патенты / 19520

779569-- = "/"; . , . . , . . , . , , . .



. :
:
УведомлениеЭтот перевод сделан компьютером. Невозможно гарантировать, что он является ясным, точным, полным, верным или отвечает конкретным целям. Важные решения, такие как относящиеся к коммерции или финансовые решения, не должны основываться на продукте машинного перевода.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ GB779569A
[]
ПАТЕНТНАЯ СПЕЦИФИКАЦИЯ 7 Дата подачи заявки и подачи Завершено 7 Уточнение: 12 августа 1955 г. : 12, 1955. Полная спецификация опубликована: 24 июля 1957 г. : 24, 1957. индекс при приемке: -Класс 68 (1), Б. Международная классификация: -В 63 . :- 68 ( 1), . :- 63 . ПОЛНАЯ СПЕЦИФИКАЦИЯ Усовершенствования буев и связанные с ними Я, НИЛ ГАРЛАНД, британский подданный из Фордуна, Киллерна, Глазго, настоящим заявляю об изобретении, на которое я молюсь, чтобы мне был выдан патент, и о методе, с помощью которого оно должно быть осуществляется, что будет конкретно описано в следующем заявлении: , , , , , , , , , : Настоящее изобретение относится к буям и, в частности, относится к причальным или станционным буям. , . Там, где пространство для стоянки кораблей и самолетов ограничено, часто приходится прикреплять нос одного судна и корму другого к одному и тому же бую. Это можно сделать, снабдив буй несколькими швартовными проушинами, но здесь Тенденция к нестабильности швартовки и тяжелым нагрузкам на механические соединения. , , . С целью преодоления этих трудностей, присущих многократной швартовке, изобретение предлагает устройство швартовной скобы для буев, содержащее множество швартовных скоб, с помощью которых суда могут быть пришвартованы к бую, причем крепление обеспечивает возможность поворота каждой скобы в вертикальной плоскости. в корпусе буя с возможностью открывания и закрывания друг относительно друга за счет движений пришвартованных к ним судов и взаимодействующих стопорных средств на корпусе и скобах для ограничения поворотных движений указанных скоб. , , - . В частности, крепление выполнено в виде коромысла, приспособленного для поддержки швартовного троса посредством общего шарнирного пальца, вокруг которого поворачиваются скобы, причем указанный коромысл также приспособлен для установки в корпусе таким образом, что корпус буй может свободно перемещаться по швартовному тросу, а коромысло может отделяться от корпуса при определенных условиях нагрузки, чтобы обеспечить отделение упоров и относительное открытие скоб. , , , . Каждая швартовная скоба, используемая в устройстве согласно изобретению, содержит проушину и форштевень, скрепленные вместе с образованием жесткого узла в отличие от троса. Цена 3/6 л 7799569 № 23312/55. 3/6 7799569 23312/55. скоба, которая является гибкой по своему характеру. . Изобретение особенно полезно при применении к бую, который является устойчивым как с прикрепленным к нему швартовным тросом, так и без него, чтобы обеспечить возможность удержания водного или воздушного судна с помощью швартовки, спускающейся к морскому дну, в отличие от от причала, который функционирует посредством конструкции буя. Буй такого типа раскрыт в спецификации предшествующего уровня 55. , 50 , ' 55 Британский патент № 485,173. В этом запатентованном буе трос прикреплен к опорному элементу троса, который установлен в верхнем коническом конце клюза для троса так, чтобы обеспечить свободу качающегося движения универсальным образом во всех направлениях вокруг и вокруг. через ось трубы. 485,173 60 . Согласно этому изобретению вышеупомянутый качающийся рычаг может быть выполнен в виде элемента, поддерживающего трос, аналогично опоре 65 качающегося троса, описанной в патентном описании. 65 № 485173. 485,173. Для того чтобы изобретение можно было легко понять и реализовать на практике, один из его практических вариантов осуществления теперь будет описан в качестве примера со ссылкой на прилагаемые чертежи, на которых: Фиг. 1 представляет собой вертикальное сечение буя в соответствии с изобретение, имеющее усовершенствованное многократное швартовочное устройство; и 75 Рис. 2 представляет собой схематический вид сбоку самого устройства без окружающей конструкции буя, при этом проушины находятся в другом положении, чем на Рисунке 1; На рисунках 3 и 4 представлены модифицированные детали. 80 Изобретение показано применительно к бую, как описано в патентном описании № , 70 : 1 ; 75 2 1; 3 4 80 . 485,173 Корпус 1 буя правоцилиндрической формы представляет собой полый поплавок, закрытый с каждого конца пластиной 2, расположенной под прямым углом 85 к центральной оси корпуса. Снаружи в осевом направлении через полый корпус проходит клюз, состоящий из двух усеченных частей. конические корпуса 3 и 4 (в данном случае идентичные, так что буй является двусторонним) с широкими концами, открывающимися 90 _I , 64 __ 779,569 в соответствующие торцевые пластины 2 и внутренними концами, соединенными трубкой 5. 485,173 1 - 2 85 - 3 4 ( ) 90 _I , 64 __ 779,569 2 5. Диаметр корпуса примерно в два раза превышает его глубину, чтобы обеспечить необходимое соотношение устойчивости к весу. . Каждый конический корпус снабжен внутри и рядом с соединительной трубкой 5 опорной поверхностью 6, которая может быть удобно образована частью корпуса (3 или 4), утолщенной настолько, чтобы быть подходящей для поддержки коромысла 7, поддерживающего кабель. к которому при использовании буя крепится цепной швартовный трос 8, свободно проходящий через клюз к морскому дну. 5 6 ( 3 4) 7 , , 8 . Опорный коромысло 7 троса имеет внешнюю сферическую или другую изогнутую опорную поверхность 9, которая опирается на опорную поверхность 6 корпуса буя, части 3 и 4, подобно шаровому шарниру и, таким образом, свободно перемещается по ней в во всех направлениях, автоматически самоцентрируясь и удерживаясь под действием веса швартовного троса. Предпочтительно коромысло 7 обычно является полым и имеет центральную трубчатую часть корпуса 10 с вогнуто-выпуклым фланцем основания, образующим опорную поверхность 9, и верхний кольцевой фланец 11, который образует верхнюю опорную поверхность, на которой могут поворачиваться скобы. В нижней вогнутой части 12 опорной поверхности 9 коромысла предусмотрены отверстия для слива воды 13, а радиальные перемычки 14 соединяют опорную поверхность 9 с центральной трубкой '10. . 7 9 6 , 3 4, , , - , 7 , 10 - 9, 11 12 9 13, 14 9 '10. В настоящем варианте осуществления предусмотрены две проушины 14 и 15 (но их может быть больше двух), установленные на общем шарнирном штифте 16, который проходит через большой конец верхнего звена 17 (предпочтительно имеющего грушевидную форму) швартовного троса. 