микробиология

11. Питательные среды.

Любая микробиологическая работа связана с приготовлением сред для выращивания микро-ормов. Среды необходимы для накопления, выделения и сохранения микроор-мов, а также для выращивания культур в целях исследования их обмена в-в или получения ценных продуктов метаболизма. Среда должна включать все компоненты необходимые для конструктивных и энергетических процессов клетки; источники углерода, азота, зольные элементы, микроэлементы.

При составлении сред следует обязательно учитывать особенности обмена в-в микроорганизма. Кроме того среды для одного и того же микроорганизма могут быть разные в зависимости от задач исследования. Например, среда для длительного хранения микроорганизма в лабораторных условиях значительно отличается то сред предназначенных для получения тех или иных продуктов обмена в-в.

Всякая питательная среда, применяемая для культивирования микроорганизмов должна удовлетворять следующим требованиям:

1. Содержать необходимые питательные в-ва

2. Быть влажной т.к. микробы усиливают только растворенные в-ва;

3. Быть стерильной т.е. не содержать никаких посторонних микроорганизмов;

4. Быть прозрачной что обеспечивает хорошее наблюдение за характером роста микроорганизмов;

5. Иметь соответствующую концентрацию растворенных пит. В-в и соотв. рH

По составу среды для культивирования микроор-мов делят на 2 группы: естественные – среды неопределенного состава и синтетические (натур. И искуствен.).

Натуральные – среды кот. Сост. Из продуктов раст. И жив. Происхождения. К таким относят овощные и фруктовые соки, животные ткани, молоко, вода морей, озер и минер.источников а также отвары или экстракты полученные из прир.субстратов как например мясо, навоз, почва, различные части растений. Натуральные среды необходимы для хорошего роста и развития многих микроор-мов. Однако эти среды имеют сложный непостоянный хим. Состав и мало пригодны для изучения физиологии обмена в-в микроор-мов т.к. практически не позволяют учесть потребление ряда компонентов среды. Используются эти среды для поддержания культур микроор-мов накопления их биомассы и диагностических целей. Примеры: мясопептонный бульон, неохмеленное пивное сусло, дрожжевая и картофельная среды, почвенная вытяжка.

Синтетические среды-среды в состав которых входят только определенные химически чистые соединения взятые в точно указанных концентрациях. Наиболее удобны для исследования обмена в-в микроор-мов. Зная точный состав и кол-во входящих в среду компонентов можно изучить их потребление и превращение в соотв.продукты оьмена.

По назначению различают общие, элективные и дифференциально-диагностические среды. Примеры общих: мясопептонный бульон, агар, желатин; сусло; сусло агар, желатин. На мясных развиваются бактерии, на сусловых дрожжевые и плесневые грибы.

Элективные среды обеспечивают развитие одного вида или группы микроор-мов и менее пригодны для развития других. Применяют для выделения микроор-мов из мест их ест. Обитания или для получения накопительных культур.

Диф-диагностические позволяют быстро отличить одни виды микроор-мов от других. Состав сред подбирается с таким рассчетом чтобы он позволил выявить четко наиболее характерные св-ва определенного вида. Индикаторные среды применяются в клинической бактериологии, при генетических исследованиях, при идентификации микроор-мов. Так при определении видовой принадлежности используют рН-индикаторные среды в состав которых вносят один из индикаторов. Если использование углеводов среды сопровождается образованием кислоты то изменяется цвет индикатора. Это дает возможность быстро определить какие из исследуемых углеводов используют с образованием кислот.

По физическому состоянию: жидкие, плотные и сыпучие.

Жидкие широко применяют для выяснения физиолого-биохимических особенностей микроор-мов. Их также применяют для накопления биомассы или продуктов обмена а также для поддержания и хранения многих микроор-мов плохо развивающихся на плотных средах.

Плотные используются для выделения чистых культур (получ изолированных колоний) в диагностических целях (устан. морфологии колоний, особенности роста на скошенном агаре и др.) для хранения культур, колич. Учета микроор-мов, определения их антагонистических св-в и др.

