2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Медицинская_бактериология_Соколова_Т_Н_
.pdf
Рис. 24. Мазок (слева) и электронная микроскопия C. botulinum
Факторы вирулентности: продукция ботулинического экзотоксина. Он считается одним из самых сильных ядов. Ботулинический токсин блокирует холинергическую передачу процесса возбуждения в синапсах (нарушается слияние синоптических пузырьков с мембраной), оказывая нейротоксическое действие. Смертельная доза для человека составляет около 0,3 мкг.
Патогенез ботулизма
Токсин адсорбируется на клетках слизистой кишечника, всасывается в кровь, развивается токсинемия; поражаются периферические нервные окончания (α-моторные нейроны передних рогов спинного мозга), происходит разрушение синаптических белков. Это приводит к нарушению походки, зрения, двигательной активности рук, асфиксии, и как результат к параличу и смерти (в 60% случаях).
Микробиологическая диагностика ботулизма
Патологический материал - промывные воды желудка, остатки пищи, секционный материал (печень, кишечник, желудок), кал, кровь используют для выделения токсина с помощью РН на животных, ИФА, РНГА; проводится также выявление в крови антитоксических Ig с помощью РНГА и выделение чистой культуры возбудителя (по общему для клостридий алгоритму).
Иммунопрофилактика проводится по показаниям анатоксином (для каждого биовара существует свой анатоксин).
Иммунотерапию проводят поливалентной антитоксической сывороткой, а после установки биовара - моновалентной сывороткой.
РОЛЬ В ПАТОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА C. DIFFICILE
C. difficile - нормальный обитатель кишечника человека, резистентный к антибиотикам. При длительной антибиотикотерапии происходит усиленное размножение бактерий, секреция ими энтеро - и
41
цитотоксина, и развивается антибиотиковый псевдомембранозный энтероколит. Этот микроб включен в состав возбудителей госпитальных инфекций.
КОРИНЕБАКТЕРИИ. БОРДЕТЕЛЛЫ. ГЕМОФИЛЫ. ЛЕГИОНЕЛЛЫ
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ДИФТЕРИИ, КОКЛЮША, ЗАБОЛЕВАНИЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ГЕМОФИЛАМИ, ЛЕГИОНЕЛЛЕЗОВ
Контрольные вопросы
1.Общая классификация коринебактерий.
2.Коринебактерии дифтерии: морфологические, культуральные, биохимические и серологические свойства, дифтерийный токсин, резистентность во внешней среде, отличия дифтероидов от дифтерийной палочки.
3.Дифтерия: эпидемиология, клинические проявления, взаимодействие возбудителя с организмом человека, иммунитет и определение его напряжённости, профилактика.
4.Микробиологическая диагностика дифтерии: общая схема, определение токсигенности выделенной культуры.
5.Общая характеристика бордетелл, резистентность во внешней среде.
6.Коклюш: общая схема микробиологический диагностики.
7.Гемофильные бактерии: классификация, общая характеристика гемофильной палочки, её роль в патологии человека и микробиологическая диагностика вызываемых ею заболеваний.
8.Легионеллы: классификация, общая характеристика Legionella pneumophila, взаимодействие возбудителя с организмом человека, болезни легионеров и общая схема её микробиологической диагностики.
9.Ку-лихорадка: возбудитель, взаимодействие возбудителя с организмом человека, иммунитет, микробиологическая диагностика.
КОРИНЕБАКТЕРИИ Общая классификация коринебактерий
Отдел: Firmicutes, род Corynebacterium включает патогенный для человека вид C. diphtheriae – возбудитель дифтерии. В состав вида входит несколько вариантов: var. Gravis, var. Mitis, и var. Intermedius. В состав рода Corynebacterium входят дифтероиды -
42
«коринеформные бактерии», микроорганизмы по многим признакам подобные на C. diphtheriae.
Общая характеристика
Это большая группа палочек, широко распространенная в природе, обнаруживается на растениях, вызывает заболевания у животных и человека. Они являются нормальными обитателями кожи, верхних дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта и мочеполовых путей. Большинство представителей рода Corynebacterium ус- ловно-патогенные микроорганизмы. Вид Corynebacterium diphtheriae вызывает дифтерию.
