Методы определения чувствительности бактерий к аб
- Диффузионный метод основан на диффузии АБ из носителя в плотную питательную среду и подавлении роста исследуемой культуры.
- Метод качественный
- В диско-диффузионном методе в качестве носителя АБ используют бумажный диск. Образование зоны задержки роста бактерий происходит в результате диффузии АБ из диска в питательную среду.
- Метод серийных разведений основан на прямом определении минимальной ингибирующей концентрации (МИК) антибиотика.
- Метод количественный.
Для определения МИК заданные концентрации АБ вносят в жидкую питательную среду, добавляют культуру исследуемых бактерий, инкубируют. После инкубации оценивают наличие или отсутствие видимого роста по наличию или отсутствию помутнения, соответственно.
Стерилизация – это комплекс мероприятий, направленных на полное уничтожение вегетативных форм всех микробов и их спор в объектах внешней среды. Стерилизации подвергают инструменты, аппараты, лекарственные препараты, перевязочный материал и белье, питательные среды, растворы, лабораторную посуду. Стерилизацию проводят физическими, механическими и химическими методами.
Методы стерилизации
- Прокаливание в пламени спиртовки. Метод имеет ограниченное применение. Прокаливанием стерилизуют бактериальные петли и иглы, мелкий инструментарий.
- Кипячение – это простой метод, но он не обеспечивает полного обеспложивания, т.к. споры бактерий не погибают. Стерилизуют кипячением в воде с добавлением 1% бикарбоната натрия в течение 45 мин иглы, шприцы, инструменты.
- Стерилизация сухим жаром – проводится в особых аппаратах - печах Пастера или сухожаровых шкафах. Метод основан на бактерицидном действии нагретого до 165 - 180°С воздуха. Сухим жаром стерилизуют всю стеклянную посуду в течение 1 часа при 160 - 170°С.
- Стерилизация паром под давлением
Этот способ основан на том, что пар, образующийся при кипячении воды, не выходит наружу, а скапливается в замкнутом пространстве и повышает давление. Стерилизация паром под давлением производится в автоклаве. При 1 атмосфере (119 - 120°С) в течение 15 - 20 минут стерилизуют: 1) заразные материалы и зараженную посуду; 2) приборы с резиновыми деталями; 3) питательные среды, не содержащие нативного белка и углеводов. Питательные среды с углеводами стерилизуют при 0,5 - 0,7 атмосферах (112 - 115°С).
- Стерилизация текучим паром.
стерилизуют при температуре 100°С в автоклаве с открытым краном.
Однократная стерилизация текучим паром не обеспечивает полного обеспложивания, т.к. при температуре 100°С погибают только вегетативные формы микробов, а споры нет. Полное обеспложивание достигается лишь при дробной стерилизации: после первой стерилизации материал оставляют при комнатной температуре, давая спорам прорасти в вегетативные формы, на следующий день стерилизацию при 100°С повторяют; оставшимся в меньшем числе спорам опять дают прорасти, оставляя при комнатной температуре, через сутки снова стерилизуют при 100°C. После третьей стерилизации при 100°С материал полностью освобожден от бактерий и спор.
Таким образом, стерилизация текучим паром проводится при 100 °С 3 дня подряд по 30 минут. Текучим паром стерилизуют такие материалы, которые портятся или разлагаются при стерилизации паром под давлением (например, молоко, желатин, среды с углеводами и др.).
- Тиндализация – метод дробной стерилизации, предложенный Тиндалем для веществ, не переносящих температуру 100°С (сыворотка крови, витамины).
Материал подвергают нагреванию в течение 5 - 6 дней подряд при 56 - 58°С по 1 часу ежедневно. Тиндализацию проводят на водяной бане.
Дезинфекция - обеззараживание объектов окружающей среды: уничтожение патогенных для человека и животных микроорганизмов с помощью химических веществ, обладающих антимикробным свойством.
Неспецифического действия- дезинфектанты (обработка помещений и др., антисектики- обработка живых тканей).
К наиболее распространенным дезинфицирующим веществам относятся хлорная известь (0,1—10% раствор), хлорамин (0,5—5% раствор), фенол или карболовая кислота (3—5%раствор), лизол (3—5% раствор), двутретьосновная соль гипохлората кальция—ДТСГК (0,1—10% раствор). Выбор дезинфицирующего вещества и его концентраций зависит от материала, подлежащего дезинфекции.
Асептика—система мероприятий, предупреждающих внесение (попадание) микроорганизмов из окружающей среды в ткани или полости человеческого организма при лечебных и диагностических манипуляциях, а также в материал для
исследования, в питательные среды и культуры микроорганизмов при лабораторных исследованиях. Асептика предусматривает стерилизацию инструментов и материалов, специальную обработку рук медицинских работников, соблюдение особых санитарно-гигиенических правил и приемов работы. Методы и правила асептики должны строго соблюдаться при производстве лечебных и профилактических препаратов, а также в работе микробиологических лабораторий.
Антисептика — комплекс лечебно-профилактических мероприятий, направленных на уничтожение микроорганизмов, способных вызвать инфекционный процесс на поврежденных или интактных участках кожи и слизистых оболочек. В качестве антисептиков используются различные химические соединения, оказывающие антимикробное действие: 70% этиловый спирт, 5% спиртовой раствор йода, 0,5—2% раствор хлорамина, 0,1% раствор КМп04, 0,5—1% раствор формалина, 1—2% спиртовые растворы метиленового синего или бриллиантового зеленого, различные детергенты.