Сыпучие применяют в пром. Микробиологии (разваренное пшено, отруби, кварцевый песок, пропитанный пит.р-ром)

В настоящее время для уплотнения большинства сред используется агар-агар и желатин. Агар-агар – сложный полисахарид получаемый из нескольких морских водорослей. Удобен тем что большинство микроор-мов не используют его в качестве пит. Субстрата. В воде агар-агар образует гели плавящиеся при 100’С и затвердевающие при температуре около 40. Поэтому на агаризованных средах можно культивировать микроор-мы практически при любой подходящей для их роста температуре. При остывании агар выделяет конденсационную воду. Чем меньше концентрация агара тем больше выделяется воды. Чаще всего добавляют в среду в кол-ве 2%.

Желатин – белок получаемый путем выпаривания костей и хрящей животных. Образуемый желатином гель плавится при температуре +23 +26’С, кот. Ниже обычной температуры инкубации многих микроор-мов (+30 +37’С). Кроме того желатин разжижается протеолитическими ферментами выделяющимися некоторыми микроорма-ми в среду. Это свойство желатина сильно ограничивает его применение в качестве уплотняющего средства. Желатин используется для выявления протеолитической активности микроор-мов а также для получения гигантских и глубинных колоний дрожжей в целях их идентификации.

Стерилизация является одним из важнейших и необх. Приемов в микробиол. Практике. С лат. – обеспложивание. Под стерилизацией понимают полное уничтожение микроор-мов и их спор. Процесс проходит при температуре 112-125’С в течении 20-60мин в автоклавах(перегретым паром под давлением) или при 160-180С в течении 1-2ч в сушильных шкафах (сухим горячим воздухом).

Термическая стерилизация:

1. Прокаливание в пламени горелки (спиртовки)

2. Горячим воздухом

3. Насыщенным паром под давлением (автоклавированием)

4. Дробная стерилизация в кипятильнике Коха.

Пастеризация – нагревание при 63-80С в течении 20-40мин. Иногда кратковременным нагревание до90-100С. Немедленно охлаждают до темп.10’С.

Холодная стерилизация – фильтрование, химически дезинфицирующие средства, ультрафиолетовые лучи.

Возможность и целесообразность того или иного способа определяется особенностями материала, подлежащего стерилизации, его физ. св-вами и химическим составом, целью исследов

12. Чистые культуры микроорганизмов.

Для изучения свойств микроор-мов , находящихся в сырье, полуфабрикатах и продуктах, для определения их морфологических и биохимических свойств необходимо прежде всего изолировать отдельные виды микроор-мов и вырастить их в виде т.н. чистых культур.

Чистой культурой микроор-мов называют такую культуру, которая является потомством одной клетки. Выделение чистой культуры включает три этапа: получение накопительной культуры, выделение чистой культуры, определение чистоты выделенной культуры.

Накопительными называются такие клетки в которых преобладают микроор-мы одной группы или даже одного вида. В целях получения накопительных культур создаются элективные условия, обеспечивающие преимущественно развитие выделяемых микроор-мов. При создании элективных условий следует учитывать разное отношение микроор-мов к аэрации, температуре, кислотности среды и т.д.

Для выделения культур микробов из исследуемого материала (зерна, воды, вина, молока, мяса, почвы и т.д.) в лабораторных условиях использ. Метод посева и пересева. Посевом наз. Внесение части исследуемого материала в чистую стерильную питательную среду. Пересевом – перенос части выросшей на питательной среде культуры микробов на другую свежую стерильную питательную среду.

Техника посева зависит от консистенции питательной среды, на которой желают вырастить культуру микробов. Посев производят с помощью бактериологической петли, иглы или пипетки Пастера. В целях предупреждения загрязнения среды микрофлорой воздуха пробирки держат наклонно над пламенем горелки или спиртовки.

При посеве микроор-мов в жидкую среду стерильную бактериологическую петлю с набранным на нее материалом вносят в пробирку с соблюдением правил асептики. Материал тщательно растирают по стенке пробирки у верхнего края среды все время смывая его водой.

При посеве микроор-мов на плотную среду делается посев культуры одним из трех способов:

1. Посев штрихом – проводят зигзагообразную линию свободно скользя петлей по поверхности среды от одного края пробирки к другому;

2. Посев чертой – проводят петлю по прямой линии по середине поверхности питательной среды;

3. Посев сплошной – растирают материал непрерывными круговыми движениями по всей поверхности питательной среды.

Существует несколько методов получения чистых культур. Чистая культура может быть получена из отдельной колонии и отдельной клетки. Основными методами выделения чистой культуры микроор-мов является метод предложенный Р.Кохом. Этот метод заключается в получении чистой культуры из отдельной колонии, которая считается результатом развития одной клетки.

