Клиническое значение определения основных показателей эритроидного ростка

Клиническое значение определения основных показателей эритроидного ростка – эритроцитов (RGB), гемоглобина (HGB) и гематокрита (HCT) давно и подробно описано и хорошо известно врачам-клиницистам, и потому на этих показателях подробно останавливаться не будем. Отметим только, что при определении на гематологическом анализаторе RBC возможны ошибки измерения.

Ложнозавышенные результаты анализа RBC наблюдаются при нали­чии в крови:

• гигантских тромбоцитов (с объемом более 30 фл);

• криоглобулинов

Ложное занижение результатов определения RBC может быть следствием:

• агглютинации эритроцитов;

• выраженного микроцитоза эритроцитов (тогда они воспринимаются аналиазатором,как тромбоциты).

Завышение результатов при определении HGB наблюдается при:

• высоких лейкоцитозах (более 50х10⁹/л);

• гиперлипидемии;

• гипербилирубинемии;

• присутствии нестабильных гемоглобинов (Hb S, НЬ С);

• криоглобулинемии.

Следует учитывать, что если нестабильные гемоглобины и криоглобулинемия встречается не слишком часто, то первые три пункта нередко могут существенно исказить результаты выполненного исследования.

Так в одну из больниц города Ставрополя в отделение интенсивной терапии поступила больная С-ва в тяжелом состоянии с выраженной гипергликемией и явлениями кетоацидоза. При исследовании гемограммы получен следующий результат:

Анализ ОИТАР-1 Время 10:16

Дата: 19/01/2007 С____ВА

Номер: 119

Т: 26.9 С

WBC : 22,1 H 10³/mm³ ( 4,0 - 9,0) MCV : 89 μm³ (75 - 95)

RBC : 4,06 10⁶/mm³ (3,9- 5,0) MCH : 52,2 H pg (24 – 34 )

HGB : 21,2 H g/dl (12,0-16,0) MCHC: 58,7 H g/dl (30,0-38,0)

HCT : 36,1 % (36,0 -48,0) RDW : 14,3 % (11,5-14,5)

PLT : 387 10³/mm³ ( 150 - 400) MPV : 8 μm³ ( 7,4-10,4)

PCT : .311 % (.150- .400) PDW : 12,9 % (10,0-20,0)

WBC флаги : G1; G2

Диф. :

%LYM: 17,5 L % (19,0 - 37,0) #LYM: 3,8 H 10³/mm³ (1,2-3,0)

%MON: 6,1 % (3,0 - 11,0) #MON: 1,3 H 10³/mm³ (0,1-0,6)

%GRA: 76,4 H % (47,0-72,0) # GRA: 17,0 H 10³/mm³ (2,0-5,5)

При оценке результатов обследования обращает на себя внимание не только чрезвычайное повышение HGB (до 212 г/л) и связанных с ним индексов MCH и MCHC (последний до невероятных величин), но и относительно нормальные показатели RBC и HCT. Все это бесспорно свидетельствовало об ошибке при определении HGB. Причиной ошибки явилась выраженная мутность («хилезность») сыворотки как следствие гипертриглицеридемии и повышения в сыворотке липопротеинов очень низкой плотности. Если бы в КДЛ не поступила кровь для биохимического исследования и не была бы получен сыворотка, вопрос о причинах ошибки мог бы остаться невыясненным. Аналогичные примеры можно привести и у больных с гипербилирубинемией – при желтухах различной этиологии.

НСТ в гематологических анализаторах не определяется, а рассчитывается, исходя из показателей RBC и MCV. Он представлен суммой прямо измеренных объемов эритроцитов в единице объема крови. Таким образом, не существует проблемы "оста­точной" плазмы (плазмы оставшейся между эритроцитами при центрифугировании). Но именно поэтому результаты определения гематокрита методом центрифугирования (в гематокритной центрифуге, но не в пробирке – последнее запрещено!) и данные, полученные при исследовании гематологическим анализатором, будут отличаться. А, следовательно, для получения сравнимых результатов, желательно в процессе обследования пациента пользоваться каким-то одним из этих двух методов.

Кроме этого на результаты исследования HCT оказывает существенное влияние разведение крови изотоническим раствором, в котором эритроцит принимает оптимальный объем, отличающийся от того, который он имел в крови сосудистого русла. Существенные отличия будут в том случае, если у больного при взятии крови наблюдалось повышение или снижение осмотического давления плазмы (что нередко наблюдается у больных реанимационных отделений).

