pdf.php@id=6179

3)5%-ный раствор тиамина;

4)0,025%-ный раствор рибофлавина;

5)никотинамид или никотиновая кислота;

6)1%-ный раствор пиридоксина;

7)1%-ный раствор аскорбиновой кислоты;

8)черный или зеленый чай.

Реактивы:

1)концентрированная серная кислота;

2)хлороформ;

3)раствор брома в хлороформе (1:60);

4)концентрированная азотная кислота;

5)0,025%-ный раствор цистеина;

6)10%-ный раствор NaOH;

7)1%-ный раствор сульфаниловой кислоты;

8)5%-ный свежеприготовленный раствор нитрита натрия;

9)10%-ный раствор карбоната натрия;

10)концентрированная соляная кислота;

11)10%-ный раствор HCl;

12)10%-ный раствор CuSO4;

13)5%-ный раствор NH4CNS;

14)5%-ный раствор K3Fe(CN)6;

15)1%-ный раствор FeCl3;

16)FeCl3 кристаллический;

17)цинк металлический.

Оборудование:

1)штатив с пробирками;

2)пипетки;

3)спиртовка.

Ход работы

1. Проба Друммонда на ретинол (витамин А)

Метод основан на способности концентрированной серной кислоты отнимать воду от ретинола с образованием окрашенных продуктов.

21

Впробирку вносят 2 капли рыбьего жира, 5 капель хлороформа и 1–2 капли концентрированной серной кислоты. Появляется голубое окрашивание, переходящее в буро-красное.

2. Качественная реакция на кальциферол (витамин D)

Метод основан на взаимодействии кальциферола с бромом

собразованием окрашенных продуктов.

Всухую пробирку помещают 2 капли рыбьего жира и 5 капель раствора брома в хлороформе, перемешивают. Через некоторое время наблюдают зеленоватое окрашивание.

3. Качественная реакция на нафтохинон (витамин K)

Метод основан на способности нафтохинона в присутствии цистеинаокрашиватьсявлимонно-желтыйцветвщелочнойсреде.

К5 каплям раствора викасола (синтетического витамина K) добавляют 5 капель раствора цистеина и 1 каплю 10%-ного раствора NaOH. Развивается лимонно-желтое окрашивание.

4. Качественная реакция на тиамин (витамин В1)

Метод основан на способности тиамина образовывать с диазофенилсульфоновой кислотой комплекс оранжево-красного цвета в щелочной среде.

Впробирку вносят 5 капель раствора сульфаниловой кислоты и прибавляют 5 капель раствора нитрита натрия. К полученному диазореактиву добавляют 2 капли 5%-ного раствора

тиамина и 5 капель раствора Na2CO3. Встряхивают. Появляется оранжево-красное окрашивание.

5. Качественная реакция на рибофлавин (витамин В2)

Метод основан на восстановлении рибофлавина водородом, образующимся при взаимодействии металлического цинка с концентрированной соляной кислотой.

Впробирку наливают 10 капель 0,025%-ного раствора рибофлавина и добавляют 5 капель концентрированной соляной кислоты и небольшое зернышко металлического цинка или порошка цинка. Начинается бурное выделение пузырьков водорода, жидкость изменяет окраску с желтого до розового и далее становится бесцветной.

22

6. Качественная реакция на никотинамид (витамин РР)

Метод основан на образовании цветного тройного комплексного соединения тиоцианата-никотината меди.

Растворяют 0,02 г никотинамида или кислоты никотиновой в 1 мл воды, прибавляют 2–3 капли 10%-ного раствора сульфата меди, перемешивают и наблюдают сине-голубой осадок никотината меди. Затем прибавляют 2–3 капли 5%-ного раствора роданида аммония (тиоцианата аммония), при этом образуется тройное комплексное соединение ярко-зеленого цвета.

7. Качественная реакция на пиридоксин (витамин В6)

Метод основан на образовании комплексной соли типа фенолята железа красного цвета при взаимодействии фенольного гидроксила пиридоксина с хлоридом железа (III).

К5 каплям 1%-ного раствора пиридоксина прибавляют

5 капель 1%-ного раствора FeCl3, перемешивают, развивается красное окрашивание.

8. Качественная реакция на аскорбиновую кислоту (витамин С)

Метод основан на способности аскорбиновой кислоты легко окисляться и восстанавливать железосинеродистый калий.