Corynebacterium diphtheriae представляют собой бактерии, располагающиеся в мазке попарно, под углом, образуя V-, Y-, X-формы, дифтероиды в мазке располагаются параллельно друг другу. Внутри клетки содержатся зёрна волютина (внутриклеточные включения). У C. diphtheriae они располагаются по одному на полюсах, у дифтероидов зерна волютина могут отсутствовать или их может быть много и расположены они вдоль всей палочки беспорядочно. Окрашивают коринебактерии по Леффлеру – цитоплазма окрашивается в голубой цвет, включения - в насыщено-синий (имеет диагностическое значение неравномерность окрашивания или метахромазии); по Нейссеру цитоплазма окрашивается в желтый, а включения – в коричневый цвет.
Рис. 25. Обычная и электронная микроскопия Corynebacterium diphtheriae
Растут на сложных средах, образуют R-формы колоний, напоминающие цветки маргаритки (вирулентный вариант), это один из признаков, по которому вид C. diphtheriae подразделяют на два варианта: gravis на питательном агаре образуют R формы колоний и mitis на МПА образуют S формы колоний.
43
Факторы вирулентности: Коринебактерии продуцируют экзотоксин, образование которого детерминировано умеренным фагом. В процессе фаговой конверсии бактерия приобретает tox-ген и начинает синтезировать токсин. Белковый экзотоксин нарушает синтез белка в клетке, поражает клетки миокарда, надпочечников, вызывает демиелинизацию нервных ганглиев; местно вызывает отек, некроз ткани и образование фибриновой пленки.
Источник инфекции - больной или носитель инфекции.
Путь заражения - воздушно-капельный или реже - контактный.
Патогенез дифтерии
Corynebacterium diphtheriae попадают на слизистую носоглотки, адсорбируются на эпителиальных клетках слизистой, размножаются, синтезируют токсин, который в месте внедрения вызывает отек, некроз ткани и образование фибриновой пленки. Фибриновая пленка в верхних отделах дыхательных путей, покрытых многослойным цилиндрическим эпителием, связывается плотно, а в нижних отделах дыхательных путей с однослойным эпителием связывается непрочно, может легко отслаиваться и приводить к асфиксии («дифтерийный круп»). Всасываясь в кровь, дифтерийный токсин вызывает тяжелую интоксикацию (токсинемия), поражает миокард, надпочечники, нервные ганглии.
Рис. 26. Поражение при дифтерии миндалин. Видна дифтерийная пленка
Микробиологическая диагностика дифтерии
Патологический материал: пленка, слизь из носоглотки. Делают мазок, окрашивают по Леффлеру и по Нейссеру, микроскопируют для
44
выявления зерен валютина. Бактериоскопический метод носит ориентировочный характер, основной - бактериологический. Выделяют чистую культуру на среде Клауберга, среде Ру. Идентифицируют по культуральным и биохимическим свойствам. Определяют цистиназную активность при помощи пробы Пизу, у C. diphtheriae она положительная, а у непатогенных представителей рода Corynebacterium - отрицательная. Обязательным является определение токсигенности in vivo на морской свинке и in vitro: применяется реакция преципитации в геле по Оухтерлони (РПГ). Для выявления генома возбудителя применяют ПЦР.
Иммунопрофилактика включает плановую профилактику с введением дифтерийного анатоксина в составе вакцин АКДС или АДС, которая защищает на 10 лет.
Иммунотерапия: введение антитоксической сыворотки как можно раньше, пока токсин не связался с тканью миокарда.
BORDETELLA PERTUSSIS
Общая классификация бордетелл
Отдел Gracilicutes, род Bordetella, включает в себя патогенные для человека виды: В. pertussis – вызывает коклюш и B. parapertussis – вызывает паракоклюш.
Bordetella pertussis – бактерии, которые вызывают коклюш – острую инфекционную болезнь, характеризующуюся поражением дыхательных путей с приступами спастического кашля. Болеют в основном дети. Bordetella parapertussis вызывает паракоклюш, который сходен с коклюшем, но протекает легче.
