- •Тканевая селекция земляники на устойчивость к комплексу грибных патогенов
- •Введение
- •1. Требования к организации работ, состав питательных сред
- •2. Сомаклональная изменчивость каллусных клеток и методы повышения ее частоты
- •3.Выбор исходного экспланта, индукция и культивирование каллусов
- •4. Тканевая селекция земляники на устойчивость к фитопатогенным грибам
- •4.1. Приготовление селективных сред
- •4.2. Отбор каллусов на резистентность к культуральным фильтратам фитопатогенных грибов
- •5. Индукция морфогенеза из изолированных тканей земляники
- •6. Клональное микроразмножение и укоренение побегов земляники. Адаптация растений-регенерантов к выращиванию в почве
- •7. Тестирование растений-регенерантов земляники на устойчивость к фитопатогенам и их морфо-биологическое описание
- •Заключение
- •Литература
- •394087, Воронеж, ул. Мичурина, 1
Заключение
В рекомендациях впервые изложены основные методические разработки по тканевой селекции земляники на устойчивость к грибным патогенам.
Для каждого этапа работ (индукция каллусных культур, культивирование и отбор каллусов в селективных условиях, регенерация, размножение и укоренение адвентивных побегов, адаптация пробирочных растений-регенерантов к условиям произрастания в почве) приводятся основные методические приемы, способствующие успешному прохождению этих этапов. Достаточно подробно приведены составы питательных сред, данные о температурных и световых режимах.
Более кратко изложены вопросы адаптации и морфобиологического описания растений, т.к. они широко отражены в соответствующей литературе.
Особое внимание было уделено сомаклональной изменчивости, поскольку именно этот феномен является основой для многочисленных и разнообразных работ по тканевой селекции. Однако механизмы сомаклональной изменчивости и пути управления ею, несмотря на многочисленные гипотезы и большое количество работ, остаются неясными.
Значительная часть работы посвящена методическим приемам обеспечения устойчивого морфогенеза, т.к. именно трудности морфогенеза зачастую являются узким местом в работах по тканевой селекции и по генетической трансформации. Следует, однако, иметь в виду, что для эффективной индукции морфогенеза изложенные выше методики необходимо модифицировать с учетом сортовых особенностей растений.
Литература
1. Бутенко Р.Г. Технология in vitro в сельском хозяйстве// Сельскохозяйственная биология. - 1983. - №5. - С.3-7.
2. Шамина З.Б. Мутагенез и селекция на уровне соматических клеток растений// Биотехнология. - М.: Наука, 1984.- С.260-266.
3. Глеба Ю.Ю., Сытник К.М. Клеточная инженерия растений. - Киев. : Наукова думка, 1984. - 159 с.
4. Behnke М. Selection of potato callus for resistance to culture filtrates of Phytophthora infestans and regeneration of resistant plants// Theoretical applied Genetics. - 1979. - 55. -P.69-71.
5. Захарчук НА., Зайченко Л.М., Олейник Т.Н., Кучко А.А. Использование фитотоксических метаболитов Phytophthora infestans для клеточной селекции картофеля// Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда: Тез. докл. VII Междунар. конф. (25-28 ноября 1997, Москва) -М., 1997.-С.319.
6. Олейник Г.Н. Клеточная селекция в культуре картофеля// Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда: Тез. докл. VII Междунар. конф. (25-28 ноября 1997, Москва) - М., 1997. - С.325.
7. Кирьян Н.Г., Мазин В.В. Клеточная селекция клевера лугового на устойчивость к фузариозу// Новые методы биотехнологии растений. I Всесоюз. Симп. (Пущино, 20-22 ноября 1991) :Тез. докл. -Пущино, 1991. - С.66-67.
8. Frame В, Kung-fu Yu, R.R. Christie and K.P. Pauls. In vitro selection for resistance to verticullium wilt in alfalfa (Medicago Sativa L.) using a fungal culture filtrate// Physiological and Molecular Plant Pathol. - 1991. - 38. - №5. -P.325-340.
9. Джос Л., Калашникова Е.А. Клеточная селекция пшеницы на устойчивость к септориозу// Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда: Тез. докл. VII Междунар. конф. (25-28 ноября 1997, Москва) -М., 1997.-С.317.
10.Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений.- М.: Наука, 1964. - 272с.
