10. Механизм действия антибиотиков: мишени (точки приложения антибиотиков различных групп).

По механизму действия антибиотики делят на 4 группы:

1) угнетают синтез белков клеточной стенки (-лактамы – пенициллины, цефалоспорины);

2) нарушают синтез клеточной мембраны (полиены – нистатин; полимиксины)

3) ингибируют синтез белков (тетрациклины, левомицетин, аминогликозиды - – стрептомицин, мономицин, неомицин, канамицин, гентамицин);

4) ингибируют синтез нуклеиновых кислот ( протитвоопухолевые антибиотики: актиномицин подавляет синтез РНК, рубомицин – синтез ДНК).

12. Типы действия - бактерицидное и бактериостатическое; как в опыте in vitro определить их?

Бактерицидным действием обладают стрептомицин, пенициллины, неомицин, канамицин, полимиксин, цефалоспорины.

Бактериостатическим действием обладают тетрациклины, макролиды, левомицетин. Бактериостатические препараты необходимо использовать длительно. Их можно применять после бактерицидных препаратов для долечивания.

13. Противовирусные антибиотики, механизмы их действия.

Защита клеточных мембран от связывания с ними вирусных частиц :

• Препараты иммуноглобулинов: гамма-глобулин, сандоглобулин;

• Производные адамантана: амантадин, ремантадин;

• Ингибирование синтеза вирусных нуклеиновых кислот :

• Аналоги нуклеозидов : ацикловир, ганцикловир, фамцикловир, валацикловир; • рибавирин, идоксуридин, видарабин;

• зидовудин, ламивудин, диданозин, зальцитабин;

• Производное фосфорно-муравьиной кислоты -фоскарнет натрия

14. Контроль антибиотиков на стерильность, безвредность, активность. Методы определения активности антибиотиков.

На стерильность: Испытание предназначено для обнаружения загрязнения антибиотиков, предназначенных для парентерального введения или для других стерильных форм применения, живыми микроорганизмами. Испытание должно проводиться в асептических условиях в помещении, свободном от загрязнения в той мере, 'в какой этого возможно достичь с помощью дезинфицирующих агентов, бактерицидных ламп и воздушных фильтров. В процессе самого 'испытания бактерицидные лампы и дезинфицирующие аэрозоли применять не следует. Все манипуляции, предусмотренные испытанием, следует проводить в профильтрованном воздухе или под вытяжкой с ламинарным потоком; операторы должны быть одеты в стерильную антистатическую одежду, включающую колпак и бахилы. Давление воздуха в помещении, где проводится испытание, должно быть выше, чем во внешней среде. Работу вытяжки с ламинарным потоком следует контролировать при помощи счетчика частиц, фильтра или щелевого устройства для отбора проб воздуха; работу фильтров и бактерицидных ламп также следует постоянно проверять.

Безвредность:

Активность:

Метод серийных разведений. Данным методом определяют минимальную концентрацию антибиотика, ингибирующую рост исследуемой культуры бактерий (МПК, МИК). Для этого вначале готовят основной раствор, содержащий определённую концентрацию антибиотика (мкг/мл или ед/мл) в специальном растворителе или буферном растворе. Далее из основного раствора готовят все последующие разведения в бульоне (в объёме 1 мл), после чего к каждому разведению добавляют 0,1 мл исследуемой бактериальной суспензии, содержащей 106 -107 бактериальных клеток в 1 мл. В последнюю пробирку вносят 1 мл бульона (без антибиотика) и 0,1 мл суспензии бактерий (контроль культуры). Посевы инкубируют при 370С до следующего дня, после чего отмечают результаты опыта по помутнению питательной среды, сравнивая с контролем. Последняя пробирка с прозрачной питательной средой указывает на задержку роста исследуемой культуры бактерий, под влиянием содержащейся в ней минимальной подавляющей (ингибирующей) концентрации (МПК, МИК) антибиотика. Для оценки минимальной бактерицидной концентрации (МБК) производят высев на плотную питательную среду без антибиотика из пробирок с отсутствием роста. За МБК принимают минимальную концентрацию антибиотика, вызывающую гибель микроорганизма, что характеризуется отсутствием роста на чашках Петри с питательной средой.

Метод серийных разведений антибиотика в агаризованной среде. В этом случае можно в одном опыте проверить чувствительность к разным концентрациям данного антибиотика нескольких культур микроорганизмов. 52 Различные разведения антибиотика готовят в стерильной агаризованной среде. Для этого в неё добавляют требуемое количество исходного раствора антибиотика, тщательно перемешивают и заливают в стерильные чашки Петри. После застывания агара дно чашки с наружной стороны делят маркером на сектора. Каждую исследуемую культуру засевают штрихом с помощью бактериологической петли на определённый сектор в чашки с разными концентрациями антибиотика. Посев исследуемых культур на чашки с различными концентрациями антибиотика можно сделать с помощью аппликатора, позволяющего засевать одновременно 12-15 культур на одну чашку. Затем чашки помещают в термостат при температуре, оптимальной для роста и развития изучаемых бактерий. Результаты учитывают по наличию или отсутствию роста бактерий в сравнении с ростом на среде в контрольной чашке. Бактерии считаются чувствительными к антибиотику в такой его концентрации, при которой их рост полностью подавляется.

К умеренно устойчивым относятся штаммы, для подавления роста которых требуются концентрации, создающиеся в сыворотке крови при введении максимальных доз препарата.

Устойчивыми являются микроорганизмы, рост которых не подавляется препаратом в концентрациях, создаваемых в организме при использовании максимально допустимых доз.