Рис. 27. Электронная и обычная микроскопия Bordetella pertussis
Bordetella pertussis – это мелкие грамотрицательные коккобактерии, облигатные аэробы. Растут на сложных питательных средах, через 3 – 5 дней образуют мелкие S - колонии. Бактерии крайне неус-
45
тойчивы во внешней среде.
Основной фактор вирулентности – коклюшный токсин, который является многокомпонентным и состоит из белкового и небелкового компонентов.
Патогенез коклюша
Человек заражается воздушно-капельным путем. Бордетеллы размножаются в верхних дыхательных путях, вызывают воспаление и отёк слизистой оболочки. Вырабатывающийся токсин вызывает раздражение рецепторов слизистой оболочки дыхательных путей, возбуждение дыхательного центра и спазм мелких бронхов, что приводит к приступообразному «лающему» кашлю.
Рис. 28. Ребенок во время приступообразного кашля при коклюше
Микробиологическая диагностика коклюша
Основной метод диагностики - культуральный. Выделение чистой культуры проводят на средах Борде-Жангу, казеиновоугольном агаре (КУА), идентификацию проводят по морфологическим, культуральным и серологическим признакам.
Экспресс-диагностику - с помощью РИФ.
Ретродиагностику проводят серологическими методами: по нарастанию титра антител в «парных сыворотках», используя РА, РНГА, РСК.
Специфическая профилактика коклюша: АКДС, которая содержит убитую коклюшную вакцину. Для пассивной профилактики используют нормальный человеческий иммуноглобулин: его вводят детям до года при контакте с больным, а также неиммунизированным детям по эпидпоказаниям.
46
HAEMOPHILUS INFLUENZAE
Общая классификация гемофильных микроорганизмов
Отдел: Gracilicutes, семейство: Pasteurellaceae, Род: Haemophilus включает в себя более 10 видов, патогенные для человека виды: H. influenzae – возбудитель воспалительных процессов, чаще всего дыхательных путей и H. ducreyi – возбудитель мягкого шанкра. Остальные гемофилы (всего род включает 16 видов) – сапрофитические обитатели полости рта и носоглотки.
Haemophilus influenzae вызывает у детей эпиглотит и менингит, а у взрослых – пневмонии. Может вызывать синуситы, отит и другие заболевания. Другой представитель рода - Haemophilus ducreyi - возбудитель мягкого шанкра. Это острое венерическое заболевание, с множественными болезненными папулами, язвами половых органов и воспалением лимфатических узлов. Передается половым путем.
Рис. 29. Мазок Haemophilus influenzae
Haemophilus influenzae - мелкие кокковидные грамотрицательные палочки (рис.29), могут образовывать капсулу, причем главным патогеном является как раз капсульный серовар b. спор и жгутиков не образует. Растет на средах со свежей кровью - МПА с добавлением лизированных эритроцитов, по биохимическим свойствам выделяют 6 биоваров (I – VI), а по капсульным антигенам – 6 сероваров (a – f).
Общая характеристика эпидемиологии: антропонозное заболевание, передающееся аэрогенным путем; широко распространено носительство до 90% взрослых, у детей – от 3-5% (капсульных штаммов) до 30-50% (бескапсульных штаммов).
Клинические проявления: Гемофильная палочка вызывает две группы заболеваний. Острые гнойно-воспалительные процессы – у детей поражается надгортанник – эпиглотит, возможен менингит, сопровождающийся стойкими неврологическими нарушениями, у взрослых пневмонии. Хронические формы, при которых H.influenzae
47
выступает как этиологический фактор, вторичной или один из сочленов смешанной в ассоциации с пневмококками, стафилококками и аденовирусами инфекции.
Острые инфекции чаще вызываются капсульными штаммами I биовара, а хронические – бескапсульными штаммами II и III биоваров.
Микробиологическая диагностика Основной метод диагностики бактериологический. Проводят
выделение чистой культуры, но идентифицировать её очень сложно. Профилактика За рубежом применяется химическая вакцина на основе кап-
сульного антигена серовара b. В США и некоторых других странах входит в число обязательных прививок.