8 Таким образом, следует понимать, что соединение между коромыслом 7 и тросом является полностью свободным и плавающим и поддерживается за счет веса троса, проходящего через клюзовую трубу 3, 4, 5, с трубкой 10 опоры троса. коромыслом и трубкой 5 клюза, обеспечивающей осевую направляющую двух верхних звеньев 17 и 18 троса. 14 15 ( ) 16 17 ( ) 8 7 , 3, 4, 5 10 5 17 18 . Поскольку разница в размерах между большим и малым концами грушевидного звена 17 сравнительно невелика, она не показана на чертеже. 17 , . Каждый глаз (14 или 15) имеет цельную штангу (19 или 20), укрепленную боковыми перемычками (21 или 22) и раздвоенную, образующую челюсть (23 или 23а), причем обе челюсти имеют разный размер, поэтому причем один (23а) охватывает другой (23), при этом общий шарнирный штифт 16 проходит через соосные отверстия в губках. ( 14 15) ( 19 20) ( 21 22) ( 23 23 ), ( 23 ) ( 23) 16 - . Нижняя сторона каждой дуги скобы опирается на верхний фланец коромысла и снабжена уплощенными опорными поверхностями 24 и 25, резко наклоненными в противоположных направлениях от продольной оси скобы, образуя практически треугольное основание для контроля и ограничения поворота. перемещение скоб вокруг общего шарнирного пальца 16. , 24 25 16. Скобы могут принимать вертикальное положение, показанное пунктирными линиями на рис. 1, при этом шарнир 16 поднимается относительно фланца 11, когда вершина 26 опорной поверхности 24, 25 поворачивается к фланцу 11, или они могут наклоняться. 70, наружу в наклонное положение, в котором проушины 14 и 15 опираются на выпуклую опорную полосу 27, окружающую устье каждого конуса (3 или 4). 1 16 11 26 24, 25, 11, 70 14 15 27 ( 3 4). При использовании швартовной скобы 75 и буя согласно изобретению можно заметить, что, пока суда прикреплены к проушинам 14 и 15 по линии прилива или ветра, нагрузка на проушины остается в вертикальной плоскости. второе судно, когда одно 80 уже пришвартовано, буй вращается или внутренний узел поворачивается, чтобы совместить результирующую линию натяжения швартовных тросов от двух судов. Когда из-за ветра и/или прилива к При швартовке 85 результирующая тяга заставляет скобы поворачиваться вокруг общего шарнира 16, при этом коромысло 7 опоры троса наклоняется в среднее положение, соответствующее равнодействующей нагрузке, и происходит наклон корпуса 1 на 90 градусов. самого буя. 75 , 14 15 , 80 , / , 85 , 16, 7 90 1 . Общая конструкция буя, отличная от подробно описанных в настоящем документе, может быть признана подходящей для требований; для примера 95, как указано в вышеупомянутом описании предшествующего патента. Влияние общей комбинации поворотных скоб на общий штифт, который сам свободно (плавающим) перемещается на опоре троса 100, коромысле 7, который имеет универсальное перемещение на гнезде корпуса. 6 обеспечивает более устойчивую механическую конструкцию, сохраняя при этом устойчивость буя при различных условиях нагрузки. 105 Если желателен некоторый контроль подъема швартовного троса, центральная труба 10 опорного коромысла 7 для троса может иметь наверху перемычку. входной фланец 28, образующий упор для второго звена 18 сверху 110 швартовного троса 8. Таким образом, верхняя часть 11 опоры троса может представлять собой плоскую пластину с удлиненной прорезью, обеспечивающей прохождение верхнего звена 17 швартовного троса. . ; 95 () 100 7 6 105 , 10 7 - 28 18 110 8 11 17 . На фиг.3 показана модификация скоб 115 для обеспечения большего сопротивления выходу скоб за пределы вертикального положения. Таким образом, вместо симметрично наклонных поверхностей 24 и 25 имеется уплощенная опорная поверхность 29, идущая от вершины 26 и 120, которая в Вертикальное положение соответствующей скобы входит в заподлицо с верхней опорной поверхностью 11 на опорном коромыселе 7 цепи, когда скоба поднимается из наклонного положения, показанное 125. На рис. 4 показана модификация скоб с двумя проушинами, в которой каждая проушина имеет -образную форму. плоские стороны () обращены друг к другу, как показано, так что два глаза могут сблизиться, как показано 130 779 569 пунктирными линиями; таким образом, оба могут приближаться к вертикали более близко, чем предыдущая конструкция, или, альтернативно, позволяют любой дужке достичь вертикального положения, не загрязняя соседнюю, что могло бы произойти при определенных обстоятельствах с нормальным глазом. 3 115 , 24 25 29 26 120 11 7 125 4 () 130 779,569 ; , , , , . Следует отметить, что скобы швартовного устройства согласно изобретению поворачиваются каждая в вертикальной плоскости, и в показанном предпочтительном расположении они оба установлены на шарнире 16 швартовного троса, причем их проушины 14, 15 находятся в одной и той же плоскости, так что что их обращенные друг к другу поверхности () Рис. 1 или (') Рис. 4 обеспечивают упоры, которые ограничивают движение каждого глаза внутрь по направлению к другому и, таким образом, определяют полностью закрытое положение дужек. Каждая дужка может поворачиваться независимо от другой, и его перемещение в вертикальное положение ограничено упорными поверхностями 11, 24, 25, 26 (29). Однако следует отметить, что взаимодействие упоров поддерживается только за счет веса швартовного троса 18. При определенных условиях нагрузки коромысло (7) может отделиться (под действием веса швартовного троса) от гнезда корпуса 6, при этом движением также отделяются упоры 11, 24, 25 (29). При этом скобы могут переворачиваться в ту или иную сторону за пределы вертикально, и одна скоба может занять такое положение, как показано на рис. 4 пунктирными линиями. , , 16 14, 15 () 1 (') 4 , 11, 24, 25, 26 ( 29) , - 18 ( 7) ( ) 6, 11, 24, 25 ( 29) 4 . Когда коромысло 7 находится на своем гнезде 6, полностью открытое положение дужки определяется стопорной планкой 27 в устье (основании перевернутого корпуса 3 усеченного конуса), с которым зацепляются наружные грани проушин дужки. Особенностью показанного устройства является то, что оно обеспечивает подъем коромысла с его посадочного места с помощью лебедки или шпиля судна при случайном ремонте швартовки. В этом случае швартовочная проушина, к которой крепятся швартовые тросы судна, будет натянута, а другая скоба будет натянута. будет провисать и при подъеме коромысла упадет в относительно широко открытое положение. 7 6, 27 ( - 3) ' ' - .
, ."> . . .
: 506
: 2024-04-11 13:17:53
: GB779569A-">
: :

779570-- = "/"; . , . . , . . , . , , . .



