Классы иммуноглобулинов, их свойства и строение.

Иммуноглобулины класса G (субклассы G1, 2, 3, 4) – основной класс антител, имеет молекулярную массу около 160000 дальтон. На его долю приходится 70-80% всех сывороточных иммуноглобулинов. Среднее содержание Ig G в сыворотке крови здорового взрослого человека составляет 12 г/л, этот уровень достигается к 7-10 летнему возрасту. Ig G – мономер, имеет 2 антигенсвязывающих центра. Период полураспада Ig G равен 21 дню. Ig G легко проходит через плацентарный барьер и обеспечивает пассивный гуморальный иммунитет новорожденного в первые 6-8 месяца после рождения, способен также выделяться в секрет слизистых оболочек путем диффузии, поэтому передается ребенку и с грудным молоком матери. Ig G участвует в активации комплемента по классическому пути. Основная функция – формирование постинфекционного иммунитета.

Иммуноглобулины класса М – это наиболее крупная молекула из всех иммуноглобулинов (950000 дальтон). На долю Ig М приходится 5-10% всех сывороточных иммуноглобулинов. Среднее содержание Ig М в сыворотке крови здорового взрослого человека около 1 г/л, этот уровень достигается уже к 2-4-летнему возрасту. Ig М – пентамер, его валентность равна 10, но половина антигенсвязывающих центров не работает из-за пространственной близости. Период полураспада Ig М составляет 5 дней. Ig М не проходит через плаценту, но определяется в грудном молоке, участвует в активации комплемента по классическому пути. Ig М первыми начинают синтезироваться в организме новорожденного и первыми вырабатываются в ответ на внедрение антигена.

Иммуноглобулины класса А – существуют в сывороточной и секреторной формах. Молекулярная масса сывороточного Ig А около 170000 дальтон, а секреторного 350000 дальтон и более. На долю сывороточного Ig А приходится около 10-15% всех сывороточных иммуноглобулинов. В сыворотке крови здорового взрослого человека содержится около 2,5 г/л Ig А, этот уровень достигается к 10-летнему возрасту. Сывороточный Ig А – мономер, имеет 2 антигенсвязывающих центра; секреторный Ig А чаще существует в форме ди- и триммера (4- или 6- валентный). Ig А обладает α-цепью. Период полураспада Ig А составляет 6 дней. Но около 60% всех Ig А содержится в секретах слизистых оболочек, присутствует в слюне, слезной жидкости, молоке, обеспечивая местный иммунитет.

Иммуноглобулины класса Е (реагины) – имеют молекулярную массу около 190000 дальтон. На его долю приходится 0,002% всех циркулирующих иммуноглобулинов, содержание Ig Е в сыворотке крови крайне невысоко – примерно 0,00025 г/л, этот уровень достигается к 10-15 годам. Обнаружить Ig Е можно специальными высокочувствительными методами. Ig Е – мономер, 2х- валентный, обладает ε-цепью. Период полураспада – 2 дня. Ig Е обладает выраженной тропностью к тучным клеткам и базофилам, участвует в развитии аллергической реакции I типа.

Иммуноглобулины класса D – сведений об Ig D не много, имеет молекулярную массу 160000, Ig D практически полностью содержится в сыворотке крови в концентрации около 0,03 г/л (0,2% общего количества циркулирующих иммуноглобулинов), 2-х валентный мономер с δ-цепью и периодом полураспада – 3 дня. На определенных стадиях дифференцировки выполняет роль рецептора В-лимфоцитов.

Виды антител:

1. Изоантитела – антитела к изоантигенам (например, антитела к АВ антигенам эритроцитов человека – α и β).

2. Нормальные (естественные) антитела – антитела, обнаруживаемые в сыворотке крови без предварительного воздействия антигена (титры их низкие, а вопрос об их происхождении до конца не решен).

3. Аутоантитела – антитела к антигенам собственных клеток и тканей организма.

4. Гетероантитела – антитела, образующиеся в ответ на введение гетероантигена.

5. Моноклональные антитела – антитела одной специфичности, синтезируемые искусственно полученным клоном плазмоцитов.