Высев из накопительной культуры, а чаще ее разведение в стерильном физиологическом р-ре (или водопроводной воде) проводят или поверхностным или глубинным способом в зависимости от отношения микроор-мов к кислороду. Для поверхностного посева приоткрывают чашку Петри и на поверхность плотной среды наносят каплю или «петлю» накопительной культуры или разведения. Нанесенную каплю осторожно распределяют стеклянным шпателем Дригальского, сначала на одной половине поверхности плотной среды в чашке Петри, затем на второй половине после чего этим же шпателем протирают поверхность плотной среды последовательно во 2,3 и4 чашках. Получается т.н. истощающийся «сплошной» рост микроор-мов тогда как в последующих образуются изолированные друг от друга колонки.

При глубинном методе посева исследуемый материал вносят в пробирку с расплавленной твердой пит.средой. содержание пробирки тщательно перемешивают и петлей переносят каплю в следующую пробирку, после перемешивание в следующую и т.д. чтобы среда в пробирках не застывала их помещают в баню с 45-50’С. После последовательного разбавления исслед.взвеси микробов содержание пробирки переносят в стерильные чашки Петри. После застывания среды чашки ставят в термостат на проращивание крышкой вниз. На крышке отмечены разведение и дата опыта. Выросшие отдельные колонии в дальнейшем отсеиваются в стерильную питательную среду для получения чистых культур.

Получ. Чистых культуры из одной клетки можно производить капельным методом и с помощью микроманипулятора.

Капельный метод Линднера используется при работе с крупными микроор-мами (дрожжи, мицелиальные грибы, водоросли). Для выведения чистых культур этим методом разведение накопительной культуры проводят в стерильной среде с таким расчетом чтобы в небольшой капельке разведения были единичные клетки микроор-мов. Затем готовят преперат висячая капля. Нанесенные на покровное стекло капли микроскопируют и отмечают те из них в которых обнаружена только одна клетка.

После этого препарат висячая капля перемещается в чашку Петри на дне которой находится увлажненная фильтровальная бумага и чашку ставят в термостат. Через 12-24ч первоначально отмеченные капли вновь микроскопируют. Те капли в которых произошло размножение клетки осторожно снимают спокровного стекла кусочками стерильной фильтровальной бумаги и переносят в пробирки со стерильной жидкой средой. Выделение чистой культуры с помощью микроманипулятора позволяет производить очень тонкие операции под микроскопическим контролем. Спец. Инструменты находятся в наборе к микроманипулятору (иглы, микропипетки и т.д.) позволяют выбрать и перенести в пит.среду любую клетку микроор-мов.

Чистота культуры выделенного ор-ма должна быть обязательно проверена. Это осуществляется несколькими способами: визуальным, микроскопическим контролем и высевом на ряд пит. сред. Визуальный контроль проводят когда выделенная культура микроор-мов высеяна на поверхность скошенного агара. Если культура чистая то характер ее роста на скошенном агаре однороден по всему штриху. Если штрих неоднороден культура считается загрязненной. Проверка чистой выделенной культуры обязательно включает микроскопический контроль. Для этого готовят раздавленную каплю или фиксированный окрашенный раствор и изучают с объективом 40х и 80х. чистая культура морфологически однородна , допустимо незначительное варьирование размеров клеток. Однако надо помнить что некоторые культуры микроор-мов очень полиморфны поэтому определние чистоты таких культур при микроскопировании затруднено.

Помимо визуального и микроскопического контроля чистоту полученной культуры микроор-мов проверяют высевом ее на ряд питательных сред. Прежде всего высевают на плотную среду, благопричтную для развития культуры. Высев производят с таким расчетом чтобы получить изолированные колонии, однородность которых свидетельствует о чистоте выделенной культуры микроор-мов. Обязателен посев на МПА среду, благоприятную для развития многих гетеротрофных микроор-мов, а также высев на ряд таких сред как С, МПБ, картофель агар и др. набор сред и их состав определяется особенностями обмена в-в, выделяемых микроор-мов и их возможных спутников.