. :
:
УведомлениеЭтот перевод сделан компьютером. Невозможно гарантировать, что он является ясным, точным, полным, верным или отвечает конкретным целям. Важные решения, такие как относящиеся к коммерции или финансовые решения, не должны основываться на продукте машинного перевода.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ GB779570A
[]
ПАТЕНТНАЯ СПЕЦИФИКАЦИЯ 779,570 Дата подачи заявки и подачи полной спецификации: 19 сентября 1955 г. 779,570 : 19, 1955. № 26750/55. 26750/55. Заявление подано в Соединенных Штатах Америки 27 октября 1954 г. 27, 1954. Полная спецификация опубликована: 24 июля 1957 г. : 24, 1957. Индекс при приемке: -Класс 2(3), АА 1 Б, АА 1 С( 1 А: 1 Б: 1 Д 1: 2 А), АА 2 А 3. :- 2 ( 3), 1 , 1 ( 1 : 1 : 1 1: 2 ), 2 3. Международная классификация:- 07 г 12 . :- 07 12 . ПОЛНАЯ СПЕЦИФИКАЦИЯ Новый антибиотик Стрептолидигин Мы, , корпорация, учрежденная и действующая в соответствии с законодательством штата Мичиган, Соединенные Штаты Америки, по адресу: 301 , Каламазу, штат Мичиган, Соединенные Штаты Америки, настоящим заявляем об изобретении. , для чего мы молимся, чтобы нам был предоставлен патент, а метод, с помощью которого он должен быть реализован, был подробно описан в следующем заявлении: , , , , 301 , , , , , , , , :- Настоящее изобретение относится к новым соединениям, обладающим антибиотической активностью, и к способу их получения. Более конкретно, изобретение относится к новому соединению, указанному здесь под общим названием стрептолийдигин, к способу его получения путем ферментации, к способ его извлечения и концентрирования; сырой раствор, включая ферментационные бульоны, для его очистки, а также для его солей и их производства. , , , , , , ; , , . Целью настоящего изобретения является создание нового и полезного антибиотика, который активен против грамположительных и грамотрицательных бактерий. Другой объект изобретения состоит в том, чтобы предоставить соли этого антибиотика. производство и выделение этого антибиотика. Другие цели и особенности изобретения будут очевидны специалистам в области, к которой относится это изобретение. - - ' } ' . Было обнаружено, что путем культивирования в контролируемых условиях и на подходящей питательной среде, как указано ниже, ранее не описанного вида микроорганизма , выделенного из образца почвы, взятого в Мичигане, получено новое соединение - стрептолидигин. живого организма было депонировано в отделе ферментации Северной региональной исследовательской лаборатории в Пеории, штат Иллинойс, и добавлено в ее постоянную коллекцию под номером 2433. , , , , , , , , , 2433. Тщательное изучение морфологии и физиологии показывает, что он явно отличается от любого ранее описанного вида в «Руководстве по детерминативной бактериологии» Берджи, 6-е издание, страницы с 929 по 977 и далее; Ваксман и Лешевалье «Актиномицеты и их антибиотики». Микроорганизм охарактеризован в Таблице . Весь посев проводился с использованием вегетативного инокулята, выращенного при 28 градусах Цельсия, в 500-миллилитровой колбе Эрленмейера на возвратно-поступательном шейкере. Инокулят перемешивали по Уорингу в течение одной минуты. В каждую пробирку добавляли по 2 миллилитра смешанного инокулята. ' " ," 6th , 929 977 ; ' " " 28 , 500 0 2 , . Показания снимались на 4, 7 и 14 дни. , 4th, 7th 14th . 779,570 ТАБЛИЦА 779,570 Культуральные характеристики Среда Обычный желатиновый укол Питательный желатиновый укол 0,5 % триптона0,3 % Бульон с дрожжевым экстрактом Триптоновый бульон Рост Вегетативный хороший хороший хороший (кольцо вокруг поверхности; хлопьевидный материал внизу) хороший (хлопьевидный материал) Воздушный нет нет нет Растворимый следы пигмента оливкового цвета следы оливкового цвета нет нет нет Примечания 3/4 сжижено 3/4 сжижено Тест на индол отрицательный хорошее (кольцо вокруг поверхности; хлопьевидный материал внизу) хорошее (флоккулянт внизу) хорошее (кольцо вокруг поверхности; хлопьевидный материал внизу) хорошее хорошее хорошее хорошее небольшой рост белый нет нет нет хороший (серо-белый) хороший (тяжелый серо-белый) с вкраплениями черного цвета) «паутина» Моне нет нет Восстановление нитратов +, Цвет при добавлении пыльно-розовый Восстановление нитратов +, Цвет при добавлении пыльно-розовый Цвет вина, пептонизация -, восстановление нет желтый оливковый загар оливковый 25 потемнение легкий рост белый нет нет нет Питательный нитратный бульон Синтетический нитратный бульон Лакмусовое молоко Питательный агар Скошенный агар с -глюкозой Скошенный Агар Беннета Скошенный Пептон Железный агар Скошенный 779,570 ТАБЛИЦА (продолжение) Культуральные характеристики Вегетативный рост Растворимый в воздухе пигмент Замечания Чапека хорошо нет Сахароза (тяжелая белая; Скошенный агар слегка потрескавшаяся поверхность) Питательные вещества хорошие нет нет Крахмальный агар Скошенный крахмальный агар Гидролиз пластины в течение 4 дней Хороший хороший слабый Крахмал (хороший Агар розово-серо-белый споруляция) Хороший хороший отличный Крахмал (хороший розовый Агар серо-белый споруляция) Питательный материал хороший нет хорошего Крахмальный агар Казеин хороший хороший (хороший отличный Крахмал розово-серый агар белое спорообразование) Использование углеродных соединений в синтетической среде показано в Таблице . Методика , 56, 107-114 (1948). ), последовали следующие изменения: 0.5 % tryptone0.3 % ( ; ) ( ) 3/4 3/4 - ( ; ) ( ; ) ( ; ) ( ) ( ; ) ( ) ( - ) "" +, - +, - , -, 25 - ' 779,570 () ' ( ; ) 4 ' ( - ) ' ( ) ( - ) , 56, 107-114 ( 1948), : (1) Встряхивающие колбы инокулировали из почвенного фонда и инкубировали при 28 градусах Цельсия на возвратно-поступательном шейкере. ( 1) 28 . (2) Через 48 часов надосадочную жидкость декантировали. Вегетативный рост промывали 100 миллилитрами стерильной дистиллированной воды и надосадочную жидкость снова декантировали. Затем к промытому вегетативному наросту добавляли 100 миллилитров стерильной дистиллированной воды и смесь инкубировали. при 28 градусах Цельсия на возвратно-поступательном шейкере. ( 2) 48 , 100 ' 100 , 28 . (3) Еще через 48 часов супернатант декантировали. Вегетативный росток промывали, как описано выше, и смешивали в 100 миллилитрах стерильной дистиллированной воды в блендере в течение одной минуты. ( 3) 48 , 100 . 