К5 каплям 1%-ного раствора витамина С приливают 1 каплю 10%-ного раствора гидроксида натрия и 1 каплю 5%-ного раствора гексацианоферрата (III) калия, перемешивают, после чего добавляют 3 капли 10%-ного раствора соляной кислоты и 1 каплю 1%-ного раствора хлорида железа (III). Выпадает синий осадок берлинской лазури.

9. Качественная реакция на рутин (витамин Р)

Метод основан на взаимодействии рутина с хлоридом железа

(III)собразованиемкомплексного соединениязеленого цвета.

В пробирку бросают несколько чаинок, заливают 5 мл дистиллированной воды и кипятят в течение 3 мин. Дают остыть, сливают жидкость в другую пробирку и добавляют несколько кристалликов FeCl3. Перемешивают и наблюдают за развивающимся буро-зеленым окрашиванием.

23

Указания к составлению отчета Занести в тетрадь все результаты проведенных реакций.

Где возможно, написать уравнения химических реакций, которые лежат в основе приведенных методов качественного определения витаминов.

Лабораторная работа № 4 Количественное определение аскорбиновой кислоты

Цель работы – освоить метод количественного определения аскорбиновой кислоты в продуктах питания.

Теоретические сведения Определение содержания аскорбиновой кислоты в пище-

вых продуктах и лекарственных растениях необходимо для составления правильного рациона, удовлетворяющего потребность организма в этом витамине. Наиболее богаты витамином С плоды шиповника, черной смородины, цитрусовых.

Биологические функции аскорбиновой кислоты в организме разнообразны. Она принимает участие в окислительновосстановительных процессах и связана с системой глютатиона. Аскорбиновая кислота участвует в синтезе стероидных гормонов в коре надпочечников и необходима для процесса гидроксилирования как фактор для проявления действия ферментов гидроксилаз. Она участвует в образовании тетрагидрофолиевой кислоты из фолиевой кислоты, в гидроксилировании лизина и пролина с получением оксилизина и оксипролина, необходимых для образования коллагеновых волокон; ускоряет всасывание железа, активирует фермент желудочного сока пепсиноген, что особенно важно при недостатке соляной кислоты в желудочном соке.

Метод определения основан на способности аскорбиновой кислоты восстанавливать 2,6-дихлорфенолиндофенол. 2,6-Дихлор-

24

фенолиндофенол в щелочной среде имеет синюю окраску, в кислой– красную, апривосстановленииобесцвечивается:

исследуемый подкисленный соляной кислотой раствор щелочным раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола. Пока в титруемом растворе содержится витамин С, приливаемый щелочной раствор 2,6-дихлорфенолиндофенола будет обесцвечиваться за счет образования восстановленной формы:

25

Как только все количество витамина С, имеющееся в исследуемом растворе, окислится, титруемый раствор приобретает розовую окраску за счет образования недиссоциированных молекул 2,6-дихлорфенолиндофенола в кислой среде.

Исследуемый материал: картофель, капуста, лимон, хвоя. Реактивы:

1)0,001 М раствор натриевой соли 2,6-дихлорфенолин- дофенола;

2)2%-ный раствор соляной кислоты.

Оборудование:

1)весы с разновесом;

2)ступка с пестиком;

3)воронка;

4)вата;

5)мерная колба на 100 мл;

6)коническая колбочка на 25 мл;

7)пипетки на 5 и 10 мл;

8)микробюретка на 1–2 мл.

Ход работы На весах берут навеску картофеля 2 г, или капусты 2 г,

или хвои 0,5 г. Исследуемый материал помещают в ступку и растирают, постепенно добавляя 5 мл раствора соляной кислоты. Вытяжку фильтруют через тонкий слой ваты в мерную колбу на 100 мл. Извлечение витамина С из той же навески повторяют еще два раза, каждый раз добавляя по 5 мл раствора соляной кислоты и фильтруя полученную вытяжку в ту же мерную колбу. Далее содержимое колбы доводят до метки дистиллированной водой.

Для определения отбирают 10 мл вытяжки в коническую колбочку и титруют содержимое раствором 2,6-дихлорфенолин- дофенола, налитого в микробюретку, до появления розового окрашивания, не исчезающего в течение 30 с.

26

Указания к составлению отчета Расчет выполнить по формуле

Х = (0,088 · V · 100 · 1000)/(10 · а),

где Х – содержание аскорбиновой кислоты, мг/кг; 0,088 – титр аскорбиновой кислоты по 0,001 М раствору 2,6-дихлорфенолин- дофенола, мг/мл; 100 – разведение (объем мерной колбы), мл; 1000 – коэффициент пересчета на 1 кг сырья, г; 10 – объем жидкости, взятый для титрования, мл; V – объем 2,6-дихлор- фенолиндофенола, пошедший на титрование, мл; а – навеска исследуемого материала, г.