LEGIONELLA PNEUMOPHILA
Общая классификация легионелл
Отдел Gracilicutes, к порядку легионелл Legionellales относятся два семейства:
1.Legionellaceae, род Legionella, ведущую роль в патологии человека играет вид L.pneumophila.
2.Coxiellaceae, род Coxiella, патогенным для человека является вид C. burnetii.
Рис. 30. Мазок L.pneumophila
Legionella pneumophila – микроорганизмы, обитающие в теплых водоемах со стоячей водой. Вызывают сапронозное заболевание под названием «болезнь легионеров», сопровождается тяжелой пневмонией.
48
Рис. 31. Электронная микроскопия Legionella pneumophila
Legionella pneumophila - подвижная грамотрицательная палочка, она имеет жгутики (один или два), очень требовательная к условиям культивирования. На питательных средах образует пигментированные колонии, которые светятся при облучении УФ светом.
Патогенез болезни легионеров
Вода системы кондиционирования воздуха, душевых установок, содержащая микробы, попадает в виде аэрозоля в дыхательные пути человека и вызывает воспалительный процесс в нижних отделах дыхательных путей с последующим развитием пневмонии. При бактериемии (попадании бактерий в кровь) и частичной их гибели высвобождается эндотоксин, который вызывает общую интоксикацию организма, сопровождающуюся поражением ССС, ЖКТ, ЦНС и почек.
Микробиологическая диагностика болезни легионеров
Патологический материал: чаще берут плевральную жидкость для обнаружения антигена (Аg) с помощью РИФ и выделения чистой культуры легионелл на сложных питательных средах, в курином эмбрионе, а также заражают морских свинок. Кроме этого исследуют кровь больных для обнаружения в ней специфических Ig с помощью ИФА и РИФ.
COXIELLA BURNETII
Coxiella burnetii – возбудитель Ку-лихорадки. Бактерии весьма устойчивы во внешней среде, а также к различным физическим и химическим воздействиям. В частности, при нагревании до температу-
49
ры 90°С они не погибают в течение 1 часа, следовательно, при пастеризации молока они также не погибают, этот факт имеет большое эпидемиологическое значение.
Резервуаром возбудителя в природе являются более 60 видов млекопитающих, преимущественно коров, коз и овец.
Заражение человека происходит разными путями: в основном аэрогенным, алиментарным, контактным, трансмиссивным. Преобладают аэрогенный и алиментарный пути передачи. Передачи инфекции от больного человека к здоровому не происходит.
СПИРОХЕТЫ
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА СИФИЛИСА, ЛЕПТОСПИРОЗА, БОРРЕЛИОЗОВ
Контрольные вопросы
1.Спирохеты: таксономия патогенных спирохет, тинкториальные свойства.
2.Патогенные трепонемы и их роль в патологии человека.
3.Морфология возбудителя сифилиса.
4.Сифилис: взаимодействие возбудителя с организмом человека, характеристика нейросифилиса, эпидемиология. Микробиологическая диагностика сифилиса: методы в различные периоды болезни, микроскопическое выявление возбудителя, серологический метод.
5.Основные группы патогенных для человека боррелий. Эпидемический возвратный тиф: этиология, патогенез, микробиологическая диагностика.
6.Болезнь Лайма: этиология, взаимодействие возбудителя с организмом человека, клинические проявления, микробиологическая диагностика.
7.Общая классификация лептоспир. Лептоспироз: общая схема взаимодействия возбудителя с организмом человека, поражение ЦНС, препараты для иммунопрофилактики, общая схема микробиологической диагностики лептоспироза.
8.Бартонеллы. Ориенции. Эрлихи.
9.Риккетсии, риккетсиозы, их микробиологическая диагностика.
10.Классификация риккетсий и риккетсиозов.
11.Хламидии и хламидиозы. Микробиологическая диагностика хламидиозов.
12.Микоплазмы и микоплазменные инфекции, их микробиологическая диагностика.
50