- •Тема 2. Иммунологические методы исследований. Понятие об иммунограмме
- •Задания для проверки начального уровня знаний.
- •Источники учебной информации
- •Ориентировочная основа действия
- •Иммунологический анамнез
- •Данные клинического обследования
- •Тесты, которые проводятся на больном (in vivo)
- •Лабораторные исследования Исследование факторов естественной резистентности организма
- •Определение показателей фагоцитоза:
- •Иммунологические тесты, которые характеризуют клеточный иммунитет (т – звено).
- •Иммунологические тесты, которые характеризуют гуморальный иммунитет (в – звено).
- •Методы для выявления антител и антигенов
- •Определение уровня аллерген-специфичних IgE
- •Реакции, основанные на выделении сенсибилизированными лейкоцитами медиаторов, ферментов и других биологически активных веществ под влиянием аллергенов.
- •Определение антител, связанных с лейкоцитами
- •Иммунный статус
- •I. Анализ анамнеза:
- •II. Клиническое обследование:
- •Тесты і уровня:
- •Тесты II уровня:
- •Интерпретация иммунограмм
- •Пример 1. Пациентка л., 22 года. Диагноз: Острый фурункулез.
- •Задания для заключительного контроля знаний.
Лабораторные исследования Исследование факторов естественной резистентности организма
Определение С-реактивного протеина Метод выявления С-реактивного белка в сыворотке крови основываются на его способности вступать в реакцию с С-полисахаридом к пневмококку. Нормальная концентрация в плазме крови составляет 0,8 – 8,0 мг/л (иммуноферментный метод). Повышение концентрации происходит при острых воспалительных заболеваниях, опухолях, инфаркте миокарда, внутриматочной инфекции, хронических воспалительных заболеваниях.
Определение пропердина Пропердин – белковый компонент сыворотки крови человека, имеет большое значение как один из факторов естественной резистентности. С его наличием в сыворотке крови в значительной степени связывается ее бактерицидность, антитоксинную активность, способность нейтрализовать вирусы и ряд других защитных свойств.
Определение содержания лизоцима. Лизоцим – это фермент мурамидаза, которая разрушает гликозамингликаны бактериальной стенки. Активность лизоцима определяется биологическим методом серийных растворов, турбодиметричним методом и методом диффузии в агаре.
Определение бактерицидного свойства сыворотки крови. Реакция основывается на способности сыворотки подавлять рост микроорганизмов, который зависит от уровня нормальных антител, пропердину и комплемента. Разведение сыворотки позволяет установить не только ее способность подавлять рост микробов, но и силу бактерицидного действия, которое выражается в единицах. Снижение бактерицидного свойства сыворотки крови происходит при острой лучевой болезни, СПИДе, лейкопеническом лейкозе, хронических инфекциях.
Определение уровня гетерофильных аглютининов. Гетерофильные аглютинины относятся к группе так называемых нормальных антител и являются одним из факторов защиты человека. Образуются эти антитела в результате спонтанной мутации антигенами. Количество гетерофильных аглютининов постепенно нарастает к 5 годам жизни, достигает максимума в зрелом возрасте, и снижается в пожилом. В норме у здоровых лиц они встречаются в среднем разведении сыворотки 1:16, с колебанием титра от 1:8 до 1:32. количество гетерофильных аглютининов определяется с помощью реакции Пауль – Буннеля.
Определение комплемента Общую активность комплемента определяют в гемолитической системе, которая включает эритроциты барана и специфические антиеритроцитарные антитела. Образец исследуемой сыворотки сравнивают с референтной – препаратом, который представляет собой пул сывороток крови здоровых лиц с известной комплементарной активностью. Интенсивность лизиса оценивают спектрофотометричним методом через разные промежутки времени. На основе полученной кривой определяют время 50% гемолизу (Сн50). Кроме общей гемолитической активности комплемента, с помощью радиальной иммунодиффузии по Манчини определяют концентрацию отдельных компонентов комплемента (чаще С3 и С4 ).
Увеличение общего количества комплемента происходит при: обструктивной желтухе, тиреоидите Хашимото, острой ревматической лихорадке, узелковом полиартериите, дерматомиозите, остром инфаркте миокарда, язвенном колите, тифозной лихорадке, сахарном диабете II типа, синдроме Рейтера, подагре.
Уменьшение общего количества комплемента происходит при: СКВ с поражением почек, остром гломерулонефрите, сывороточной болезни, иммунокмплексных заболеваниях, циррозе печенки, комбинированных иммунодефицитах, септическом эндокардите с гломерулонефритом, рецидивирующих ангионевротических отеках, пароксизмальной холодовій гемоглобинурии, миастении Гравис, вирусном гепатите с поражением суставов, смешанной криоглобулинемии, лимфоме.