Метод получения моноклональных антител (разработан в 1975 г. Г. Келлером и К. Мильштейном) состоит в слиянии сенсибилизированных лимфоцитов с клетками миеломы для получения клеточных гибридов. Гибридомы обладают способностью синтезировать антитела и, в то же время, они представляют собой опухолевые клетки, способные к непрерывной пролиферации.

Этапы получения гибридом:

1) получение миеломной линии;

2) получение селезеночных клеток от иммунизированного организма (плазмоциты, синтезирующие Ig определенной специфичности);

3) создание условий для слияния клеток;

4) выделение слившихся клеток;

5) отбор интересующего клона, его накопление (in vitro или в организме животного) и использование.

Использование моноклональные антител:

• В научных целях для анализа структуры, генетики Ig, для изучения рецепторов лимфоцитов и их субпопуляций.

• В диагностике многих инфекционных и неинфекционных заболеваний.

• В лечении некоторых, в т. ч. онкогенных, заболеваний.

• В качестве носителей лекарственных веществ, доставляющих их в определенные органы и ткани (в стадии разработки).

Виды антител по действию на антиген:

• Антитоксические – нейтрализуют или флоккулируют микробные токсины.

• Агглютинирующие – склеивают антигены.

• Преципитирующие – образуют комплекс с антигенами только в растворах или гелях.

• Лизирующие – вызывают разрушение клеток-мишеней.

• Опсонизирующие – взаимодействуя с антигенами, способствуют их поглощению фагоцитами.

• Нейтрализующие – инактивируют антигены, лишая их возможности проявлять патогенное действие.

68. Возбудители холеры: название по-латыни, морфология, отношение к окраске по Граму, питательные среды для культивирования, антигенная структура, факторы вирулентности, источники инфекции, механизм и пути заражения, клинические проявления заболевания, материалы для исследования и методы лабораторной диагностики, правила взятия и транспортировки материала, режим работы лаборатории, лечебные и профилактические препараты.

Таксономия:

Семейство: Vibrionaceae

Род: Vibrio

Вид: V. cholerae

Биовары: V. cholerae cholerae (asiaticae, classicae)

V. cholerae eltor

V. cholerae bengalii (О139)

Всего род Vibrio включает 36 видов (V. parahaemolyticus, V. vulnificus, V. metschnigovii, V. proteus, V. albensis, V. alginoluticus, V. mimicus, V. damsela… – возбудители холероподобных заболеваний)

Морфология и тинкториальные свойства.

Слегка изогнутые грамотрицательные палочки (хорошо окрашиваются анилиновыми красителями) средних размеров (0,2-0,4×1,5-4 мкм), монотрих (жгутик в 2-3 раза длиннее тела, повышенная подвижность, снаружи покрыт оболочкой, образованной выростом наружного слоя клеточной стенки и напоминающей ундулирующую мембрану), спор и капсул не образует. В старых культурах – полиморфны (кокковидные и нитевидные формы). В мазках из нативного материала располагаются в виде «стайки рыб». При лечении антибиотиками подвижность уменьшается и может превращаться в L-формы

Культуральные свойства.

Строгий аэроб (факультативный анаэроб, но лучше растет в аэробных условиях), хемоорганогетеротрофы, оптимальная температура роста 37⁰С, время культивирования – 6-24 часа, хорошо растет на обычных питательных средах, но требователен к pH (галофил), оптимальная pH 8,0-9,0. В 1% щелочной пептонной воде через 6-8 часов отмечается рост в виде нежной, тонкой, голубоватой пленки (при встряхивании разрушается). На плотной среде (щелочной агар) через 10-12 часов вырастают мелкие (1,5-2 мм), маслянистые, гладкие, прозрачные, голубоватые колонии с ровным краем (S-формы). При длительном культивировании колонии увеличиваются в размерах, становятся мутными, с плотным центром, пигментированные (коричневого или желтого цвета), шероховатые (R-формы), бактерии из них не чувствительны к бактериофагам, антибиотикам и не агглютинируются О-сывороткой. На щелочно-кровяном агаре V. eltor дает зону гемолиза. На ТСBS- агаре (с тиосульфатом, цитратом, солями желчных кислот и сахарозой) образуют желтые колонии.