- •Предисловие
- •I. Краткие сведения об инфекции и иммунитете
- •II. Бактерийные препараты и химиотерапевтиче- ские средства, применяемые в ветеринарной практике
- •Вакцины
- •Вакцины, изготовленные из ослабленных живых (матриксов) культур
- •Вакцины, изготовленные из культур, убитых формалином
- •Вирусы. Используемые для вакцинации
- •Иммунные сыворотки, применяемые для серотерапии и серопрофилактики
- •Средства, применяемые для диагностической цели
- •Препараты, применяемые для диагностических реакций на животных
- •Препараты, применяемые для лабораторных диагностических реакций
- •Химиотерапевтические препараты
- •III. Хранение и транспортировка прививочных средств
- •IV.Инструментарий, применяемый при прививках
- •V. Организация и техника проведения прививок организация прививок
- •Фиксация животных
- •Подготовка препаратов и инструментария
- •Способ введения препаратов
- •VI. Предохранительные, лечебные и вынужденные прививки
- •1. Прививки против сибирской язвы
- •Предохранительные прививки
- •Вынужденные прививки
- •Комбинационные прививки
- •Пассивные прививки
- •Возможные осложнения при прнпивках
- •Учёт результатов прививок
- •Производство прививок против сибирской язвы северным оленям
- •2. Прививки против эмфизематозного (шумящего) карбункула
- •3. Прививки против паратифа и колибациллеза телят
- •4. Прививки против рожи свиней
- •Способ применения
- •Возможные осложнения после прививки
- •Учет результатов
- •5. Прививки против паратифа поросят
- •6. Прививки против дизентерии ягнят
- •7. Прививки против столбняка
- •8. Прививки против геморрагической септицемии сельскохозяйственных животных и холеры птиц
- •9. Прививки при мыте лошадей
- •10. Прививки против чумы свиней
- •11. Прививки против оспы овец
- •12. Прививки против чумы крупного рогатого скота
- •13. Прививка против бешенства
- •14. Прививки крупного рогатого скота против перипневмонии
- •15. Прививки против оспы-дифтерита птиц
- •VII. Аллергические реакции у животных
- •1. Диагностика туберкулёза у крупного рогатого скота. Свиней и птиц
- •Внутрикожная нроба у крупного рогатого скота
- •Внутрикожная туберкулинизация у свиней
- •Глазная туберкулинизация
- •Подкожная туберкулинизация
- •Диагностика туберкулёза птиц с помощью туберкулина
- •2. Диагностика сапа у однокопытных животных с помощью маллеина
- •Глазная маллеинизация
- •Подкожная маллеинизация
- •3. Диагностика бруцеллёза у овец и коз с помощью бруцеллизата
- •4. Диагностика бруцеллёза у крупного рогатого скота с помощью абортина
- •VIII. Серологические методы лабораторной диагностики
- •1. Методика постановки реакции преципитации на сибирскую язву
- •2. Методика постановки реакции агглютинации (реакции райта) на бруцеллёз сельскохозяйственных животных
- •8. Методика постановки реакции агглютинации при инфекционном аборте лошадей
- •4. Методика постановки реакции агглютинации со свежей каплей крови при диагностике бациллоносителей белого поноса у кур
- •5. Методика постановки реакции связывания комплемента при бруцеллезе
- •Компоненты реакции
- •Титрация компонентов реакции
- •Титрация гемолизина
- •Титрация комплемента в гемолитической системе
- •Титрация комплемента в бактериологической системе
- •Титрация бруцеллёзного антигена
- •Примерный результат реакции
- •Главный опыт
- •Оценка результатов реакции
- •6. Методика постановки реакции связывания комплемента при сапе
- •Компоненты реакции
- •Титрация компонентов реакции
- •Титра ция гемолизина
- •Титрация комплемента в гемолитической системе
- •Титрация комплемента в бактериологической системе
- •Разведение комплемента для главного опыта
- •Главный опыт
- •Титрация сапного антигена
- •7. Методика постановки рск при перипневмонии крупного рогатого скота
- •Титрация компонентов реакции
- •Титрация комплемента в гемолитической системе
- •Титрация комплемента в бактериологической системе
- •Разведение комплемента для главного опыта
- •Титрация антигена
- •Главный опыт
- •Учёт реакции
- •8. Методика постановки реакции связывания комплемента при случной болезни
- •Титрация компонентов реакции
- •Титрация гемолизина
- •Титрация комплемента в гемолигической системе
- •Подтитровка комплемента на сыворотках
- •Разведение комплемента в установленном титре
- •Главный опыт
- •Титрация трипанозомного антигена
- •IX. Применение химиотерапевтических препаратов
- •1.Применение наганина
- •Техника приготовления раствора наганина
- •Техника введения раствора
- •Применение наганина с профилактической целью
- •Применение наганина с лечебной целью
- •Терапия осложнений после лечения
- •2. Применение новарсенола
- •3. Применение, флавакридина (трипафлавина, акрифлавина. Эифлавина)
- •Способ применения и возможные осложнения
- •4. Применение трипанблау (трипансинь)
- •Признаки побочного действия трипанблау
- •Профилактическое применение трипанблау
- •Лечебное применение трипанблау
- •Техника приготовления растворов
- •5. Применение альбаргина
- •6. Применение новоплазмина (лп4)
- •7. Применение сульфантрола (сульфамид - с55)
- •8. Применение пироплазмина (акаприн)
- •Содержание
- •Справочная таблица по проведению прививок
- •Применение химиотерапевтических препаратов при протозойных заболеваниях сельскохозяйственных животных
Титрация комплемента в бактериологической системе
Компоненты: сапные сыворотки ++++ и ++, консервированные 5% карболово-физиологическим раствором (на 9,0 сыворотки 1,0 раствора), нормальные сыворотки—2. Сыворотки берут той же давности, что и испытуемые.