Возможные ошибки измерения.

Ложнозавышенные результаты HCT могут наблюдаться при:

• криоглобулинемии;

• присутствии гигантских тромбоцитов;

• гиперлейкоцитозе (>50х10⁹/л);

• гипергликемии (> 33 ммоль/л или >600 мг/дл)

• диабетическом кетоацидозе.

В двух последних случаях имеется гиперосмолярность плазмы. При разведении крови в анализаторе изотоническим раствором происходит быстрое набухание эритроцитов, что и вызывает завышение HCT. В этих случаях определение гематокрита методом центрифугирования более надежно.

К ложному занижению результатов HCT приводят агглютинация эритроцитов и выраженный микроцитоз (< 36 фл) эритроцитов.

ЭРИТРОЦИТАРНЫЕ ИНДЕКСЫ

Широкое использование эритроцитарных индексов стало возможным только после выполнения исследований на гематологических анализаторах. Эритроцитарные индексы позволяют значительно повысить качество диагностики анемического синдрома.

MCV (mean corpuscular volume) - средний объем эритроцита, выражается в кубических мик­рометрах (мкм³) или в фемтолитрах (1фл = 1мкм³). MCV определяется большинством гематоло­гических анализаторов. Вычисляется MCV делением суммы клеточных объемов на число эритроцитов.

MCV - это средний показатель объема всей популяции клеток. Поэтому необходимо иметь в виду, что MCV может иметь нормальное значение при наличии у пациен­та одновременно выраженного макро- и микроцитоза. В этом случае особую диагностичес­кую важность приобретает анализ гистограмм.

MCV меняется в течение жизни: у новорожденных достигает 128 фл, в первую неделю снижается до 100-112 фл, к году составляет 77-79 фл, в возрасте 4-3 лет нижняя граница нормы (80 фл) стабилизируется. MCV у взрослых ниже 80 фл оценивается как микроцитоз, выше 100 фл, как макроцитоз.

Возможные ошибки измерения.

Ложное завышение MCV может происходить в случаях:

• присутствия холодовых агглютининов. Агглютинаты эритроцитов воспринимаются при­бором как одна большая клетка, если их размер меньше верхнего порога эритроцитарного ка­нала. Сохранение in vitro и измерение таких проб при 37°С способствует получению правиль­ных результатов.

• диабетического кетоацидоза вследствие гиперосмолярности плазмы и быстрого набухания эритроцитов (увеличения объема) при разведении изотоническим раствором.

Относительное снижение MCV может быть при повышенном содержании фрагментов эритроцитов в крови вследствие механического гемолиза, коагулопатии потребления и других причин.

Клиническое значение. С клинической точки зрения этот показатель является важным абсолютным показателем. Этот показатель является более чувствительным, чем визуальная оценка диаметра эритроцитов, зависящая от формы клетки. Так изменение диаметра клетки на 5%, приводит к изменению MCV на 15%.

При трактовке анализа, следует учитывать, что:

• ретикулоцитоз – увеличивает показатель MCV;

• микросфероциты имеют диаметр меньше нормы, но при этом MCV чаще остается в норме;

• MCV нельзя достоверно определить при большом количестве аномальных эритроцитов (например при серповидно-клеточной анемии; выраженном пойкилоцитозе);

• при выраженном анизоцитозе эритроцитов, когда в крови присутствуют микро- и макроциты, MCV являясь средним показателем объема всей популяции клеток, может иметь нормальные значения.

В связи с этим при диагностике анемий абсолютно необходимо параллельно с исследованием индексов эритроцитов изучать мазки периферической крови и подробно описывать морфологию клеток.

MCV увеличен при макро- и мегалоцитарных анемиях, при анемиях после кровопотери, хронической гемолитической анемии, а также при алкоголизме, диффузных поражениях печени, гипотиреозе, диссеминированных злокачественных новообразованиях (метастазирование опухоли). Особенно высоки значения MCV при В₁₂-дефицитных анемиях.

Нормальные величины MCV при нормоцитарных анемиях – анемии при хронических заболеваниях, апластические, гемолитические анемии, анемии после кровотечений. Кроме этого нормоцитозом могут сопровождаться миелодиспластические синдромы.

Снижение MCV характерно для микроцитарных анемий: прежде всего железодефицитной анемии, талассемии. Могут сопровождаться микроцитозом гемолитические анемии, гемоглобинопатии, иногда при гипертиреозе.