779,570 ТАБЛИЦА 779,570 Ассимиляция углеродных соединений в синтетической среде Придхема и Готлиба. Средние результаты Средние результаты + инулин + растворимый крахмал + глицерин -) дульцит + маннит + сорбит + инозитол + формиат натрия + оксалат натрия + тартрат натрия + салицилат натрия (+) ацетат Цитрат натрия + сукцинат натрия + = положительная ассимиляция отрицательная ассимиляция = практически отсутствие роста. Во всех случаях ассимиляции воздушный миоклий имел серо-белый цвет. + + + -) + + + + + + + (+) + + = = , - . Культура дает длинноветвистый нитчатый мицелий. Кониды имеют форму от сферической до овальной и образуют длинные спорофоры, слегка свернутые в начале, образующиеся из воздушного мицелия. При выращивании на агаре Беннета в оптимальных условиях воздушный мицелий имеет паутинистый цвет. (Маей и Пол, «Словарь цвета», 2-е издание, - , 1950 г. Кроме того, в среде присутствует легкий оливково-коричневый пигмент. Колонии на чашках с агаром Беннетта характеризуются белым воздушным пятном. мицелий, превращающийся в паутину (-) = слабый рост – нет ассимиляции (+) = положительная ассимиляция – только небольшой рост при появлении споруляции Колонии вогнутые с обратной стороны и выпуклые на , споруляционная поверхность Хороший рост и споруляция Развитие происходит при температуре от 24 до 37 градусов Цельсия, оптимальная температура инкубации — от 28 до 30 градусов Цельсия. , 1 ' ( , " ," 2 , - , 1950 , - ' (-) = - (+) = - , 24 37 ; , 28 30 . Хотя в некоторых отношениях похож на (Ваксман и Лед Шевалье «Актиномицеты и их антибиотики», стр. 56), эти микроорганизмы легко отличить по заметным различиям в их культурных характеристиках, которые изложены ниже. в Таблице . , ( ' " ) ," 56), . Контроль -ксилоза арабиноза рамноза фруктоза галактоза глюкоза манноза (-) (+) (+) (-) (+) (-) мальтоза сахароза лактоза целлобиоза рафиноза декстрин (-) (+ 4) 779 570 ТАБЛИЦА - (-) (+) (+) (-) (+) (-) (-) (+ 4) 779,570 Отличительные характеристики и Средняя Реакция Обычный желатиновый укол Триптоновый бульон Питательный агар Питательный нитратный бульон Пептон-железный агар Агар Беннета Следы оливкового пигмента 3/4 средняя разжиженная без воздушного мицелия без редуцирования воздушного мицелия + без тяжелого воздушного мицелия серо-белый воздушный мицелий (с пятнами черного цвета по мере старения культуры) нерастворимый пигмент 1/4 средняя разжиженный легкий белый воздушный мицелий Кремовый цвет Уменьшение воздушного мицелия кремово-белый воздушный мицелий тяжелый оливковый кремовый воздушный мицелий Как отмечалось выше, , 2433, может выращивать в культуральной среде для получения эффективного антибиотического материала. Культуральная среда содержит ассимилируемый источник углерода и азота, а также неорганические соли, но может представлять собой любую из множества сред, как видно из описанных выше тестов по утилизации. Организм способен ассимиляции многих источников энергии. Однако для экономии производства, максимального выхода стрептолидигина и простоты его выделения некоторые культуральные среды являются предпочтительными. Например, предпочтительными источниками углерода в культуральной среде являются глюкоза, сахароза и глицерин. - ' 3/4 + - ( ) 1/4 , , 2433, - , , , , , , . Другими источниками являются крахмал, лактоза и декстрин. , , . Предпочтительными источниками азота являются соевый шрот, пивные дрожжи и растворимые дистилляты, но другие источники включают кукурузный экстракт, казеин, смеси аминокислот и пептоны (мясо и соя). , ' ' , , , , ( ). Питательные неорганические соли, которые могут быть включены в среду, включают соли, способные выделять ионы, такие как натрий, калий, кальций, фосфат, хлорид и сульфат. Также могут быть использованы неорганические источники азота, такие как нитратные соли или соли аммония. , , , , , . Незаменимые микроэлементы также могут быть включены в питательную среду для выращивания . . Такие микроэлементы обычно поставляются в виде примесей, возникающих при добавлении других компонентов среды. . Для максимального роста и развития , 2433, культуральной среды перед инокуляцией организма должен быть доведен до значения от около 60 до около 75 и предпочтительно до значения около 70. , 2433, , , 6 0 7 5 , 7 0. Было замечено, что в течение периода роста организма и продукции антибиотика среда постепенно становится щелочной и может достигать от примерно 8,0 до примерно 8,5 или выше, причем конечный зависит, по крайней мере, в Частично это зависит от начального среды, буферов, присутствующих в среде, и периода времени, в течение которого организму разрешено расти. , 8.0 8 5, , , , , . Погружные аэробные условия культивирования являются условиями выбора для производства больших количеств стрептолидигина. Для приготовления ограниченных количеств антибиотика можно использовать встряхиваемые колбы и поверхностные культуры во флаконах. Когда выращивание проводится в больших резервуарах, предпочтительно использовать вегетативную форму организма для инокуляции производственных резервуаров, чтобы избежать выраженного отставания в производстве антибиотика и сопутствующего неэффективного использования оборудования. Соответственно: желательно сначала произвести вегетативный инокулят организма путем инокуляции относительно небольшого количества культуральной среды споровой формой организма и при получении молодого активного вегетативного инокулята переносить вегетативный инокулят в асептических условиях в большие резервуары. Среда, в которой производится вегетативный инокулят, может быть той же самой такой же или отличный от того, который используется для производства антибиотика. , , , , , , : , , , , . , 2433, можно удовлетворительно выращивать при температуре примерно от двадцати до примерно 32 градусов по Цельсию. Оптимальные выходы 5-трептоелидигина получают, когда культуральную среду поддерживают при температуре примерно от 24 до примерно 28 градусов по Цельсию. , 2433, 32 5 24 28 . Скорость продукции стрептолидигина и концентрацию антибиотической активности в культуральной среде легко отслеживать в течение периода роста микроорганизма путем тестирования образцов культуральной среды на их антибиотическую активность против организмов, о которых известно, что они чувствительны к антибиотику, т.