Сапные и нормальные сыворотки наливают в пробирки по 0,05 и добавляют 0,45 физиологического раствора (или делают разведение 1 :10 и разливают по пробиркам по 0,5). Разведение комплемента из основного разведения (1 :20) начинается на 2 интервала ниже против титра его в гемолитической системе: если титр комплемента в гемолитической системе 0,25, то разведение начинается с 0,19; 0,22; 0,25; 0,28 и т. д. Каждое разведение комплемента ставится с контролем без антигена. Во все пробирки до недостающей 0,5 см3 дозы комплемента добавляют физиологический раствор.
После разливки нормальных и сапных сывороток, сапного антигена в титре и соответствующих доз комплемента пробирки ставят на 20 минут и водяную баню при 37°С, после чего в них наливают по 0,5 см3 гемолизина в рабочем титре и 0,5 см3 эритроцитов барана (2,5 о/о взвесь). Время реакции в гемолитической системе—20 минут.
Титр комплемента—минимальное количество его, потребное для полного гемолиза взвеси эритроцитов в пробирках с нормальными сыворотками с антигеном и без антигена, и с сапной сывороткой без антигена, при соответствующей задержке гемолиза в сапной сыворотке с антигеном при 37°С в течение 20 минут.
Разведение комплемента для главного опыта
Допустим, что надо исследовать 100 пробирок. Титр комплемента в бактериологической системе 0,3, разведение 1 ; 20. Следовательно, в каждой пробирке чистого комплемента имеется 0,015, т. е, 0,3 :20 ==0,015.
0,015Х100== 1,5 чистого комплемента и 48,5 физиологического раствора.
Антиген применяют в титре, установленном биофабрикой. При получении новой партии титр проверяется на известных сапных и нормальных сыворотках по приведённой ниже схеме.
Главный опыт
Испытуемые сыворотки исследуются в дозе 0,05. Контроля без антигена в дозе 0,1. Инактивируются сыворотки с физиологическим раствором при 58—59° С 30 минут. Время связывания бактериологической системы в водяной бане—20 минут, реакция—20 минут.
Сыворотки, обнаружившие ту или иную степень задержки гемолиза, проверяются вторично в дозах 0,1 и 0,05, с контролем в дозе 0,1.
При массовых исследованиях разрешается производить первую реакцию, с сывороткой без контроля (сыворотки без антигена).
Основные контроли. главного опыта. 1. Нормальные и сапные сыворотки с аятигеном и без антигена в дозах 0,05.
2. Антиген в двойной дозе без сыворотки.
3. Контроли гемолитической системы.
4. Оценка результатов реакции.
Официальной диагностической дозой сыворотки, по которой даётся результат, является 0,05 см3 для реакции, производящейся в объёме 0,5 см3. Доаа 0,1 см3 является вспомогательно-контрольной. Результат реакции оценивается два раза. Первый раз тотчас после водяной бани, второй—через 12 часов стояния проб при комнатной темпертуре. Оценка выражается крестами по следующей схеме:
а) положительная реакция ...................................++++ +++ ++±
б) сомнительная » ................................... ++ +
в) отрицательная » ................................... -
Степени задержки, выражаемые крестами, соответствуют следующим процентам гемолиза эритроцитов:
++++ гемолиз эритроцитов ............................от 0 до 10%
+++ » » ............................ » 10 » 40%
++± » » ............................. » 40 » 50%
++ » » .............................. »50 » 70%
+ » » ............................. » 70 » 90%
- » » ..............................» 90 » 100%
Результат исследования сообщается словами: положительная, отрицательная, сомнительная реакция, с указанием количества крестов. Данные всех титрационных опытов и особенностей реакции вносятся в дневник серологических работ лаборатории.
Для внесения объективного признака в определение результата реакции крестами и однообразной оценки её в различных лабораториях, рекомендуется производить оценку в процентах гемолиза. Это делают так: из реакции выбирают 5 пробирок с полным гемолизом и жидкость сливают в одну пробирку. Жидкость эта означает 100 о/о гемолиза. Из неё готовят разведения с меньшими процентами гемолиза следующим образом:
№ пробирок |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
Гемолизированная жидкость |
0 2 |
0 4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
1,2 |
1,4 |
1,6 |
1,8 |
Физиологмческий раствор ......... Процент гемолиза . . . |
1,8
10 |
1,6
20 |
1,4
30 |
1,2
40 |
1,0
50 |
0,8
60 |
0,6
70 |
0,4
80 |
0,2
90 |
Стандартные пробирки приготовляют перед учётом реакции. Учёт производят тогда, когда эритроциты осели на дно пробирки. Цвет исследуемой жидкости сравнивают с цветом жидкости, находящейся над осадком в стандартной пробирке; процент переводят в кресты.
Для более наглядного сопоставления реакции со стандартной жидкостью гемолиза рекомендуется при изготовлении этого стандарта, не изменяя объёма жидкости, в каждую пробирку добавить кровяных шариков барана в разведении 1 :40 по следующей схеме:
№ пробирок |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
2,5% взвесь эрит-роцитов ......... |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,45 |
0,40 |
0,35 |
0,30 |
0,25 |
0,20 |
0 15 |
0,10 |
0,05 | |
Общий объём гемолизированной жидкости . |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
2,05 |
2,10 |
2,15 |
2,20 |
2,25 |
2,30 |
2,35 |
2,40 |
2,45 |