13.Рост и размножение микроорганизмов. Сложные процессы метаболизма, происходящие в клетке, отражаются такими явлениями как рост и размножение микроорганизмов. «Рост» означает увеличение массы клеток в результате си6нтеза клеточного материала. Интенсивность роста микроорганизмов можно определить делением их массы на численность особей в единице объема в отдельные промежутки времени. Рост индивидуальной клетки заканчивается размножением. Различают четыре основные последовательные фазы роста культуры: -начальная фаза-лаг-фаза (фаза задержки роста); -логарифмическая фаза- лог-фаза; -стационарная фаза; - фаза отмирания. Лаг-фаза- период задержки роста микроорганизмов, в течение которого внесенные в питательную среду микробы адаптируются к питательной среде и начинают размножаться с нарастающей скоростью. Продолжительность лаг-фазы составляет 1-4 часа и зависит от видовых особенностей микроорганизмов, количества засеваемого материала, питательных веществ и др. В этой фазе размеры клеток в три-пять раз больше обычных, имеют большукю биохимическую и энергетическую активность и отличаются повышенной чувствительностью к различным бактерицидным факторам. Логарифмическая фаза характеризуется быстрым и постоянным размножением микробов. Количество клеток увеличивается в геометрической прогрессии. В этот период морфологические свойства типичны для данного вида, вся популяция однородна, устойчивость клеток к неблагоприятным факторам возрастает. Продолжительность этой фазы 5-8 часов. Для длительного нахождения микроорганизмов в этой фазе (в так называемой непрерывной культуре) в сосуд непрерывно вводят новые порции питательной среды и одновременно удаляют из него соответствующее количество микробной суспензии вместе с продуктами метаболизма. Стационарная фаза завершает период роста культуры и продолжается 4-5 часов. Она характеризуется сбалансированным размножением и отмиранием микроорганизмов. Отмирание микроорганизмов происходит в результате истощения питательной среды и накоплением продуктов обмена. В этой стадии наряду с типичными клетками встречаются дегенеративные и инволюционные формы. Фаза отмирания (старение культуры) характеризуется массовой гибелью клеток, т.е. гибелью с постоянной скоростью через равные промежутки времени. Причиной отмирания клеток является изменение физико-химических свойств среды и лизис клеток под действием собственных ферментов. Микробы могут утрачивать подвижность, способность воспринимать окраску, у споровых видов наряду с отмиранием вегетативных клеток происходит образование спор, меняется биохимическая активность и т.д. Продолжительность фазы может составлять от 7-10 суток до 30. Рост микроорганизмов в жидкой питательной среде может проявляться помутнением и изменением цвета среды, наличием или отсутствием пристеночного кольца и поверхностной пленки различного характера, наличием или отсутствием осадка. При размножении на плотных питательных средах микроорганизмов образуют колонии, которые представляют собой видимые скопления особей одного вида и формирующиеся в результате размножения, как правило, одной клетки. Они бывают круглой, розеткообразной, звездчатой, древовидной формы. Могут иметь поверхность гладкую, пушистую, выпуклую, плоскую, куполообразную, вдавленную. Строение края колонии могут быть ровным ( С-форма) и шероховатым (Р-форма). Различают колонии по размеру диаметра: мелкие-1-2мм, средние 2-4мм, крупные свыше 4 мм. Колонии отличаются также по консистенции, плотности, прозрачности и цвету. Различные виды микроорганизмов образуют специфические колонии на плотных питательных средах и дают характерный рост на жидких средах. Особенности роста микробов на питательных средах называют культуральными свойствами.