МСН (mean corpuscular hemoglobin) - среднее содержание гемоглобина в эритроците (пг). Характеризует среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците в абсолютных единицах. МСН - более объективный параметр, чем устаревший цветовой показатель, который не отражает синтез гемоглобина и его содержание в эритроците.

Возможные ошибки измерения. Параметр МСН является расчетным, поэтому к ложнозавышенным результатам приводят все факторы, влияющие на завышение значений гемоглобина и занижение количества эритроцитов.

Ложнозаниженные результаты МСН получаются вследствие ошибок, связанных с неправильным определением числа эритроцитов (завышения их количества).

Клиническое значение. Изменения МСН лежат в основе разделения анемий на нормохромные (27-31 пг), гипохромные (< 27 пг) и гиперхромные (> 31 пг). Снижение наблюдается при железодефицитных анемиях, повышение – при макроцитарных и особенно мегалобластных анемиях.

МСНС (mean corpuscular hemoglobin concentration) - средняя концентрация гемоглобина в эритроците (г/дл; г/л; %). Показатель МСНС отражает степень насыщения гемоглобином эритроцита или соотношение содержания гемоглобина к объему клетки. Снижение значения МСНС наблюдается при заболеваниях, сопровождающихся нарушени­ем синтеза гемоглобина. Увеличение же параметра МСНС выше нормальных значений свидетельствует об ошибках, допущенных при измерении данной пробы (погрешности определения гемоглобина или MCV), т.к. превышение концентрации гемоглобина выше определенного фи­зиологического уровня привело бы к разрушению (гемолизу) эритроцитов, чего не наблюдалось в данной пробе. Таким образом, данный параметр может быть использован как индикатор ошибок, допущенных на аналитическом или преаналитическом этапах работы.

Возможные ошибки измерения. Поскольку параметр МСНС является расчетным, то к ложнозавышенным результатам приводит любая неточность, связанная с определением гемоглобина, эритроцитов, гематокрита, поэтому этот показатель может быть использован, как индикатор ошибки прибора (в т.ч. и гематологического анализатора) или подготовки пробы к исследованию. Уровень MCHC выше 38% является показателем необходимости повторения анализа или следствием грубой ошибки при его выполнении (см. пример с гипертриглицеридемией).

Нормальные величины колеблются от 30 до 38 % (г/дл) или 300-380 г/л. Повышение MCHC выше 38% встречается крайне редко (наследственный сфероцитоз).

Клиническое значение. В отличии от среднего содержания гемоглобина в эритроците, МСНС не зависит от среднего клеточного объема и является чувствительным тестом оценки нарушения синтеза гемоглобина.

Снижение показателя отражает абсолютную гипохромию и является характерным для железодефицитной анемии. Чувствительность MCHC при железодефицитных анемиях составляет около 85%.

Снижен показатель и при макроцитарных и особенно мегалоцитарных анемиях, т.к. увеличение объема эритроцита не соответствует увеличению в них концентрации Hb.

Низкие значения этого показателя при нормальном или слабо пониженном содержании гемоглобина в крови указывает на наличие гипотонии плазмы и увеличении объема эритроцита.

RDW (red cell distribution width) - показатель гетерогенности эритроцитов по объему, характеризует степень анизоцитоза. Этот показатель вычисляется большинством современных гематологических анализаторов, как коэффициент вариации объема эритроцитов:

SD

RDW(%)= —————— х 100,

MCV

где SD - стандартное среднеквадратическое отклонение объема от среднего значения.

RDW определяет величину колебания эритроцитов по объему. По этому параметру анизоцитоз улавливается прибором значительно быстрее и точнее, чем при визуальном просмотре мазка крови. Оценка степени анизоцитоза под микроскопом сопровождается целым рядом ошибок. При высыхании в мазках диаметр эритроцитов уменьшается на 10-20%. В толстых препаратах он меньше, чем в тонких. Полностью избавиться от артефактов позволяет только автоматизированный подсчет с использованием кондуктометрического метода, где сохраняется стабильность клеток и воспроизводимость результатов, а гистограмма графически отражает частоту встречаемости эритроцитов разного объема.

В то же время показатель RDW характеризует колебания объема клеток внутри популяции и не связан с абсолютной величиной объема эритроцитов. Поэтому при наличии в крови популяции эритроцитов с измененным, но достаточно однородным размером (например, микроциты), значения RDW могут быть в пределах нормы (11,5-14,5%).

Таблица 2.