- •В чем сущность хроматографического процесса?
- •Как классифицируют методы хроматографии по агрегатному состоянию фаз и по методике проведения эксперимента?
- •Что такое: а) высота хроматографического пика; б) ширина хроматографического пика; в) общий удерживаемый объем; г) приведенный удерживаемый объем?
- •Какие достоинства и недостатки газовой адсорбционной и газожидкостной хроматографии?
- •5. В чем состоит метод теоретических тарелок в хроматографии?
- •На чем основан качественный хроматографический анализ?
- •7. Какое практическое значение имеет газовая хроматография?
- •9. Каковы области применения, достоинства и недостатки методов адсорбционной хроматографии?
- •10. Какие требования предъявляются к адсорбентам и растворителям? Наиболее распространенные растворители и адсорбенты в жидкостной хроматографии.
- •11. Какие способы применяют для определения эффективности хроматографических разделений?
- •12. Какие требования предъявляются к жидкой фазе в газожидкостной хроматографии? Какие вещества используют в качестве жидкой фазы, в качестве твердого носителя?
- •Твердые носители.
- •13. В чем сущность методов количественного анализа: а) внешнего стандарта; б) метода нормировки; в) внутреннего стандарта?
- •14. На чем основан качественный анализ методом распределительной хроматографии на бумаге? Дайте определение Rf.
- •15. Каковы области применения, достоинства и недостатки а) газовой хроматографии; б) жидкостной хроматорграфии?
- •4. Детектор предназначен:
- •5. Как измеряется время удерживания по хроматограмме?
- •6. Площадь хроматографического пика характеризует …
- •8. Что такое тонкослойная хроматография?
- •9. Что такое Rf?
- •10. От чего больше зависит величина Rf?
- •12. В хроматографии на пластинках слой сорбента:
- •13. Признак ионообменной хроматографии:
13. Признак ионообменной хроматографии:
a) носитель имеет гидрофобные цепи; b) носитель имеет поры определенного диаметра; c) гранулы адсорбента заряжены; d) способность связываться со строго определенными химическими группами.
Ионообменная хроматография.
Ионообменная хроматография - это задержание молекул веществ в неподвижной фазе обусловленное их связыванием с поверхностью твердого гидрофильного материала сплошных или пористых гранул, находящихся в контакте с жидким элюентом. В этом варианте хроматографии задержание происходит в результате электростатического взаимодействия разноименно заряженных ионов. В отличие от абсорбции, ионный обмен описывается сте- 2 хиометрическим химическим уравнением, что важно и для ионной хромато- графии. Однако в ионообменниках часто наблюдается и физическая адсорб- ция. Разделение в этом случае происходит благодаря разному сродству ком- понентов определяемой смеси к неподвижной фазе и, следовательно, разным скоростям перемещения по колонке. Ионообменная хроматография широко используется для решения многих биохимических проблем в научных иссле- дованиях.
Ионообменная хроматография основана на электростатическом взаимодействии между ионами противоположного заряда. Главное условие при этом, чтобы ионы одного заряда были ковалентно фиксированы на инертном носителе. Такой ионообменник будет связывать ионы противоположного заряда. При промывании ионообменника раствором с более высокой ионной силой или иным значением рН сорбированные ионы можно селективно перевести в раствор (элюировать). Распределительная хроматография основана на различной полярности разделяемых веществ. Если на инертный носитель нанести мапополярную неподвижную фазу, а затем смесь неполярных веществ, то они будут удерживаться носителем за счет гидрофобного взаимодействия . Если такую колонку промыть смесью полярных растворителей (подвижной фазой), то компоненты смеси будут перемещаться с различной скоростью в зависимости от их полярности. Вначале будут элюироваться гидрофильные вещества, слабо взаимодействующие с неподвижной фазой, а затем гидрофобные вещества.