е. Сальбус. , , . Для таких определений удобно использовать тест, включающий серийные разведения образцов культуры, добавление порций разведенных образцов в расплавленный питательный агар, затвердевание агара в чашке Петри, инокуляцию чашки молодой культурой . , , , , . и определение наибольшего разведения питательной среды, вызывающего полное угнетение роста организма на питательном агаре. , . Производство стрептолидигина сопровождается турбидиметрическими тестами, обычно используемыми при производстве других антибиотиков. . В общем, максимальная продукция антибиотика после инокуляции культуральной среды происходит между двумя и примерно пятью днями, когда используются погруженные аэробные культуры, и между примерно четырьмя и примерно двенадцатью днями, когда используются культуры на поверхности или во встряхиваемых колбах. , , . Стрептолидигин выделяют из культуральной среды с помощью следующих экстракционных или адсорбционных методов, включая адсорбцию антибиотика на катионных, анионных или амфотерных ионообменных смолах, таких как амберлит (зарегистрированная торговая марка), -50 (производства ) в натриевый цикл, смолу 1 (анионная смола четвертичного аммония) и (зарегистрированная торговая марка) и элюирование антибиотического материала подходящими элюирующими агентами, такими как водные нейтральные или кислые спирты. , - ( ), -50 ( ) , 1 ( ), ( ), . Для экстракции антибиотика из культуральной среды используют несмешивающиеся с водой полярные органические растворители, такие как хлорированные углеводороды, например метиленхлорид, этилендихлорид и хлороформ; спирты, имеющие слабую растворимость в воде, такие как 1-бутанол, 2-бутанол и амиловый спирт; алкиловые эфиры жирных кислот, такие как этилацетат, пропилацетат, бутилацетат и амилацетат; кетоны, характеризующиеся небольшой растворимостью в воде, такие как метилизобутилкетон и метиламилкетон. Экстракт культуральной жидкости затем выпаривают досуха, предпочтительно в вакууме, с получением антибиотика в сырой форме. , -, , , , , ; - 1butanol, 2-, ; , , , ; - , , , . Альтернативно, стрептолидигин можно отделить от культурального бульона путем контактирования фильтрационного бульона с адсорбирующим агентом. Адсорбирующие агенты - активированный оксид алюминия, силикагель и алюмосиликат магния - могут эффективно использоваться для очистки антибиотика с помощью адсорбционной хроматографии. Активированный уголь. также может быть использован, поскольку углерод сильно адсорбирует стрептолидигин. Однако предпочтительно предварительно обработать углеродный адсорбент таким агентом, как уксусная кислота, чтобы уменьшить сродство прочного связывания углерода с антибиотиком и тем самым облегчить элюирование антибиотика. Элюирование Удаление антибиотика из адсорбента легко осуществить, используя несмешивающийся с водой полярный органический растворитель, в котором антибиотик растворим. , -' , , , , , 70 - . Если для извлечения стрептолидигина используется только экстракционный процесс, подходящий метод включает концентрирование растворителя до относительно небольшого объема и осаждение антибиотика из растворителя путем добавления смешивающегося растворителя, в котором антибиотик мало растворим. затем получают в сырой, но твердой форме. Если экстракт подкислен, т.е. до от примерно 1,0 до примерно 50, то по существу весь антибиотик получается в форме свободной кислоты. 85 Если экстракт имеет от примерно 1,0 до примерно 50. примерно 60 или выше, практически весь продукт получается в форме соли щелочного металла с небольшими количествами свободной кислоты. 75 , 80 , , 1.0 5 0, 85 6 0 , . Предпочтительный метод выделения стрептолия 90 дигина включает экстракцию отфильтрованного пива при от 60 до 120 полярным, несмешивающимся с водой органическим растворителем, таким как метиленхлорид, этилендихлорид или хлороформ. 90 6 0 12 0 , , , . Затем экстракт концентрируют, подкисляют до 95 в диапазоне от примерно 10 до примерно 50 и предпочтительно от 35 до 45, и используют насыщенный жидкий углеводород, имеющий от пяти до восьми атомов углерода, т.е. растворитель , предпочтительно шестивалентный. или семиуглеродный углеводород 100, такой как гексан или гептан, добавляют к подкисленному органическому экстракту для получения аморфного осадка. Осадок отделяют и очищают промыванием с последующей кристаллизацией с получением практически чистого антибиотика 105 в форме свободной кислоты. . , 95 1 0 5 0 3 5 4 5, , , , 100 , , 105 . Также возможно экстрагировать материал антибиотика из прозрачного ферментационного бульона при кислом , т.е. от примерно 20 до примерно 5,0, с помощью полярного, несмешивающегося с водой органического растворителя, сконцентрировать и обработать экстракт насыщенным жидким углеводородом. для получения всего неочищенного антибиотика в форме свободной кислоты. , , 2 0 5.0 , - 110 , . Соли стрептолидигина получают обработкой раствора антибиотика в органическом растворителе, таком как этанол, метанол или этилацетат, эквивалентным количеством основания, например гидроксидом натрия, гидроксидом калия и гидроксидом кальция, и выпариванием 120 раствор досуха в вакууме Альтернативно раствор стрептолидигина (кислотная форма) в органическом растворителе можно обработать выбранным основанием или его раствором, а затем соль осаждать непосредственно из раствора. Рис. 125 Традиционные примеры солей, которые были готовятся соли натрия, калия и кальция. Другие, такие как соли алюминия, бария, магния, соли аминов, такие как 1-этилпиперидин, соединения четвертичного аммония, такие как 130 779 570. Выбор культивируемых организмов и воздействие на организмы модифицирующих средств, таких как рентген, ультрафиолетовый свет и химические агенты, такие как, например, азотистые иприты. 115 , , , , ., , , , 120 , ( ) , 125 , , , , , 1-, 130 779,570 , , , , . Стрептолидигин и его соли характеризуются широким антибактериальным спектром. Активность антибиотика по сравнению со стрептомицином в отношении показательных микроорганизмов показана в табл. . . такие как гидроксид тетраметиламмония и хлорид тетраметиламмония, можно легко получить вышеупомянутыми способами. , , - . Способ по изобретению не ограничивается продукцией стрептолидигина описанным штаммом , но охватывает также другие штаммы, продуцирующие стрептолидигин; , причем такие штаммы легко получить и выделить с помощью обычно применяемых методов выделения и модификации штамма, которые включают ТАБЛИЦУ - ; , - Антибактериальный спектр Минимальная ингибирующая концентрация (мкг/мл) Организм Окраска по Граму + Стрептолидигин Стрептомицин 25. ( /) + 25. + + + + + 10. + + + + + 10. 1.
50. 50. 25. 25. 5. 5. 1. 1. > 100. > 100. > 100. > 100. ( ) > 100. ( ) > 100. > 100. > 100. > 100. > 100. > 100. > 100. > 100. > 100. _> 100. _> 100. > 100. > 100. 25. 25. 3
.1 Активность антибиотика определяли методом штрихового разведения или с помощью тестов на разведение в бульоне. В первых тестах тест-организмы наносили штрихами на серию агаровых чашек, содержащих различные концентрации антибиотика, для определения минимальной концентрации стрептолидигина в мкг/мл раствора. субстрат, ингибирующий рост в течение сорока часов. В последних тестах тест-организмы выращивали в питательном бульоне, содержащем различные количества антибиотика. .1 - - , / , . Поскольку стрептолидигин ингибирует стрептококки в низких концентрациях (около 39 мкг/мл) и требует больших количеств (около 100 мкг/мл) для подавления микрококков, эта разница в активности полезна для целей диагностики среди 100. ( 39 /) ( 100 /) , 100. 50. 50. 1. 1. 1. 1. 5.