11.Калинин Ф.Л., Сарнацкая В.В, Полищук В.Е. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений.- Киев: Наукова думка, 1980. -399с.
12.Биотехнология растений: культура клеток (Пер. с английского В.И. Негрука; с предисл. Р.Г. Бутенко) - М.: Агропромиздат, 1989. - 200 с.
13.Жуков О.С., Олейникова О.Я., Савельев Н.И. Методические рекомендации по получению растений-регенерантов плодовых пород в культуре пыльников. - Мичуринск, 1994. -35 с.
14.Индукция морфогенеза и тканевая селекция плодовых и ягодных культур: Методические рекомендации/ Под ред. В.М.Тюленева - Мичуринск, 1996. -74с.
15.Фирсов А.П., Долгов С.В. Регенерация земляники из листовых дисков// Бюлл. науч. информ. Центр. генет. лабор. им. И.В. Мичурина, 1992. - Вып. 51. -С.29-33.
16.Расторгуев С.Л. Регенерация растений из изолированных соматических тканей земялники и малины// Индукция морфогенеза и тканевая селекция плодовых и ягодных культур: Методические рекомендации. - Мичуринск, 1996. -С.40-61.
17.Бутенко Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнология на их основе: Уч. пособие.- М.: ФБК-ПРЕСС, 1999. - 160 с.
18. Долгих Ю.И., Шамина З.Б. Современные представления о причинах и механизмах сомаклональной изменчивости// Молекулярные механизмы генетических процессов: Сб. докл. 7-го Всесоюз. симп., 27-30 марта 1990г.- М., 1991. -С.123-127.
19.Evans D.A. Somaclonal variation — genetic basis and breeding applications// Trend in Genet. - 1989. – 52 - P.45-50.
20.Константинов Ю.М., Ривкин М.И. Возможный свободнорадикальный механизм возникновения сомаклональной изменчивости у растений// Молекулярные механизмы генетических процессов: Сб. докл. 7-го Всесоюз. симп., 27-30 марта 1990г.-М., 1991. - С.127-130.
21.Hoclgson J. Making the Transition to Applied Technology// Biotechnol. -1990. -V.8. -P.714.
22.Peschke V.M., Phillips R.L. Activation of the Maize Transposable Element Suppressor - Mutator (Spm) in Tissue Culture// Theor. Appl. Genet. -1991. -V.81. -P.90-97.
23.Сидоров В.А. Биотехнология растений. Клеточная селекция. -Киев: Наукова думка., 1990.-280 с.
24.0rton T.J. Somaclonal Variation: Theoretical and Practical Consiiderations// 16th Stadler Genet. Symp. Manipul. Plant. Impruv., 1984y.- N.Y.;L., 1984. -P.427-468.
25.Morrison R.A., Whitaker R.J., Evans D.A. Somaclonal Variation: its Genetic Basis and Prospects for Crop, Improvement// Proc. 27th Annu. Meet. Phytochem. Soc.N. Amer., Opportunities Phytochem. Plant Biotechnol. Tampa, Fla, ( June 21-26, 1987).-N.Y.; L., 1998.-P.1-18.
26.0ono К. Rice Tissue Culture// Annu. Rept. Nat. Jnst. Agrobiol. Resour. - 1985. -№1. -Р.27-28.
27.Cullis C.A., Cleary W. DNA Variation in Flax Tissue Culture// Can.J. Genet. Cytol. -1986. -V.28. -P.247-251.
28.Шамина З.Б. Генетическая изменчивость в популяциях соматических клеток растений в культуре: Дисс. ... докт. биол. наук.- Л., 1988.- 34 с.
29.Kaneko К. Karyological studies on Callud cells of Haplopappus gracilis// Kromosoma. -1974. - № 95. - P .2943-2949.
30. Ghosh P.К., Chaterjee A. In vitro Induction and Maintenance of Epicotyl Dirived Callus Culture of Jute// Indian Biol.- 1990. - V.22. - P.38-39.
31.Кунах В.А. Изменчивость растительного генома в процессе дедифференцировки и каллусообразования// Физиология растений. - 1999. -Т.46, №6. - С. 919-929.
32.Nehra N.S., Kartha K.K., Stushnoff C. Nuclear DNA Content and Isozyme Variation in Relation to Morhogenetic of Strawberry (Fragaria ananassa) Callus Cultures// Can. J. Bot- 1991.-V.69.- P.239-244.