Полученное содержание аскорбиновой кислоты в пищевых продуктах сравнить с известными данными из литературных источников.

Лабораторная работа № 5 Количественное определение рутина в чае

Цель работы – сформировать навыки количественного определения рутина (витамина Р) в чае.

Теоретические сведения В основе витамина Р лежит ядро флавона. Известно не-

сколько соединений, обладающих Р-витаминным действием. Рутин (рутозид) – это гликозид флавона кверцитина и дисахарида рутинозы (глюкоза и рамноза):

27

Рутин – кристаллическое вещество желто-оранжевой окраски. Содержится в тех же продуктах, что и витамин С. В 100 г черного чая обычно содержится 30–50 мг рутина, в зеленом чае несколько больше.

Метод основан на способности рутина окисляться перманганатом калия. В качестве индикатора используется индигокармин, который вступает в реакцию с перманганатом калия после того, как окислится весь рутин.

Исследуемый материал: черный или зеленый чай. Реактивы:

1)0,05 н. раствор перманганата калия;

2)индикатор индигокармин (0,25%-ный раствор на 50%- ном этиловом спирте).

Оборудование:

1)весы с разновесом;

2)конические колбочки на 50 мл;

3)водяная баня;

4)воронка с фильтром;

5)пипетка на 10 мл;

6)мерная колба на 50 мл;

7)микробюретка для титрования.

Ход работы В коническую колбу к 0,1 г чая приливают 40 мл горячей

дистиллированной воды и проводят экстракцию при нагревании на водяной бане в течение 5 мин. Далее раствор фильтруют в мерную колбу на 50 мл и доводят до метки дистиллированной водой.

Для титрования пипеткой отмеряют в колбу для титрования 10 мл экстракта, добавляют 10 мл дистиллированной воды и 5 капель индигокармина, при этом появляется синее окрашивание. Титруют из микробюретки раствором перманганата калия до появления устойчивой желтой окраски.

28

Указания к составлению отчета Расчет выполнить по формуле

Х = (0,0032 · V · 50 · 1000)/(10 · а),

где Х – содержание рутина, мг/кг; 0,0032 – титр рутина по 0,05 н. раствору KMnO4, мг/мл; 50 – разведение (объем мерной колбы), мл; 1000 – коэффициент пересчета на 1 кг сырья, г; 10 – объем жидкости, взятый для титрования, мл; V – объем KMnO4, пошедшийнатитрование, мл; а– навескаисследуемогоматериала, г.

Полученное содержание рутина в чае сопоставить с известными данными из литературных источников.

Вопросы для самостоятельной работы

кразделу «Витамины»

1.Какие вещества называют витаминами?

2.Установите связь ферментов и витаминов.

3.Приведите основные типы классификаций витаминов.

4.Заполните табл. 1.

Таблица 1

5.Дайте полную характеристику витамина С. Опишите химическую структуру, приведите структурную формулу, укажите биологическую роль витамина в организме. В каких продуктах он содержится?

6.Каковы принципы количественного определения витамина С?

7.Производители пищевых продуктов, богатых витаминами, утверждают, в частности, что витамины, получаемые из природных источников, полезнее для здоровья, чем витамины,

29

синтезированные искусственным путем. Считается, что чистая L-аскорбиновая кислота из плодов шиповника полезнее L-аскор- биновой кислоты, синтезированной на химическом заводе. Различаются ли витамины из этих двух источников? Может ли организм различать витамины из разных источников?

8.Дайте полную характеристику витаминов А, Е, Р: опишите химические структуры, приведите структурные формулы, укажите биологическую роль витаминов в организме. В каких продуктах содержатся эти витамины?

9.На чем основан метод количественного определения витамина Р?

10.Какие витамины могут вырабатываться в организме человека, а какие должны поступать извне?

11.Какие витамины обладают способностью накапливаться

ворганизме, а какие требуют постоянного приема?

12.Какова роль микроорганизмов в производстве витаминов? Приведите примеры.

13.Какие вещества относят к провитаминам? Приведите примеры превращения провитаминов в витамины.

14.Какие вещества относят к антивитаминам? Приведите примеры использования антивитаминов в качестве лекарственных средств.

15.От чего зависит потребность организма в витаминах?

30