25. 25. 2.5 779,570 779,570 Дифференциальное разделение этиолы инфекций, связанных с этими микрофонами. Антибиотик также полезен при заражении животных (парентерация), вызванном , возбудителем гемцицемии, и заражении крупного рогатого скота, отправляемого на скотные дворы. токсично и продемонстрировал активность против и показано для лечения стрептококковых инфекций, пневмонии и рубцов. 2.5 779,570 779,570 ( ) , , , . Следующие примеры иллюстрируют восстановление и концентрацию. , , . и идентификация : : Эти примеры являются простыми по своей природе и не являются ограничивающими. . ПРИМЕР 1 1 Производство стрептолида. В каждую из серии колб Мейера емкостью 500 мил добавляли 100 мил следующей среды: 500- 100 : Бакто-пептон () (зарегистрированная торговая марка) Дрожжевой экстракт () (зарегистрированная торговая марка) Церелоза (зарегистрированная торговая марка) Дистиллированная вода до глюкозы нетехнического качества. Колбы автоклавировали при температуре Цельсия в течение двадцати минут. со споровой суспензией, полученной из скошенного казеин-крахмального агара, и инкубацией в течение приблизительно 7 часов при температуре от 24 до 30 дней на качалке с возвратно-поступательным движением. - () ( ) () ( ) ( ) - - 7 24 30 . литры этой вегетативной посевной среды для инокуляции каждой из серии колб Эрленмейера, содержащих аликвоты следующей среды: Сахароза, Карбонат кальция, Сульфат аммония, Пивные дрожжи, Кукурузный крутой раствор, Дистиллированная вода до 3 а 6 2 2,5 Перед посевом колбы выдерживали при определенной температуре. 121 градус Цельсия двадцать минут, а затем охлаждается. , ' 3 6 2 2.5 , 121 . инкубировали при 24 градусах возвратно-поступательного шейкера, работающего со скоростью 94 четырехдюймовых хода в минуту, А в течение 106 часов, образец культуральной среды, анализированный 165 . 24 94 - 106 , , 165 . за миллилитр. . Описанная выше процедура за исключением использования следующих логических агентов кроорганизмов. - . Лечение , оррагическое сепинцидное заболевание при использовании его низкой жизнеспособности , его кокковая лихорадка горла - это церелоза 10 граммов крахмала 10 граммов - амина 4 граммов пивных дрожжей 4 граммов сульфата аммония 4 граммов хлорида натрия 4 граммов карбоната кальция 4 грамм Дистиллированная вода до 1000 куб.см. , , 10 10 - 4 ' 4 4 4 4 1000 . - амин — сыпучий пептон в виде порошка, полученный перевариванием казеина поджелудочной железой. - - . Через 82 часа в образце проферментированной культуральной среды было проанализировано 167 единиц очистки на миллилитр. 75 джина и солей. Анализы на стрептолидигин были получены с помощью иллюстративной турбидиметрической процедуры, проводимой следующим образом: -' 82 167 75 : истолкованный как 6057, выращивают на питательном агаре и переносят каждую неделю в новый образец питательного агара. Каждый день осуществляется перенос 80 тигина в десять миллилитров (лилитр зарегистрированной торговли ) для инфузии мозга и сердца () и литры инокулированной среды инкубируют в течение примерно семнадцати часов на водяной бане, поддерживаемой при температуре 37 градусов по Цельсию. Оптическая плотность () культуры () массой 85,7,5 грамма затем составляет от примерно 30 до примерно 35 при 650 МТ (с использованием 2,5 грамма производства ., Нью-Йорк, Нью-Йорк) Инокулят составляет 1,5 милли5,0 грамма литра культуры (с оптической плотностью 90, равной 3,0 при 650 мт) в 100 миллилитрах 1000 куб.см в двойном объеме. прочность стерильного мозгового сердечного настоя, т. е. концентрация твердых веществ увеличена вдвое. 6057 , 80 ( ) () 37 85 7.5 ( ) 3 0 3 5 650 ( 2.5 ;, , ) 1 5 milli5.0 ( 90 3 0 650 ) 100 1000 , , . После приготовления различных разведений кристаллического антибиотика с температурой 121 градус в стерильном бульоне, в том числе 95 после охлаждения, подходящих контролей, бульоны инокулируют и затем инкубируют в воде в течение периода от обычных четырех до четырех с половиной часов в воде. ванну поддерживают при температуре 37 градусов. 72 часа при температуре по Цельсию. Анализ завершается, когда оптическая плотность материала в контрольной четырехмиллиметровой пробирке при 100 легри-санти находится в диапазоне от 3,0 до 3,2 мит. Рост был остановлен добавлением одного капля МЕРКРЕСИНА 500-милилитр смеси, состоящей из равных весовых частей 100-миллилитров вторичных амилтрикрезолов, 105 (), ,(:): 7, граммов граммов и о-гидроксифенилртутной хлорида, граммов граммов ,, ) миллилитры 00 см3 в каждую пробирку. Регистрируют оптическую плотность при 650 мт и рассчитывают потенции по 110, выдерживаемым в автоклаве, по стандартной кривой, полученной путем построения оптического градусного графика для плотности дозы антибиотика. Стандарт. Точки кривой колб: определяется по росту, полученному в при наличии 0, 0, 25, 0, 5, 1 0, 2 0, 4 0, 8 0, норме 16, 32 и 64 мкг/мл стрептолия 115 после периода дигинации. Чистая форма. Исходный раствор готовят путем ферментации путем растворения пятидесяти миллиграммов фекальных единиц антибиотика в достаточном количестве этанола для получения раствора и доведения объема до пятидесяти миллилитров путем повторного добавления 0,1 молярного фосфатного буфера при температуре 120. Среда: рН 7. 4. 121 , 95 , , - 37 72 100 3 0 3 2 500- 100- , 105 (), ,(:): 7, - , ,, ) 00 650 110 0, 0 25, 0 5, 1 0, 2 0, 4 0, 8 0, 16, 32 64 115 0 1 120 : 7 4. минут при пятидесяти градусах Цельсия. При хранении при комнатной температуре и при 65, равном 2,0, антибиотик (в форме кислоты) разрушается. Он теряет пятьдесят процентов своей активности при , равном 5,0, при хранении при при комнатной температуре в течение двух часов и полностью разрушается за 24 часа. При , равном 10, антибиотик 70 стабилен в течение 112 часов при комнатной температуре. 65 2 0, ( , ) , 5 0 24 10, 70 112 . Свободная кислота практически нерастворима в воде или разбавленных минеральных кислотах (< 1 мг/мл); натриевая соль очень растворима в воде. Свободная кислота 75 и ее соли хорошо растворимы в обычных полярных органических растворителях, таких как этилацетат, амилацетат, диэтиловый эфир, ацетон, этанол, диметилформамид, метиленхлорид, хлороформ, метанол, бутанол, и 80 этилендихлорид. (< 1 /); 75 , , , , , , , , , , 80 . Анализ стрептолидигина (кислотная форма) указывает на предварительную эмпирическую формулу C1, 470, и молекулярную массу 615. ( ) ,, 470,, 615. ПРИМЕР 3 85 3 85 Выделение стрептолидигина. Десять тысяч галлонов ферментационного бульона с 6,5 и анализом приблизительно 135 мкг/мл ( ) фильтровали с использованием вспомогательного фильтрующего средства. Отфильтрованный бульон культуры 90 доводили до а, рН 7,5 и экстрагировали. с 1/5 объема метиленхлорида. Экстракт растворителя осветляли, пропуская через сепаратор Де Лаваля, а затем осветленный материал концентрировали до тяжелого сиропа с плотностью 95%. При перемешивании концентрат добавляли к пяти объемам , таким образом осаждая антибиотик в форме соли. Осадок фильтровали и сушили в вакууме. Получали 4277 граммов антибиотика с активностью 700 мкг/мг (турбидиметрический анализ ). 