ЗЗ.Чережанова Л.В., Мелик-Саркисов О.С., Овчинникова В.Н. Цитогенетический эффект сахаров// Генетика. -1991. -Т.27 -С.1372-1378.
34.Pijnacher L.P., Ferverda M.A. Effect of Sucrose on Polyploidization in Early Callus Cultures of Solarium tuberosum// P\Sint. Cell. Tissue. Organ Cult. -1990. -V.21. -P.153-157.
35.Hellman H., Schmidt R., Willmitzer L, Frommer W.B. Identification of Mutants in Metobolically Regulated Gene Expression// Plant. J. -1997. - V.I 1.- P.53-62.
36.Reiner J. Neue Ergebnisse und Probleme nut Gewebekulturen aus hoheren Pflan-zen// Ber. Dtsch. bot. Ges. - 1965. -B.78. -S.l-10.
37.D'Amato F. Spontaneous Mutatations and Somaclonal Variation// Proc. Int. Symp. Nucl. Tech. and in vitro Cult. Plant Improv. (Viena, 19-23 Aug., 1985). -Viena, 1986. -P.3-10.
38.Шамина З.Б., Чернышева В.Г., Хавкин Э.Е., Орлова М.И. Изоферментный анализ сомаклональных вариантов кукурузы// Докл. ВАСХНИЛ.- 1990.-N7.-С. 14-17.
39.Атаева Д.М., Долгих Ю.И., Дубровина Т.Б., Забродина М.В., Хавкин Э. Е., Шамина З.Б. Хромосомный и изоферментный анализ сомаклональных вариантов инбредной линии кукурузы А 188//Докл. ВАСХНИЛ.-1991.-N5.-С.2-5.
40.Атаева Д.М., Дубровина Т.Б., Долгих Ю.И., Забродина М.В., Шамина З.Б. Изменчивость гетерохроматических районов хромосом первого семенного поколения растений-регенерантов кукурузы// Цитология и генетика.- 1994. -Т. 28 .-С .15-20.
41. Долгих Ю.И., Ларина С.Н., Шамина З.Б. Селекция на осмоустойчивость кукурузы in vitro и характеристика растений-регенерантов// Физиология растений. -1994.-Т . 41.- С .918-922.
42.Носов A.M. Культура клеток высших растений - уникальная система, модель, инструмент. Обзор// Физиология растений.-1999. -Т .46, №6. -С.837-844.
43.Dolgykh Yu. I. Establishment of Callus Cultures and Regeneration of Maize Plants// Biotechnology in Agriculture and Forestry/ Ed. Bajaj Y.P.S. Berlin:
Springer, 1994. - V 25. -P 24-36.
44.Popov A.S., Volkova E.A., Butenko R.G. Cryoreservation of Germplasm of Dioscorea deltoidea (Medicinal Jam)// Biotechnology in Agroculture and Forestry/ Ed. Bajaj Y.P.S.- Berlin: Springer, 1995. -V 32. - P. 487-498.
45.Чайлахян М.Х., Бутенко Р.Г., Кулаева О.Н., Кефели В.И., Аксенова Н.П. Терминология роста и развития высших растений.- М.: Наука, 1982.-94 с.
46.Дроздовский Э.М., Барбатунова Г.А. Фитофтороз земляники// Плодоовощное хозяйство.-1985.-№12.- С 24-28.
47.Новотельнова Н.С. Фитофторовые грибы.-Л.: Наука, 1974. -156 с.
48.Зубов А.А. Генетические основы селекции земляники// Методические рекомендации.- Мичуринск,1990.- 87 с.
49.Шашкин И.Н. Земляника в колхозном саду. - М, 1956.-87 с.
50.Натальина О.Б. Болезни ягодников. - М., 1963.- 245 с.
51.Scott D.H., Lawrense F.J. Strawberries. Advances in Fruit Breeding/ Eds Junick J., Moore J.N.-N.Y.: Univ. press. 1975.- 71 p.
52.Веселова Т.В., Веселовский В.А., Власенко В.В., Мацкивский В.И., Пеньков Ф.М., Чернавский Д.С. Вариабельность как тест перехода клетки в состояние стресса в условиях интоксикации// Физиология растений. -Т. 37.-Вып.4.-1990.-С 733-738.
