- •Билет 1 Современная аналитическая химия. Классификации биологических объектов. Методология получения биологического материала и экстракции биологических молекул и субклеточных структур
- •Принципы ямр-спектрометрии
- •Билет 2 Основные типы ямр-спектрометров
- •Билет 3 Центрифуги и их роторы.
- •Билет 4 Методы центрифугирования для разделения клеток, субклеточных структур и биологических молекул
- •Билет 5 Мембранные технологии разделения биологического материала
- •Билет 6 Хроматография. Классификация методов хроматографии
- •Основные методы рентгеновского анализа биологического материала
- •Билет 7 Общая схема и основные элементы конструкции газовых хроматографов
- •Современная рентгеновская томография
- •Билет 8 Общая схема и основные элементы конструкции жидкостных хроматографов
- •Билет 9 Основные хроматографические методы разделения и анализа биологических веществ
- •Масс-спектрометрия (идентификация молекулы по ее осколкам). Основные типы конструкции масс-спектрометров
- •Билет 10 Основные электрофоретические методы разделения и анализы биологических объектов
- •Основные способы ионизации молекул для их масс-спектрометрического анализа
- •Билет 11 Спектрометрия и классификация методов спектрометрии
- •Масс-спектрометрия биологических объектов
- •Билет 12 Спектрометрия видимого и ультрафиолетового спектра. Общая схема и основные элементы конструкции спектрофотометров для измерений в видимом и ультрафиолетовом диапазонах спектра
- •Изотопные и радиоизотопные методы в биохимии и биофизике
- •Билет 13 Спектрофлюоресцентные методы анализа. Общая схема и основные элементы конструкции спектрофлюориметров.
- •Биофизические основы современных методов анализа первичной структуры нуклеиновых и белковых молекул
- •Билет 14
- •Принципы микроскопии сверхвысокого разрешения
- •Билет 15 Фурье- спектрометрия. Основные типы ик-Фурье-спектрометров
- •Методы электронной микроскопии
- •Билет 16 Спектрометрия комбинационного рассеивания (Раман спектрометрия)
- •Оптические методы анализа клеточной и субклеточной структуры
- •Билет 17 Принципы эпр-спектромерии
- •Билет 18 Проблемы измерения и анализа в современных биохимических, молекулярно-биологических, медицинских и биотехнологических исследованиях
Принципы микроскопии сверхвысокого разрешения
Микроскопия - изучение объектов с использованием микроскопа. Подразделяется на несколько видов: оптическая микроскопия, электронная микроскопия, многофотонная микроскопия, рентгеновская микроскопия или рентгеновская лазерная микроскопия, отличающиеся использованием электромагнитных лучей с возможностью рассмотрения и получения изображений микроэлементов вещества в зависимости от разрешающей способности приборов (микроскопов).
Микроскопия сверхвысокого разрешения является одним из выдающихся этапов развития в области получения микроизображений биообъектов со времен изобретения микроскопа. Микроскопия сверхвысокого разрешения значительно расширила границы возможностей микроскопии изображений клеток. Недавно были разработаны микроскопы сверхвысокого разрешения, превышающий традиционный дифракционный предел в два раза и система микроскопии сверхвысокого разрешения, на порядок превосходящая традиционные дифракционные пределы и позволяющая получать трехмерные изображения.
В электронной микроскопии для построения изображения вместо световых лучей используется пучок электронов. Это позволяет увеличить разрешающую способность электронного микроскопа по сравнению со световым в несколько тысяч раз.
Лазерная рентгеновская микроскопи́я — разновидность рентгеноструктурного анализа, основанного на дифракции рентгеновских лучей на исследуемом объекте. В отличие от традиционного рентгеноструктурного анализа, исследуется одиночные молекулы и их сочетания.
принцип действия люминесцентных микроскопов основывается на свойствах флюоресцентного излучения. Микроскопы используются для исследования прозрачных и непрозрачных объектов. Люминесцентное излучение, по-разному отражается различными поверхностями и материалами, что и позволяет успешно применять его для проведения иммунохимических, иммунологических, иммуноморфологических и иммуногенетических исследований.
Измерительные микроскопы служат для точного измерения угловых и линейных размеров объектов. Используются в лабораторной практике, в технике и машиностроении.
Сканирующий зондовый микроскоп — микроскоп для получения изображения поверхности и её локальных характеристик. Процесс построения изображения основан на сканировании поверхности зондом. В общем случае позволяет получить трехмерное изображение поверхности (топографию) с высоким разрешением.
Микроскоп нового типа: придуманная учеными методика получила название iPALM (interferometric photoactivated localization microscopy, интерферометрическая светочувствительная локализационная микроскопия. Суть метода PALM состоит в том, что введенные в клетку флуоресцентные метки активируются (и деактивируются) постепенно, с помощью световых импульсов: на каждом из снимаемых изображений «включается» лишь малая их часть. При объединении нескольких тысяч таких изображений создается цельная иллюстрация всей исследуемой структуры, на которой отдельно отмечен каждый флуоресцентный белок. В результате ученые получают гораздо более четкую картину, чем в случае применения методов традиционной флуоресцентной микроскопии. (разработка 2009 г, мое примечание;))
Гелиево-ионный микроскоп - абсолютно новый прорыв в микроскопии. Благодоря уникальным физическим параметрам гелиево-ионного пучка, способен обеспечивать такими характеристиками: ангстремное разрешение, глубина резкости, материальный контраст, какие до сих пор невозможно было получить при помощи традиционных инструментов микроскопии.
Секрет сверхвысокого разрешения гелиево-ионного микроскопа заключается в уникальной технологии формирования ионного зонда и физике его взаимодействия с поверхностью образца. Формируемый источником гелиевый зонд имеет диаметр всего 0,24 нм, что, фактически, эквивалентно диаметру атома гелия. Вторым преимуществом использования гелиевых ионов, в сравнении с электронами, является меньшая длина волны. В результате чего, уменьшаются дифракционные эффекты.
При взаимодействии гелиево-ионного пучка с образцом, фактически, отсутствуют эффекты обратного рассеивания, ограничивающие разрешение в электронной микроскопии. Как результат, получаемое изображение имеет высочайшую чёткость и детализацию.