6 5 135 / ( ) 90 , 7 5 1/5 95 ' , 100 4277 700 / ( ). 4050 Грамм полученной таким образом сырой соли растворяли в метиленхлориде и раствор 105 суспендировали с восемью литрами цитратного буфера при рН 3,95. Слой растворителя декантировали и буферный слой экстрагировали двенадцатью литрами метиленхлорида. Растворитель слой, содержащий антибиотик 110, и экстракт объединяли и концентрировали в вакууме досуха. Получали 3062 грамма неочищенного антибиотика в форме свободной кислоты. Полученный таким образом продукт растворяли в 168 литрах смеси растворителей 115, содержащей один часть ацетона на три части . Верхнюю фазу, содержащую антибиотический материал, концентрировали в вакууме. Получали 1383 грамма частично очищенного антибиотического материала. Продукт 120 растворяли в 8,0 литрах ацетона, а затем в 4,5 литрах воды. был добавлен к нему. 4050 105 3 95 110 ' 3062 168 115 ' 1383 , 120 8 0 4 5 . Полученный раствор охлаждали до четырех градусов по Цельсию и затем фильтровали. Было получено 816 граммов кристаллического стрептолия 125 дигина в форме свободной кислоты, обладающего биологической активностью 1145 мкг/мг (. 816 125 1145 / (. турбидиметрический анализ) и плавление. ПРИМЕР 2 ) 2 Получение и выделение стрептолидигина. Споры , полученные из скошенного казеинкрахмального агара, использовали для инокуляции 500-миллилитровой колбы, содержащей 100 миллилитров следующей стерильной посевной среды: , 500 100 : Церелоза 20 грамм (зарегистрированная торговая марка) Соевый шрот 10 грамм, пивные дрожжи 2 5 грамм Сульфат аммония 5 грамм Хлорид калия 3 грамма Карбонат кальция 4 грамма Довести объем воды до 1100 куб.см. 20 ( ) 10 , ' 2 5 5 3 4 , 1100 . Колбу встряхивали на качалке возвратно-поступательного действия при температуре 28 градусов по Цельсию в течение 48 часов. Двенадцать литров стерильной среды А в 25-литровой бутыли ферментера из нержавеющей стали инокулировали 25 миллилитрами среды А. , 28 48 25- 25 . Бутылку инкубировали при температуре 28 градусов по Цельсию в течение 48 часов. В течение этого времени культуру перемешивали и аэрировали со скоростью шесть литров воздуха в минуту. Это была посевная среда. 28 48 , '. 240 В литры стерильной среды А в ферментерном резервуаре из нержавеющей стали емкостью 100 галлонов инокулировали двенадцать литров семян, полученных, как описано выше. Ферментацию поддерживали при температуре 28 градусов по Цельсию и перемешивали с помощью закрытой крыльчатки с перегородкой для вытяжной трубы. Пропеллер вращался со скоростью 280 об/мин. Воздух подавался со скоростью 200 кубических футов в час. 240 100gallon 28 , 280 200 . Через 91 час 283-литровую аликвоту пива фильтровали и экстрагировали при 30 семьюдесятью литрами дихлорида метилена. Экстракты перемешивали с 35 литрами воды, которой доводили до 7. дихлорид удаляли вакуумной перегонкой и водный концентрат лиофилизировали с получением 85 граммов стрептолидигина с анализом 410 микрограммов/мг. 91 , 283- 3 35 which_ 7 - 85 410 /. (Турбидиметрический анализ ) Материал ( ) Полученный таким образом продукт дополнительно очищали обработкой, включающей подкисление серной кислотой до 2,5, экстракцию этилендихлоридом, сушку экстракта над сульфатом магния и концентрирование экстракта путем вакуумной перегонки. Остаточное масло растворяли в этиловом эфире и осаждали . Было получено 23,5 грамма очищенного материала в виде свободной кислоты с анализом 825 микрограмм/мг (. 2 5, , , 23 5 825 / (. турбидиметрический анализ) и плавятся при температуре от 137 до 139 градусов по Цельсию. ) 137 139 . Свободная кислота стабильна при четырех градусах Цельсия в течение не менее четырех месяцев. Теряет половину своей активности при хранении в пятидесятипроцентном растворе этанола в течение одной недели при температуре 25 градусов Цельсия. Антибиотик полностью разрушается под действием 1 н. серной кислоты за пять месяцев. минут при пятидесяти градусах Цельсия и стабилен в 1 гидроксиде натрия в этаноле в течение тридцати 779 570 79 пунктов при температуре от 147 до 148 градусов Цельсия. 25 1 1 779,570 79 147 148 . Кристаллическая свободная кислота стрептолидигина теряет двойное лучепреломление при 110 градусах и плавится при температуре от 144 до 150 градусов по Цельсию. Характеризуется оптическим вращением -2-, от минус 64 градусов до минус 67 градусов (с, два процента в 0,005 н. гидроксиде калия в 95-процентном этаноле). ), минус 93 градуса (с, 1 6 процентов в хлороформе), минус 76 градусов (с, 1 78 процентов в диоксане). 110 144 150 -2-, 64 67 (, 0.005 95 ), 93 (, 1 6 ), 76 (, 1 78 ). На прилагаемых рисунках Фиг.1 иллюстрирует ультрафиолетовый спектр поглощения стрептолидигина в 1 спирте серной кислоты; На рис. 2 показан ультрафиолетовый спектр поглощения стрептолидигина в 01 спиртовом гидроксиде калия; Фигура 3 иллюстрирует инфракрасный спектр поглощения свободной кислоты стрептолидигина; Фигура 4 иллюстрирует инфракрасный спектр поглощения натриевой соли стрептолидигирна; Фигура 5 иллюстрирует инфракрасный спектр поглощения калиевой соли стрептолидигина, а фигура 6 иллюстрирует инфракрасный спектр поглощения кальциевой соли стрептолидигина. 1 1 ; 2 01 ; 3 ; 4 ; 5 6 . При использовании кварцевого спектрофотометра , модель или записывающего спектрофотометра Кэри, кристаллическая свободная кислота стрептолидигина имеет следующие ультрафиолетовые спектры: , , , : В 01 этанольном растворе гидроксида калия (показано на рисунке 2). 01 ( 2). Максимум 261 , = 223 6 291 , ' = 270 7 336 ?, % ' = 331 Перегиб 302 , 10 % ' 248 4 Минимум 230 ,, = 77 1 270 , "% = 212 2 311 М/л, ,, '-= 231 9 В 01 этанол серной кислоты (показано на рисунке 1). 261 , = 223 6 291 , ' = 270 7 336 ?, % ' = 331 302 , 10 % ' 248 4 230 ,, = 77 1 270 , "% = 212 2 311 /, ,, '-= 231 9 01 ( 1). Максимум 234 Ма, Эл,,)% = 139 1 357 5 , Элам 1 _= 590 5 370 М/год, Элом х% = 560 3 Перегиб 295 Мат, Эл см = 127 8 309 5 , = 17 4 342 , % = 455 3 Минимумы 264 , = 39 3 366 , ' 1 = 557 8 Инфракрасный спектр поглощения, рис. 3, (призма хлорида натрия) кристаллической свободной кислоты стрептолидигина в суспензии минерального масла показывает отдельные полосы, выраженные в обратных сантиметрах, примерно при 3550, 3400 и 3280, характерные для групп или . Широкое общее поглощение простирается примерно до 2500 и характерно для групп или с водородными связями. Полоса при 3070 характерна для этиленовых или ароматических групп -. группы Спектр дополнительно показывает выраженные полосы при 1700, 1643, 1615 и 1550, которые, вероятно, происходят от карбонильных групп (карбоксила и амида) и сопряженных углерод-углеродных двойных связей. Дополнительные характеристические полосы встречаются по всему спектру; некоторые из них являются относительно заметными полосами на 1233, 1204, 1069, 1035 и 976. 