53.Веселовский В.А., Веселова Т.В., Чернавский Д.С. Стресс растения. Биофизический подход// Физиология растений.- 1993.- Т .40, №4.-С.553-557.
54.Веселова Т.В., Веселовский В.А., Чернавский Д.С. Стресс у растений. -М.: Изд. МГУ, 1993.-134с.
55.Тюленев В.М., Соловых Н.В. Сомаклональная изменчивость земляники// Биотехнология.- 1999.- №1.-с.34--40.
56.Сайб Л.Р., Карабаев М.К., Упадхиай Нитьянуа, Маковейчук А.Ю., Юнусов Н.Л. Влияние фактора "S" из морфогенного фактора кукурузы на регенерацию растений в культуре тканей// Новые методы биотехнологии растений.: 1-ый Всесоюз. симп. -Пущино, 1991.-С.76-77.
57.Моисеева Н.А. Молекулярные и клеточные механизмы морфогенеза в культуре клеток растений// Биология культивируемых клеток и биотехнология растений.- М.: Наука, 1991.- С. 166-185.
58. Toponi M.N., Michele M.N. DNA modification affecting the plant regenerations in vitro// Basis and Appl. Histochem. -1989.-33. Suppl. -P.101.
59.Муромцев Г.С., Бутенко Р.Г., Тихоненко Т.И., Прокофьев М.И. Основы сельскохозяйственной биотехнологии.- М.: Агропромиздат, 1990.- 384 с.
60.Кучеренко Л.А. Подходы к разработке технологии массовой регенерации растений in vitro// Биология культивируемых клеток и биотехнология растений. -М: Наука, 1991.-С.232-242.
61.Тюленев В.М., Расторгуев С.Л., Туровский И.И. Получение растений-регенерантов из изолированных тканей земляники// Бюл. Центр, генет. лаб. им. И.В.Мичурина.- Мичуринск, 1991.- Вып.50.- С .21-27.
62.Тюленев В.М., Осипова Л.В., Расторгуев С.Л. Регенерация растений из изолированных соматических тканей плодовых культур// Новые методы биотехнологии растений. - Пущино, 1993.- С. 173.
63.Jones О.Р., Walter B.J. Beech M.G. The production of strawberry plants from callus cultures// Plant Cell Tissue Organ Cult. -1988. -12. -№3. -Р. 235-241.
64.Nehra N.S., StushnoffC., Kartha K.K. Regeneration of plant from immature leaf-derived callus of strawberry (Fragaria ananass a)// Plant Sci.- 1990.- 66.- №1.-P.119-126.
65.Катаева Н.В., Бутенко Р.Г. Клональное микроразмножение растений.- М., 1983.-96с.
66.Высоцкий В.А., Бартенева Л.В. Способ пересадки растений-регенерантов в почвенный субстрат// А.с. 1591887, заявл.88.06.17, 4442378/ 30-13(22), опубл. 581.148.6. № 34, 5А 01. Н 3/80.
67.Рубин Б.А., Арциховская Е.В. Биохимия и физиология растений. -М.: Высшая школа, 1968.- 415 с.
68. Штин Л.Т. Пробирочный метод заражения растений грибными болезнями. К выведению устойчивых к болезням сортов винограда// Защита растений. -1971. -№12. -С.21-22.
69.Соловых Н.В. Селекция земляники на устойчивость к патогенам с использованием биотехнологических методов// II съезд ВОГиС : Тез. докл.-Л.,2000.-Т.1.-С. 330-331.
70.Дроздовский Э.М., Барбатунова Г.Л. Способ отбора форм земляники, устойчивых к Phytophthora cactorum.: A.c. 4620482/30-13/22, опубл. 881216. 63152.-№41 ,5А 01Н.
71. Прохоров И.А., Потапов С.П. Практикум по селекции и семеноводству овощных и плодовых культур. - М.: Колос, 1975."303 с.
72. Клональное микроразмножение плодовых и ягодных культур/ Уч. пособие/ Под ред. Н.М. Круглова. – Воронеж, 1998. – 72с.
Подписано в печать 2.12.2004 г. Формат 60х801/16
Бумага кн.-журн. П.л. 1,9. Гарнитура Таймс.
Тираж 200 экз. Заказ № 2553
Воронежский государственный аграрный
университет им. К.Д. Глинки
Типография ВГАУ