении готовых жирных кислот из крови (немотивированный липолиз в жировой ткани), избыточное потребление жирной пищи, синтез повышенного количества ХС,

• недостаток апобелков – нехватка белка или незаменимых аминокислот в пище, воздействие токсинов и ингибиторов синтеза белка,

• снижение синтеза фосфолипидов – абсолютная или относительная недостаточность липотропных факторов (витаминов В6, В9, В12, метионина, полиненасыщенных жирных кислот), из-за чего не формируется оболочка липопротеинов,

• блок сборки липопротеиновых частиц в ЭПР при воздействии токсинов (хлороформ, мышьяк, свинец).

Принцип лечения

При лечении жировой инфильтрации необходимо:

• соблюдение водного режима – 25-30 мл чистой воды в сутки на 1 кг массы тела, 

• снизить концентрацию липидов в крови – увеличение физических нагрузок,

• обеспечить удаление жирных кислот из гепатоцитов – прием липотропных факторов и полноценного белка,

• предотвратить синтез и накопление ТАГ в печени – диета со снижением жирных и сладких продуктов, 

• при токсических поражениях – лечение гепатотропными лекарственными средствами.

21. Опишите принцип метода и диагностическое значение определения содержания в-липопротеинов, холестерина в сыворотке крови, электрофорез липопротеинов сыворотки крови.

Работа 1. Определение содержания холестерина в сыворотке крови

Диагностическое значение: у здоровых людей в сыворотке крови содержание холестерина находится в пределах 3,2-5,2 ммоль/л. Содержание его увеличивается у лиц пожилого возраста, а также при атеросклерозе, заболеваниях печени, нефрозе, при хроническом панкреатите, гипотиреозе, при сахарном диабете. Уменьшение содержания холестерина в сыворотке крови наблюдается при тяжелых поражениях печени (цирроз в терминальной стадии, некроз), при сердечной недостаточности с застойной печенью, тяжелой уремии, сепсисе, гипертиреозе и др.

Принцип метода основан на сопряженных реакциях, которые катализируют ферменты холестеринэстераза, холестериноксидаза и пероксидаза:

холестеринэстераза

холестериноксидаза

Эфиры холестерина холестерин+жирные кислоты

пероксидаза

Холестерин + О₂ холестенон+Н₂О₂

Н₂О₂ +неокрашенный субстрат Н₂О +окрашенный субстрат

Концентрация образующегося в ходе последней реакции окрашенного субстрата пропорциональна концентрации холестерина в пробе.

Работа 2. Определение содержания -липопротеидов (ЛПНП) в сыворотке крови

Диагностическое значение: в сыворотке крови практически здоровых лиц содержание -липопротеидов колеблется в пределах 3,0–4,5 г/л. С повышением в плазме крови содержания пре--ЛП и -ЛП (гиперлипопротеинемия) и изменением соотношения отдельных классов ЛП (понижением -ЛП), т. е. дислипопротеинемией, в настоящее время связывают развитие атеросклероза и ИБС.

Принцип метода определения -липопротеидов основан на их способности в присутствии полиэлектролитов и гепарина объединяться в комплексы, которые повышают мутность исследуемого раствора. Степень мутности раствора прямо пропорциональна концентрации -липопротеидов в сыворотке крови и измеряется на фотоколориметре.

Работа №3. Электрофорез липопротеидов сыворотки крови

Диагностическое значение: в лабораторной диагностике заболеваний важная роль принадлежит анализу в сыворотке крови соотношения отдельных классов липопротеидов (дислипопротеинемии). Определение соотношения отдельных классов липопротеидов позволит диагностировать или оценить риск развития таких заболеваний как атеросклероз, ИБС и др. Согласно классификации по Фредриксену, дислипопротеинемии делятся на 5 классов:

Классы липопротеидов	I тип	IIа тип	IIб тип	III тип	IV тип	V тип
ХМ		—	—	—	–—	
ЛПОНП (пре--ЛП)	N	N		—		
ЛПНП (-ЛП)	N			—	N	N
Флотирующие -ЛП	–—	–—	–—		–—	–—

Детальный анализ исследования липопротеидных комплексов можно получить методом электрофореза.

Принцип метода основан на способности передвижения липопротеидных частиц в электрическом поле. Скорость движения липопротеидов зависит от величины их заряда, который определяется количеством белка: чем больше белка, тем больше скорость передвижения. При электрофорезе липопротеидные частицы распределяются следующим образом, начиная от линии старта: хиломикроны, липопротеиды очень низкой плотности – пре--липопротеидами (пре--ЛП), липопротеиды низкой плотности – -липопротеидами (-ЛП), липопротеиды высокой плотности — -липопротеидами (-ЛП).