Обзорная окраска гистологических препаратов
Пешков М.В. Патологоанатомическое бюро Таганрог 2013
Обзорная окраска гематоксилином и эозином
Обязательный компонент для гистологического исследования любого уровня.
Общая схема окраски
Удаление парафина (депарафинирующий раствор Блик 3 х 3 мин) Удаление депарафин. раствора (дегидратант Блик 4 х 2 мин)
Промывка в дистиллированной воде Гематоксилин регрессивный Блик(3-5 мин)
Дифференцировка и подсинивание ядер
Промывка в деионизированной воде Эозин водно-спиртовый Блик (30 сек – 3 мин) Обезвоживание (дегидратант Блик 4 х 3 мин)
Просветление (ксилол 2 х 1 мин) Заключение в синтетическую среду ПС-Блик
Источник гематоксилина
Цветы
Haematoxylon campechiana
Древесина на разрезе
Коммерческие
продукты
http://waynesword.palomar.edu/ecoph4.htm
Haematoxylum campechianum
http://en.wikipedia.org/wiki/Logwood
Требования к современному раствору гематоксилина
Доступность и минимально разумная цена компонентов
Постоянный состав
Максимальный срок работы
Простота и удобство приготовления
Безопасные составляющие
Стабильная рН
Варианты квасцовых гематоксилинов
Anderson, Apathy, Baker, Bennett, Bosma, Bullard, Cole, Debiden, de Groot, Carazzi, Delafield, Ehrlich, Friedlander, Gadsdon, Gage, Galigher, Garvey, Gill, Graham, Hamilton, Harris, Harris & Power, Haug, Hine, Horneyold, Krutsay, Langeron, Launoy, Lillie, Lee, Lugol, McLachlan, Martinotti, Mallory, Mann, Masson, Mayer, Molnar, Papamiltiades, Pusey, Rawitz, Reddy, Sass, Schmorl, Slidders, Unna, Watson, Weigert & Wright.
Дифференцирующие растворы
1% соляная кислота на 70% спирте
0.25-0.5% водная соляная кислота
1% уксусная кислота
5% алюмокалиевые квасцы
Промывка: 3 смены проточной воды х 2-3 минуты
Подсинивание ядер
Цвет водного раствора гематоксилина в зависимости от рН
5.0 – 6.0 Цвет готового красителя в зависимости от рН
6.0 – 7.0
Растворимый Нерастворимый
Dakocytomation
Education Guide Special Stains and H&E 2nd Edition
р. 122.
Подсинивающие растворы
Аммиачная вода (1- капля на 100 мл)
0.2 % раствор соды
Кусочки мрамора в воде
Буфер с рН 7-7.4 (фосфатный или др.)
Водопроводная вода с рН около 7
Вода Scott (1% сернокислый магний + 0.2% сода)
0.05% углекислый литий