234 , ,,)% = 139 1 357 5 , 1 _= 590 5 370 /, % = 560 3 295 , = 127 8 309 5 , = 17 4 342 , % = 455 3 264 , = 39 3 366 , ' 1 = 557 8 , 3, ( ) , , 3550, 3400 3280 2500 - 3070 - 1700, 1643, 1615 1550 ( ) - ; 1233, 1204, 1069, 1035 976. Свободная кислота стрептолидигина, полученная по этому примеру, обладает следующими свойствами: , , : Межплоскостное расстояние 16,35 А 12,80 10,39 8,22 2 ( ,) 5,40 6,90 8,50 10,75 Межплоскостное расстояние 6,88 6,25 5,77 5,08 4,67 4,27 3,95 2 ( ,) 12,85 14,15 15. 35 17,45 19,00 20,75 22,50 Данные рентгеноструктурного анализа получены методом порошковый метод с использованием дифракционной установки Пикера-Уэйта с медным Ка-излучением с никелевым фильтром. 16.35 12.80 10.39 8.22 2 ( ,) 5.40 6.90 8.50 10.75 6.88 6.25 5.77 5.08 4.67 4.27 3.95 2 ( ,) 12.85 14.15 15.35 17.45 19.00 20.75 22.50 - - - , . Оптические кристаллические свойства: : Кристаллическая система: орторомбическая Габитус кристалла: игольчатый Оптический знак: отрицательный Дисперсия: крайняя > Показатели преломления: = 1 502 + 0 002, = 1 587 + 0 002 и = 1 669 + 0 002 Оптическая ориентация: = , Следующие результаты были получены в исследованиях по определению структуры свободной кислоты стрептолидигина: : : : : > : = 1 502 + 0 002, = 1 587 + 0 002 = 1 669 + 0 002 : = , : 779,570 Положительный Положительный Отрицательный Нет запаха аммония или амина Полный гидролиз за 10 минут Положительный Отрицательный Отрицательный Положительный Отрицательный Отрицательный Отрицательный Конечная точка плавления, но обугливается при температуре выше 100 градусов по Цельсию. Материал характеризуется положительной пробой на хлорид железа, биологически неактивен ( турбидиметрический анализ) и имеет слабое поглощение в ультрафиолетовой области с максимумами при 255 МИА, '% = 195 и 290 , 1 % = 168. 779,570 , 10 100 , ( ), 255 , '% = 195 290 , 1 % = 168. Хлорид железа Йодоформ Бромная вода Сильная щелочь ( 10 % ) Минеральная кислота ( 60 , 1 1) Бром в четыреххлористом углероде Фебилинг (модификация Бенедикта) Молиш Трихлорид титана Тест на эндиолы и енолы 1,3-дикетонов Восстановление 2 ,6-дихлорфенолиндолфенол Биурет-нингидрин Анальный расчет для C1,3 4709 2: , 64 39; Н, 7,64; Н, 4 55; 4 -,, 9 93 Найдено: , 64 29; Н, 7 68; Н, 4 70; С-СН,, 9,5. ( 10 % ) ( 60 , 1 1) ' (' ) 1,3diketones 2,6- ,,3 4709 2: , 64 39; , 7.64; , 4 55; 4 -,, 9 93 : , 64 29; , 7 68; , 4 70; -,, 9,5. При обработке 200 миллиграммов свободной кислоты стрептолидигина бромом в четыреххлористом углероде (приблизительно 150 миллиграммов брома) получают миллиграммы светло-желтого продукта присоединения. С, 46 26; Н, 5 49; Н, 3 27; Бр, 29 20. 200 ( 150 ), : ,, 40, 2 ,: , 46 26; , 5 49; , 3 27; , 29 20. Найдено: С, 47–82, 47–63; Н, 5 61, 5 79; Н, 3 40, 3 66; Бр, 29 25,29 18. : , 47 82, 47 63; , 5 61, 5 79; , 3 40, 3 66; , 29 25,29 18. ПРИМЕР 4 4 Приготовление натриевой соли стрептолидигина Один грамм стрептолидигна (кислотная форма) (пример 2) растворяют в десяти миллилитрах этанола. Добавляют 5 миллилитров 1 гидроксида натрия и девяносто миллилитров воды, чтобы довести раствора до 9. Затем раствор подвергают лиофилизации. Получают 900 миллиграммов порошка желтовато-желтого цвета, характеризующегося растворимостью в воде, этаноле и хлороформе и биологической активностью (турбидиметрический анализ ) 1000 микрограмм на миллиграмм. ( ) ( 2) 1 5 1 9 0 - 900 - , , ( ) 1000 . Ультрафиолетовый спектр поглощения натриевой соли стрептолидигина характеризуется следующим образом: : В 0 01 спиртовом гидроксиде калия наблюдаются максимумы 261 мк, Еом 1 %= 201 3, 291 МП, Элом '%= 243 1 и 335 Мп, Е 1 ом) %= 291 7. 0 01 , 261 , 1 %= 201 3, 291 , '%= 243 1 335 , 1 ) %= 291 7 . Спектр инфракрасного поглощения (призма хлорида натрия) (показан на рисунке 4) натриевой соли стрептолидигина в суспензии минерального масла показывает сильное поглощение, выраженное в обратных сантиметрах, при 3350, характерное для групп и/или . Широкий поглощение в диапазоне от 1665 до 1595 характерно для карбонильных групп и сопряженных углерод-углеродных двойных связей. По всему спектру появляются дополнительные характеристические полосы; некоторые из этих полос находятся на 1257, 1202, 1153, 1130, 1110, 1070, 1036, 1017, 998, 927, 850 и 713. ( ), ( 4) , , , 3350, / 1665 1595 - ; 1257, 1202, 1153, 1130, 1110, 1070, 1036, 1017, 998, 927, 850 713. ПРИМЕР 5 5 Приготовление калиевой соли стрептолидигина. 500 миллиграммов стрептолидигина (пример 2) растворяют в десяти миллилитрах этанола. Добавляют 100 миллилитров воды и доводят раствора до 7,8 добавлением 1 гидроксида калия. Раствор фильтруют и лиофилизируют. Получают 400 миллиграммов калиевой соли стрептолидигина. Продукт растворим в воде, спирте и метиленхлориде и имеет биологическую активность ( ) 1036 микрограммов на миллиграмм, сравнимую с активностью свободная кислота. 500 ( 2) 100 7 8 1 - 400 , ( ) 1036 , . Спектр инфракрасного поглощения (призма хлорида натрия), показанный на рисунке 5, калиевой соли стрептолидигина в суспензии минерального масла показывает сильное поглощение, выраженное в обратных сантиметрах, при 3340, что характерно для групп и/или . Широкое поглощение в диапазоне от 1655 до 1590, вероятно, обусловлено карбонильными группами и группами =. Дополнительные характеристические полосы встречаются по всему спектру; некоторые из них являются относительно заметными полосами на 1260, 1204, 1152, 1130, 1118, 1071, 1038, 1015, 998, 930, 853 и 713. ( ), 5, , , , , 3340 / 1655 1590 = ; 1260, 1204, 1152, 1130, 1118, 1071, 1038, 1015, 998, 930, 853 713. ПРИМЕР 6 6 Приготовление кальциевой соли стрептолидигина. 500 миллиграммов стрептолидигина (пример 779,570 2) растворяют в десяти миллилитрах этанола. 500 ( 779,570 2) . Добавляют десять миллилитров воды и раствора доводят до 80 добавлением гидроксида кальция. Затем раствор замораживают. Получают 491 миллиграмм кальциевой соли стрептолидигина. Продукт растворим в спирте и м. :тиленхлорид, нерастворимый в воде и обладающий биологической активностью (турбидиметрический анализ ) 967 микрограммов на миллиграмм, что сравнимо с активностью свободной кислоты. 8 - 491 : , ( ) 967 , . Спектр инфракрасного поглощения (призма хлорида натрия), показанный на рисунке 6, кальциевой соли стрептококка Глидигина в суспензии минерального масла показывает сильное поглощение >, выраженное в обратных сантиметрах, при 3380, характерное для и/. Группы Поглощение в диапазоне между 1655 и 1590 характерно для карбонильных групп и сопряженных двойных изгибов углерод-углерод. Дополнительные характеристические полосы появляются во всем спект