4. Методы диагностики гельминтозов

Прижизненная. Материал: фекалии, кровь, моча, кожа, мышцы, сухожилия, истечения из глаз, содержимое желудка и другие ткани

Посмертная. Неполное или полное вскрытие

Качественные. установление вида паразита и экстенсивности инвазии – ЭИ

Количественные. определение интенсивности инвазии – ИИ

Аллергические и иммунологические тесты. Рнга, рид, рга, рп, ифа, иммуноблоттинг

Антигены для иммунологии. Соматические: сами гельминты, белковый экстракт из гельминтов. Экскреторно – секреторные (метаболиты): Естественное паразитирование в организме животных (жидкость эхинококковых цист); культивирование гельминтов в искусственных питательных средах

Чувствительность. % выявления положительных проб: 95% - (95 положительных ответов из 100 больных)

Специфичность. % выявления отрицательных проб: 80% - (80 отрицательных ответов из 100 здоровых)

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)- выделении и многократном копировании (репликации) определенного участка ДНК, который называется маркером. Так как маркерный участок является уникальным для каждого вида живых существ, специфичность ПЦР приближается к 100%

Гельминтоскопические методы - обнаружения в исследуемом материале половозрелых и юных гельминтов или их фрагментов. Гельминты могут быть обнаружены в фекалиях, бронхах, брюшной полости, сухожилиях, мочевом пузыре, лоханках почек, полости сердца.

Применяют микроскопы, лупы. Кюветы, чаши петри, тазы, стаканчики, скальпели, ножницы, фильтровальные сита.

Гельминтоовоскопические методы.

-метод нативного мазка-берут небольшой кусочек фекалии, помещают на предметное стекло, разбавляют 1-2 каплями воды или смеси глицерина с водой. Осадок исследуют под микроскопом.

-метод соскоба с перианальных складок- диагностики оксиуроза лошадей и пассалуроза кроликов. Лопаточку смачивают смесью глицерина с водой и делают соскоб с перианальных складок. Соскоб переносят на покровное стекло, накрывают покровным и исследуют под микроскопом.

-метод последовательных смывов-3-5 грамм фекалий, в ступке смешивают с 10-кратным количеством воды и фильтруют. Затем отстаивают пробы 10 минут, затем жидкость сливают до осадка, к ней прибавляют свежую воду и дают отстояться 8 минут. Процедуру выполняют до тех пор пока верхний слой жидкости не станет светлее. Жидкость сливают, а осадок исследуют под микроскопом

-флотационные методы-этот метод основан на принципе разницы удельных масс яиц и используемых солевых растворов.

-метод фюллеборна- Берут фекалии, помещают в ступку и заливают р-ром, затем после тщательного растирания фекалий в смесь добавляют 200 мл р-ра и процеживают через сито в сухой чистый стакан, размешивая стеклянной палочкой. Взвесь отстаивают 10-15 минут, затем с поверхности жидкости снимают пленку, переносят на предметное стекло и микроскопируют.

-метод Дарлинга-сочетает осаждение и флотацию. Проводят обычные исследовательские смывы. Затем осадок центрифугируют 2-3 минутф 3000 оборотов. Верхний слой жидкости сливают, а к осадку добавляют смесь поваренной соли и глицерина. Пробирку встряхивают для тщательного смешивания содержимого и вновь центрифугируют. Снимают каплю с поверхности жидкости и сследуют под микроскопом.

-метод щербовича- в качестве флотационной жидкости используют один из стрех растворов- сульфат магния, тиосульфат натрия, нитрат натрия. Фекалии кладут в стакан, добавляют воду и размешивают стеклянной палочкой до получения однородной смеси, затем смесь процеживают в чистый стакан. После отстаивания жидкость сливают, а осадок центрифугируют 2-3 минуты. По окончании надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют р-р. Осадок размешивают, центрифугируют. Затем снимают пленку и микроскопируют.

Котельникова - хренова -кал + вода , фильтруют, центрифугируют 3 мин, 1500 оборотов, надосадок сливают, +аммиачная селитра + центрифуг + солевой раствор - на стекло

Гельминтоларвоскопические методы личинок

Метод Бермана-Орлова- применяют для диагностики легочных и кишечных нематодозов. высвобождаются из толщи фекалий или ткани и попадают на дно посуды. Пробы фекалий помещают на сетку, слабо натянутую на широкую часть воронки. С другой стороны на конец воронки надевают резиновую трубку с пробиркой. Затем в воронку наливают воду, так чтобы масса фекалий поместилась в нее и оставляют на 3-6 ч, или на 6-12.затем резиновую трубку отсоединяют от воронки, сливают воду и микроскопируют осадок.