14.Физические факторы. Температура. Температура внешней среды является мощным фактором воздействия на организмы, который определяет не только интенсивность их развития, но и вообще возможность развития. Принято различать три основные температурные точки, имеющие значение для развития микробов: температурный оптимум, минимум и максимум. Температурный оптимум- температура, при которой данный вид микробов наиболее хорошо развивается, т.е. температура соответствующая физиологическим требованиям соответствующего микроорганизма. При температурном минимуме или максимуме развитие микробов еще возможно, но уже ограничено. При температуре выше максимума микробы обычно погибают. При температуре ниже минимума они переходят в состояние анабиоза, а при повышении температуры могут возвращаться к активной жизни. Психрофилами(холодолюбивые) - называют микроорганизмы, область температур роста которых лежит в пределах от 0 (или ниже) до 20 С, хотя оптимум составляет 15С. Психрофильные микроогранизмы являются обитателями холодных источников. Глубоких озер и океанов, хорошо развиваются на продуктах при холодильном хранении. Наиболее сильной устойчивостью к низким температурам обладают плесневые грибы и гнилостные бактерии (-3-9С). Мезофиллы(средн темп.) живут при средних температурах. Самая распространенная группа микроорганизмов (бактерии, плесневые грибы, дрожжи). Мезофиллами являются все патогенные и условно-патогенные микроорганизмы и большинство сапрофитных. Термофилы(теплолюбивые) развиваются при высоких температурах. Они в большом количестве встречаются в почве, сточных водах и в навозе, в гейзерах, песках пустынь. Они участвуют в ряде биологических процессов: при самосогревании влажного сена и хлопка, силосовании кормов, вызывают порчу пастеризованных и стерилизованных продуктов. Отношение микроорганизмов к различным температурам стали использовать для сохранения различных пищевых продуктов. В пищевой промышленности применяют два способа воздействия высоких температур: пастеризация и стерилизация. Влажность. Микроорганизмы могут развиваться только в субстратах. Имеющих свободную воду и в количестве не менее определенного уровня. С понижением влажности субстрата интенсивность размножения микробов замедляется, а при удалении из субстратов ниже необходимого уровня вообще прекращается. Потребность во влаге у различных микроорганизмов колеблется в широких пределах по величине минимальной потребности во влаге для роста различают следующие группы: гидрофиты (влаголюбивые), мезофиты (средневлаголюбивые), ксерофиты (сухолюбивые). Гидрофитами являются большинство бактерий, а мицелиальные грибы и дрожжи мезофиты, но имеются среди них и гидрофиты. Для развития микроорганизмов имеет значение не абсолютная величина, а доступность содержащейся в субстрате воды, которую в настоящее время принято обозначать термином водная активность или а _w. Водная активность показывает отношение давления водяных паров раствора (субстрата ) Р и чистого растворителя (воды) Р_о при одной и той же температуре: а _w = Р/Р_о. Водная активность выражается величинами от 0 до 1 и характеризует относительную влажность субстрата. Рост микроорганизмов наблюдается при значениях а _w от 0,99 до 0,65-0,61. Относительная влажность воздуха изменяется от температуры: с понижением температуры воздуха уменьшается его влагоудерживающая способность и наоборот. Поэтому при снижении температуры в процессе хранения это приводит к увлажнению поверхности продукта, что способствует развитию находящихся на нем микробов. Концентрация растворенных веществ и осмотическое давление. Внутриклеточное осмотическое давление обусловлено концентрацией растворенных веществ в цитоплазме клетки. У разных микроорганизмов оно колеблется в широких пределах и этим объясняется тот факт, что различные микроорганизмы могут обитать в пресной воде и соленых водах морей. Высокие концентрации осмотически активных веществ способствуют плазмолизу микробных клеток. В качестве осмотически деятельных веществ, применяемых для консервирования пищевых продуктов, используют поваренную соль и сахар. Лучистая энергия. Различные формы лучистой энергии оказывают на микроорганизмы разнообразное физическое, химическое и биологическое действие. Биологическое действие излучения зависит от длины волны, чем оно короче , тем в нем больше заключено энергии, тем сильнее воздействие на организм. В основе действия лежат физические и химические изменения, происходящие в клетках микроорганизмов и в окружающей среде. Изменение могут быть вызваны только поглощенными лучами. Следовательно, для эффективности действия излучения большое значение имеет проникающая способность лучей. Солнечный свет обладает наибольшим потенциалом вредного воздействия на микроорганизмы. Способность использовать энергию солнечного света лишь пигментобразующие формы бактерий. Микроорганизмы, не имеющие пигмента, погибают под действием прямых солнечных лучей. Рассеянный солнечный свет подавляет их развитие постепенно. Однако, развитие многих мицеллиальных грибов при постоянном отсутствии света протекает ненормально, хорошо развивается только мицелий , а спорообразование только тормозится. Под влиянием