Свойства белков

• Взаимодействие белков с лигандами

Насыщение белка лигандом

• Денатурация -- Разрыв слабых связей в белке и разрушение трехмерной структуры молекулы

• Высаливание

• Изменение суммарного заряда молекул в соответствии с рН

• Гидролиз кислотный, щелочной, ферментативный

Формирование положительно зараженных аминокислот при кислотном гидролизе

• Белки – это коллоиды

Диализ – очистка белковых растворов от низкомолекулярных соединений

Размер белковых молекул лежит в пределах 1 мкм до 1 нм и, следовательно, они являются коллоиднымичастицами, которые в воде образуют коллоидные растворы. Эти рас-творы характеризуются высокой вязкостью, способностью рассеивать лучи видимого света, не проходят сквозь полу-проницаемые мембраны.

Кривая насыщения кислородом миоглобина и гемоглобина

Методы обнаружения, идентификации белков и оценки их аминокислотного состава

• Химические методы. Качественные и количественные реакции на аминокислоты и белки

• Физико-химические методы:

  • Электрофорез;

  • Хроматография;

  • Спектрометрия;

  • Иммуноферментные методы (ИФА)

Исследование белкового обмена

• Общий белок крови и мочи

• Альбумин сыворотки крови

• Белковый спектр сыворотки или плазмы крови

• Тимоловая проба

• Остаточный азот сыворотке крови и моче :

  • Мочевина

• Креатинин

• Мочевая кислота

• Аммиак

• Оксид азота

Ферменты

от лат. fermentum – брожение или закваска от греч. enzyme – внутри закваски

Ферменты – это органические вещества белковой природы, которые синтезируются в клетках и во много раз ускоряют протекающие в них реакции, не подвергаясь при этом химическим превращениям.

Практически все биохимические реакции катализируются ферментами.

Свойства ферментов

Все ферменты – это белки и свойства белков являются свойствами ферментов.

Кроме того, ферменты имеют уникальные свойства:

• высокую эффективность действия;

• специфичность действия;

• способность к регуляции.

• изменением эффективности в соответствии с условиями среды, т.е. скорость ферментативных реакций существенно зависит от температуры и рН.

Зависимость скорости ферментативных реакций от рН

1 — пепсин ё 2 — рибонуклеаза 3 — аргиназа

Единица скорости ферментативной реакции - 1 МЕ (международная единица). Это такое количество фермента, которое катализирует превращение 1 мкМ субстрата в продукт за 1 минуту в оптимальных условиях.

Строение ферментов

Относительные размеры фермента и субстрата

Простой фермент имеет только белковую часть.

Сложный фермент (Холофермент ) = Апофермент + кофермент или кофактор

(белок) (небелковая часть)

Кофактор сидит в ферменте.

Кофермент циркулирует от одного фермента к другому.

Ферменты и их кофакторы

Ферменты	Ион металла
Цитохромоксидаза, каталаза, пероксидаза	Fe2+ Fe3+
Алкогольгидрогенеза, DNA – полимераза	Zn2+
Гексокиназа, глюкоза – 6 – фосфатаза	Mg2+
Уреаза	Ni2+
Нитратредуктаза	Mo
Глутатионпероксидаза	Se