- •Теоретические основы микротомии
- •Ручной микротом
- •Режущая машина Adams, 1798
- •Ручные режущие машины
- •Микротомы Quickett и Schanze
- •Санные микротомы 1
- •Микротом с особым типом движения ножа
- •Микротомы со стационарным ножом
- •Основные типы современных микротомов
- •Санный микротом
- •Ротационный микротом
- •Расправление срезов 1
- •Расправление срезов 2
- •Типы ножей для микротома
- •Типы одноразовых лезвий
- •Одноразовые лезвия Shandon
- •Одноразовые лезвия Surgipath
- •Одноразовые лезвия Feather
- •Одноразовые лезвия Sturkey
- •Лезвия ERMA, Richard-Allan-Scientific, Microm
- •Какой тип лезвия лучше?
- •Преимущества многоразового микротомного ножа
- •Преимущества одноразовых лезвий
- •Проверка качества режущей кромки
- •Заточка ножа 1
- •Заточка ножа 2
- •Заточка ножа 3
- •Заточка ножа 4
- •Заточка ножа 5
- •Заточка ножа 6
- •Артефакты режущей кромки ножа 1
- •Артефакты режущей кромки ножа 2
- •Геометрия углов края ножа
- •Установка ножа в микротоме
- •Оптимальный угол наклона лезвия в ротационном микротоме
- •Зачем нужна ретракция блока?
- •Аспекты края ножа
- •Определение угла наклона ножа
- •Аспекты микротомного ножа
- •Вид парафина
- •Диаграмма напряжений при резке
- •Изменения переднего угла резки
- •Деформации в парафине
- •Тепловой эффект микротомии
- •Деформации срезов при резке. Вид с боку. 1
- •Деформации срезов при резке. Вид с боку. 2
- •Деформации срезов при резке. Вид с боку. 3
- •Деформации срезов при резке. Вид с боку. 4
- •Деформации срезов при резке. Вид с боку. 5
- •Сдавливание срезов при резке 1
- •Сдавливание срезов при резке 2
- •Ткани, залитые в парафин 1
- •Ткани, залитые в парафин 2
- •Последовательность операций микротомии
- •Артефакты микротомии 1
- •Артефакты микротомии 2
- •Артефакты микротомии 3
- •Артефакты микротомии 4
- •Артефакты микротомии 5
- •Причины
- •Ленты закручиваются вбок
- •Неадекватная поддержка ткани
- •Сдавленные срезы в ленте
- •Чередование толстых и тонких сдавленных срезов
- •Середина срезов выбухает
- •Объект выпадает из блока или разбивается об нож
- •Разрезанные ленты
- •Ленты прилипают к блоку
- •Меры борьбы со статическим электричеством
- •Дефект
- •Сдавленные, сморщенные и сжатые срезы
- •Деформации угла поворота ножа на санном микротоме
- •Величина угла резки и угол поворота
- •Правила адекватной фиксации
- •Оптимальная скорость резки в потоке работы
- •Микротомия без участия человека?
- •Общие трудности в микротомии
- •Цитированная литература
- •Благодарю за внимание!
Диаграмма напряжений при резке |
A. Диаграмма |
|
|
|
напряжений |
|
режущего |
|
инструмента |
|
|
|
дробильной |
|
машины |
|
(модификация |
|
из Coker and |
|
Filon). Темные |
|
области |
|
вблизи 0 |
|
показывают |
|
участки |
|
пластической |
|
деформации. |
|
B. Основные |
|
линии |
|
разрезов в |
|
области края |
|
ножа (из |
|
Okoshi and41 |
|
Fukui). |
|
Изменения переднего угла резки
Структура
толстых
парафиновых срезов для разных передних углов наклона ножа.
Пунктирные и тонкие линии показывают области непрозрачног о парафина.
Стрелки
показывают
направление
движения
ножа
42
Деформации в парафине
Пластические свойства твердого парафина зависят от температуры. Если парафин подвергается сжатию, растяжению или резке при различных температурах, возникают ответы разного типа выше или ниже некоторой критической температуры, которая называется точкой пластичности.
При внезапном сжатии парафина под большой нагрузкой - удар молота или сдавления сосуда тисками он мнется и выглядит молочно-белым, если температура не превышает точку плавления на 20°С. Прозрачность заметна при низких температурах, но после охлаждения кубиком льда он рассыпается или в нем возникают большие трещины. Непрозрачность также является следствием мелких расщеплений и воздушных полостей, появляющихся и между кристаллами и главным образом на периферии пластинок кристаллов.
43
Тепловой эффект микротомии
При резке тонких срезов возникает нагрев от трения, даже если блок и нож холодные. При резке парафин превратится в пластический поток. Срезы заметно укоротятся. Парафин с высокой точкой плавления дольше сохраняет свойства, пригодные для резки тонких срезов.
44
Деформации срезов при резке. Вид с боку. 1
Продольный срез через 10 мкм парафиновый срез и блок, показывающий деформацию при резке. Срез плавится. X 175.
Этот и следующие срезы были сделаны с поперечном положении ножа и передним углом 60°; парафин Bioloid с точкой плавления 56- 58°С; при температуре 27°С.
45
Деформации срезов при резке. Вид с боку. 2
100 мкм срез, вид сбоку. X 100.
Деформации
показаны
стрелками.
Толстый срез через тот же блок, показыва- ющий скольже- ние кристаллов
(а) и текучий поток (b).
Межкристалличе ские пустоты "а", образуют основу для непрозрачности46.
Деформации срезов при резке. Вид с боку. 3
50 мкм срез. X 100
Дальнейшее разделение кристалла краем ножа доказывает межкристаллические движения, однако, в этом случае они ассоциированы с разрушением связей кристаллов. Это видно справа "с". Планы пластических сдвигов показаны как "d". Выступающие концы кристаллов слева от поверхности блока помогают разрушить кристаллы по одному, поверхностями скольжения, которые действуют максимально близко к движению края ножа
47
Деформации срезов при резке. Вид с боку. 4
50 мкм срез, сделанный тупым ножом. X 50.
Поверхности скольжения подобны показанным выше, на рис 7 для толстых срезов с передним углом ножа от 0° до 30°.
Они четко доказывают, что номинально передний угол ножа мог быть таким же, как и для других срезов, и резка была выполнена при комнатной температуре
48
Деформации срезов при резке. Вид с боку. 5
30 мкм срез, сделанный тупым ножом. X 175.
Участок перед разъединением выглядит сжатым горизонтально из- за напряжения.
Заметен эффект подъема и разлома (вертикальное напряжение) в кристалле перед краем ножа.
Внутрикристалли- ческие линии сдвига предположительны е. 49
Сдавливание срезов при резке 1
13. Слабо сдавленный парафиновый срез (до 17%). Видны поперечные срезы кристаллов с выступающими осевыми участками и гексагональными границами. Серый участок внизу – остаток до оригинального размера блока.
Парафин с т. пл. 50-52°С; температура резки 24°С; X 100.
14. Сильнее сдавленный
срез (до 25%).
50