Тема 9. Принципы диагностики вирусных инфекций

Для эффективной борьбы с вирусными болезнями имеет большое значение быстрое и точное установление диагноза. Потому, что многие вирусные болезни (ящур, оспа, чума свиней, болезнь Ньюкасла, грипп птиц и др.) быстро распространяются и вызывают большой процент падежа. Постановка диагноза на вирусные болезни состоит из двух этапов:

1. Клинико-эпизоотологической диагностики, производимой непосредственно в хозяйстве, и чаще всего этот диагноз бывает предварительным.

2. Лабораторная диагностика, которая проводится в вирусологическом отделе областной ветеринарной лаборатории. Этот диагноз бывает окончательным и точным.

Первый этап складывается из изучения клиники болезни, эпизоотологического состояния и учета патологоанатомических изменений. При многих вирусных болезнях эти признаки бывают трудно различимыми, не позволяют поставить уверенный диагноз. Поэтому необходима лабораторная диагностика. Для постановки лабораторной диагностики большое значение имеет правильное взятие патологического материала и его отправка. При взятии патологического материала от больных животных или их трупа нужно учесть то, что вирусы обладают способностью избирательно поражать отдельные ткани (тропность) и в этих органах накапливаются в наибольшем количестве. Например, вирус бешенства – в мозговой ткани (нейротропные), вирус оспы – в коже и слизистой оболочке (дерматропные) и т.д. Поэтому преимущественно эти органы и нужно отправлять в лабораторию. Патологический материал необходимо отправлять в лабораторию в замороженном состоянии (в термосе со льдом), так, как вирусы хорошо выдерживают низкую температуру, а при плюсовой температуре могут инактивироваться.

Тема 10. Профилактика и химиотерапия вирусных инфекций

Основным способом борьбы с вирусными болезнями является их профилактика, т.е. предупреждение. Вакцина представляет собой биологический препарат, приго­товленный из возбудителей инфекции, лишенных патогенных свойств, но сохранивших иммуногенные свойства, т.е. выработку антител. Основоположником вакцинации считают английского врача Э. Дженнера, сделавшим первую вакцинацию от натуральной оспы. Л. Пастер в честь Дженнера предложил называть все препараты, предназначенные для создания искусственного иммунитета называть вакцинами (vacca – корова), а саму процедуру – вакцинацией. Л. Пастер со своими учениками разработал теорию ослабления (аттенуации) вирулентных свойств микробов, разработал вакцину против бешенства – это был первый случай в истории человечества спасения человек с помощью вакцины, созданной руками человека.

Вакцины делят на живые и инактивированные.

В вакцинах, приготовленных из цель­ных вирионов, лишь поверхностные протективные антигены вызывают раз­витие иммунитета. Остальные белки и липиды лишь усиливают реактогенность. Используют расщепленные вакцины (сплит-вакцины), которые получают путем инактивации вирусного генома и удаления липидов. Та­кие вакцины менее реактогенны, чем цельновирионные, однако в них сохранены балластные вирусные белки, не играющие роли в создании протективного иммунитета.

Субъединичные вакцины лишены этих недостатков. Их готовят следующим образом: очищенные препараты вируса разрушают детергентами, ферментами, органическими растворителями липи­дов и т. д. Затем выделяют поверхностные протективные антигены. Очищенные препараты стерилизуют и концентрируют. Получен­ные таким путем субъединичные вакцины не содержат геномов возбудителей и балластных антигенов, обладают минимальной реактогенностью, однако иммуногенные свойства их обычно слабее, чем у цельновирионных вакцин.

Синтетические вакцины - это антигенные детерминанты вирусных белков. Они содержат искусственно синтезированные короткие пептиды, имитирующие небольшие участки протективных антигенов вируса, спо­собные вызвать специфический иммунный ответ организма и за­щитить его от конкретного заболевания. Для получения таких вакцин используют автоматические синтезаторы. Они получены из вириона, искусственным химическим синтезом, комплексом методов генной инженерии. Чистые антигены не всегда обладают достаточной иммуногенностью. Чтобы усилить иммунный ответ используют носители: иммуномодуляторы, адъювантов.

Принцип создания генно-инженерных вакцин заключается в том, что интересующий нас ген «вырезают» из ДНК вируса с помощью ферментов (рестриктаз) и встраивают, используя ферменты (лигазы), в ДНК вектора (плазмида Е. coli). Затем эту рекомбинантную ДНК вводят в клетки Е. coli, в которых рекомбинантная ДНК размно­жается и происходит синтез встроенного гена. Бактериальные клетки Е. coli культивируют в питательной сре­де, и происходит «наработка» иммуногенного белка вируса, кото­рый выделяют и после соответствующей очистки используют в ка­честве материала для вакцины. Однако многие вирусные белки, синтезированные в микроорга­низмах, имеют очень низкую иммуногенную активность.

Трудность противовирусной химиотерапии заключается в создании препаратов, избирательно подавляющих репродукцию вируса и не затрагивающих процессы жизнедеятельности клеток и всего организма в целом.

Поиск антивирусных препаратов идет по двум направлениям: направленный поиск и скрининг. В первом случае предпринима­ются попытки использовать известные свойства химических со­единений для целенаправленного воздействия на тот или иной этап репродукции вируса. Второй путь опирается на скрининг (отбор, просеивание), предполагая вылавливание активных препаратов среди широкого спектра химических соединений различного класса.

Выделяют три основные группы препаратов, подавля­ющих начальные (адсорбция, проникновение и депротеинизация), средние (синтез компонентов) и заключительные (сборка и выход) стадии взаимодействия вирусов с клетками.

Индукторами выработки ин­терферона в организме являются многие вещества: вакцины, иммуномодуляторы, лекарственные препараты. Силь­ной интерфероногенной активностью обладают бактерии, препараты нуклеиновых полимеров, низкомолекулярные полифенолы и низкомолекулярные ароматические уг­леводороды.

При применении химиотерапии для лечения вирусных болезней необходимо помнить о возможности появления резистентных штаммов.