2. Отбор проб

Для отбора литоральных макрозообентосных проб применяется два основных метода: полигонных метод и метод пробных площадей. Эти методы применяются в основном для малоподвижных и неподвижных особей.

Полигонный метод состоит в том, что на литорали выбирается полигон 5 X 5 метров, с которого производиться изъятие необходимого материала. Данный метод удобен при исследовании частных вопросов морфологии и анатомии беспозвоночных животных и водорослей, поскольку возможен отбор большого количества особей для определённой статистической выборки.

Суть метода пробных площадей в том, что отбираются пробы рамкой определенного размера вдоль трансекты (воображаемой или реальной линии) в соответствии с необходимой статистической повторностью. Площадь рамок подбирается в зависимости от размеров доминирующих видов на данном участки литорали. Обычно применяются рамки 10 X 10 см, 16 X 16 см, 25 X 25 см, 50 X 50 см. Рамку можно сконструировать на месте из подручных материалов.

Все особи, попавшие в рамку, аккуратно укладываются в вакуумные пакеты (зипп-пакеты), каждый пакет подписывается: номер трансекты, порядковый номер пробы и литоральный горизонт, с которого производился отбор.

3. Заполнение полевого журнала и этикетирование проб

В описание входит номер пробы, дата и время наблюдений, название водного объекта наблюдений, местонахождение и номер трансекты. Приводятся сведения о температуре воды, солёности, температуры воздуха в момент отбора пробы, погодных условиях в день отбора пробы и в предшествующие дни (ретроспективная информация о погоде помогает объяснить возникновение возможных аномальных гидрологических условий, вызвавших неоднородность полученных данных).

В журнале должно быть дано визуальное описание мест отбора проб:

• характер грунта (обломки скал, валуны, камни, галька, крупнозернистый песок, обычный и мелкий песок, глина, наилок или ил (светло-серый, темно-серый, черный), известковый ил, растительный детрит, загрязняющие компоненты, распределение по дну водоема типов грунтов,

• поясность литорали,

• наличие или отсутствие антропогенного мусора,

• наличие или отсутствие ручьев или рек,

• характер растительности,

• и визуальная оценка характера распределения доминирующих видов животных.

Информация о бентосе должна включать сведения о субстрате, с которого отобрана проба, расстоянии от берега, глубине, вертикали отбора пробы, количестве рамок. Описание зообентоса содержит примечание, куда записываются наблюдения за жизнедеятельностью биоценоза (такие, как, обилие пустых раковин моллюсков или экзувиев насекомых, несформированность биоценоза и проч.).

4. Подготовка к анализу и фиксирование отобранных проб

Подготовка бентосной пробы к анализу включает в себя выборку организмов из грунта (разборку пробы) и их сортировку.

Разборку пробы желательно производить сразу же после ее отбора на берегу водоема, поскольку выборка из грунта живых организмов происходит в среднем в 2-3 раза быстрее, чем фиксированных. Благодаря активным движениям даже такие мелкие объекты, как черви, мелкие ракообразные, хорошо видны в белой кювете (иногда применяют черный фон) невооруженным глазом. При невозможности немедленной разборки пробы ее заливают 4%-ным раствором формалина, предварительно нейтрализованным насыщенным раствором соды (NаНСО3). Нейтрализацию формалина проводят для предотвращения растворения помещенных в него известковых раковин моллюсков. В качестве консерванта можно применять также 75%-ный этанол. После фиксации пробу перевозят в лабораторию, где ее разбирают под бинокуляром, поскольку мелкие неподвижные, частично обесцвеченные организмы плохо заметны на фоне растительных остатков и других частиц в пробе.

Основные рекомендации по разборке фиксированной пробы:

• отмыть пробу от формалина под краном с помощью сита, стараясь по возможности меньше перемешивать грунт во избежание повреждения организмов, так как после фиксации они становятся более хрупкими и ломкими;

• поместить отмытый грунт в банку и, взмучивая вращательными движениями верхний слой, слить небольшое количество взвеси вместе с организмами в чашку Петри; просмотреть всю площадь чашки при 8-кратном увеличении бинокуляра, выбрать организмы с помощью пинцета и поместить их в пробирку или пенициллиновую склянку с 4%-ным раствором формалина;

• пучки водорослей, макрофитов разнимать с помощью препаровальных игл, наряду с водными организмами вынимать из грунта случайно попавшие в пробу взрослые стадии насекомых, различные фрагменты организмов, могущие пригодиться при определении видов (домики полихет, и др.);

• при разборке качественной пробы даже при высокой степени однородности организмов в каждой чашке Петри необходимо просмотреть всю пробу до конца, так как более тяжелые организмы (полихеты, моллюски, олигохеты) чаще обнаруживаются в нижних слоях пробы);

• если разборка пробы переносится на следующий день, необходимо на ночь снова залить ее 4%-ным раствором формалина.

• Разобранная проба снабжается такой же этикеткой, как отобранная.

Если пункт наблюдений находится сравнительно недалеко от лаборатории и транспортировка пробы занимает не больше 3 часов с момента ее отбора, возможно сохранение пробы в нефиксированном состоянии для дальнейшей ускоренной выборки живых организмов в лаборатории.