солнечных лучей происходит внутриклеточные химические реакции с образованием гидроксильных радикалов и других высокореактивных веществ. Действующих губительно на микробную клетку. Ультрафиолетовые лучи (УФ - лучи) обладают или бактерицидным или мутагенным действием. Это вызывается изменениями в структуре ДНК. Из всех микроорганизмов наиболее чувствительны к УФ - лучам вегетативные формы бактерий, а споры бацилл в 4-5 раз более устойчивы. Очень чувствительны к УФ- лучам патогенные микроорганизмы. Эффективность воздействия УФ - лучей зависит от дозы облучения, длительности и свойств облучаемого субстрата (рН, степень обсеменения микробами и температура). Очень малые дозы облучения действуют даже стимулирующее на отдельные функции микроорганизмов. Более высокие могут вызвать изменение наследственных свойств. Это используется на практике для получения различных штаммов микроорганизмов с высокой способностью продуцировать антибиотики, ферменты и др. БАВ. Дальнейшее увеличение дозы приводит к гибели. Космические и рентгеновские лучи представлены ионизирующими излучениями с длиной волны от 0,006 до10 нм. Они оказывают мутагенное или летальное действие. К действию таких лучей наиболее чувствительны ядерные структуры, хотя повреждаются цитоплазматические структуры клеток. Искусственное ионизирующее излучение (α- и -частицы, -лучи) возникает в результате работы атомных электростанций, испытаний ядерного оружия. применения радиоактивных изотопов в научных целях. Радиоволны. Короткие электромагнитные волны длиной от 10 до 50 м, ультракороткие длиной от10м до мм обладают стерилизующим эффектом. При прохождении коротких ультракоротких радиоволн через среду возникают переменные токи высокой частоты (ВЧ) и сверхвысокой частоты (СВЧ). В электромагнитном поле электрическая энергия преобразуется в тепловую. Характер нагревания в СВЧ поле отличается от характера нагрева от обычных нагреваний и обладает рядом преимуществ. Объект нагревается быстро и равномерно по всей массе. Например, воду в стакане можно довести до кипения в течение двух –трех секунд. Рыба (1кг) варится до готовности в течение двух мин., мясо (1кг)-2,5 мин., курица 6-8 мин.. Нагрев может происходить избирательно, отдельные части облучаемого объекта нагреваются в разной степени и зависят от их электрофизических свойств. Благодаря специфическим особенностям перспективно применение этого способа нагревания для пастеризации и стерилизации пищевых продуктов (например, в плодово-ягодных консервах). По сравнению с обычной паровой стерилизацией в автоклавах время нагревания СВЧ- энергией до одной и той же температуры сокращается во много раз. Поэтому полнее сохраняются вкусовые и питательные свойства. Эффект воздействия на его микрофлору практически одинаков. Ультразвук. Ультразвуком называют механические колебания с частотами более 20000 колебаний в секунду (20 кГЦ). Колебания такой частоты находятся за пределами слышимости человека. Ультра звуковые волны могут распространяться в твердых, жидких и газовых средах. Обладают большой механичесокй энергией и вызывают ряд физических, химических и биологических явлений. Механизм бактерицидного действия ультразвука объясняется двумя теориями: кавитацонно-механической и кавитационной электрохимической. По первой теории считают, что ультразвуковые волны распространяясь в упругой среде вызывают в ней попеременные сжатия и разряжения. В клетке создаются огромные давления, достигающие десятков и сотней мПа, что вызывает механическое разрушение цитоплазматических структур и гибель клетки (кавитация). Кавитационная электрохимическая теория объясняет ионизацию паров жидкостей и присутствующих в ней газов при образовании кавитационного пузырька. При разрыве пузырька происходит электрический разряд сопровождающийся резким повышением температуры и образованием в кавитационной полости электрического поля высокого напряжения. При этом пары жидкости и высокомолекулярные соединения в кавитационной полости расщепляются на водород и гидроксильную группу с образованием активного кислорода. перекиси водорода, азотистой и азотной кислот, в результате чего происходят инактивации ферментов и коагуляция белков. Все это обуславливает гибель микробной клетки. Эффективность действия УЗ при одной и той же интенсивности и частоте колебаний зависит от продолжительности воздействия. Химичесокого состава облучаемой среды. Ее вязкости , температуры, рН и исходной степени обсемененности микроорганизмами. Чем больше микроорганизмов, тем продолжительнее должно быть воздействие для получения стерилизующего эффекта. Устойчивость микроорганизмов к действию ультразвука зависит от их биологических свойств. Вегетативные клетки более чувствительны чем споры, кокковые формы погибают медленнее чем палочковидные. Более крупные клетки микроорганизмы отмирают быстрее, чем мелкие. Ультразвук применяют для стерилизации пищевых продуктов (молоко, фруктовые соки, вина). Изготовления вакцин, мойки и стерилизации стеклянной тары, а также при извлечении внутриклеточных ферментов. Токсинов. Витаминов, нуклеиновых кислот и других компонентов клетки. Ведутся исследования по применению УЗ энергии для стерилизации питьевой воды.