2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / основы_частной_микробиологии_методичка
.pdfгических моделей (куриных эмбрионов, лабораторных животных, культуры клеток).
Лечение и профилактика
Наиболее эффективны для лечения антибиотики широкого спектра действия – группы тетрациклина, макролиды, левомицетин.
Профилактические мероприятия многоплановы. Они включают: улучшение социально-бытовых условий жизни, борьбу с вшивостью, повышение социальной культуры населения, специфическую профилактику.
Вакцинация проводится по эпидемическим показаниям. В настоящее время используют:
•химическую сыпнотифозную вакцину из поверхностного антигена R. Prowazekii;
•живую вакцину из штамма Е R. prowazekii.
121
Глава 9. ХЛАМИДИЙНЫЕ ИНФЕКЦИИ
Общая характеристика хламидий
Хламидии, название которых произошло от chlamydia – мантия, являются облигатными внутриклеточными паразитами, возбудителями острых и хронических инфекционных процессов млекопитающих и птиц, протекающих с поражением различных органов и систем (органов дыхания, зрения, ЦНС, сер- дечно-сосудистой системы, опорно-двигательного аппарата, урогенитальной и других систем). Они были выявлены С. Провачеком и Л. Гальберштедтером (1907 г.) у больных трахомой.
Хламидии включены в порядок Chlamydiales, семейство Clamydiaceae, в котором выделено 2 рода: род Chlamydia и род Clamydophila. Роды различаются по морфологии, антигенной структуре, чувствительности к ним лабораторных животных и наличием гликогена в цитоплазматических включениях. Гликогеновые включения выявлены только у представителей рода Chlamydia. Патогенные для человека и животных виды представлены C. trachomatis (род
Chlamydia), C. psittaci, C. pneumoniae, C. pecorum (род Clamydophila).
Морфология и циклы развития
Хламидии – грамотрицательные неподвижные микроорганизмы. В клетках содержат ДНК и РНК, имеют клеточную стенку и цитоплазматическую мембрану. Спор и капсул не образуют. У них уникальный, жизненный цикл развития, который протекает в цитоплазматическом включении (мантии) внутри клетки-хозяина. В этом цикле выделяют следующие формы развития:
•элементарное тельце (ЭТ) – инфекционная (заразительная) форма. Имеет овоидную форму, мелкие размеры, ри-
122
гидную клеточную стенку. Нуклеоид богат ДНК, расположен эксцентрично. Метаболизм резко снижен. ЭТ проникает в клетку-хозяина путем эндоцитоза, нарушают слияние фагосомы и лизосом и остаются окруженными фагосомной оболочкой как мантией. По Романовскому– Гимзе окрашиваются в красный цвет. В пораженных клетках и вне них образуют скопления в виде «тутовых ягод». Выход ЭТ сопровождается гибелью клеткихозяина. Эти формы адаптированы к внеклеточному выживанию;
•ретикулярное (инициальное) тельце (РТ) – вегетативная,
размножающаяся бинарным путем, форма. Клетки более крупные, чем ЭТ, размером 1,0х1,5 мкм. Окрашиваются по Романовскому–Гимзе в голубой цвет. Эта форма не является инфекционной, не устойчива при хранении;
•промежуточное (переходное) тельце (ПТ) – форма
трансформации в основные ЭТ и РТ. Продолжительность цикла развития хламидий состав-
ляет 40–72 ч. В одной клетке может быть несколько хламидийных включений.
Цитоплазматическое включение внутри клетки хозяина представляет собой разнородную популяцию микроорганизма, состоящую из вышеперечисленных форм паразита. В процессе цикла развития хламидии используют ферментные системы клетки-хозяина, так как сами не могут синтезировать высокоэнергетические соединения (АТФ, НАДФ и др.) и обеспечивать собственные энергетические потребности.
В неблагоприятных для хламидий условиях (неадекватная терапия, дефицит питательных веществ и др.) они образуются L-формы, не чувствительные к действию антибиотиков.
На питательных средах хламидии не размножаются. Их выращивают в желточном мешке куриных эмбрионах (6– 7-дневных), в культурах клеток (HeLa, СОЦ, McCoy-клетки с пониженной метаболической активностью и др.).
123
Вне организма человека (животного) хламидии быстро погибают. При комнатной температуре их жизнеспособность нарушается через 24–36 ч, при 70°С – через 10–15 мин., при 100°С – практически мгновенно. Они высокочувствительны к высушиванию, действию УФЛ и дезинфицирующих веществ в обычных концентрациях. Размножение хламидий ингибируется антибиотиками широкого спектра действия (тетрациклином, олеандомицином, эритромицином и др.). Отмечается устойчивость к стрептомицину, мономицину, ристомицину. Под влиянием пенициллина образуются L-формы.
Антигенная структура и факторы патогенности
Все хламидии имеют общий родоспецифический антиген, локализованный в клеточной стенке и представленный термостабильным слабоиммуногенным ЛПС. Белковые термолабильные фракции обеспечивают видо- и сероспецифичность. У C. trachomatis на основе этих антигенов выделяют 18 сероваров.
Все виды хламидий патогенны, но различаются по степени вирулентности. Белки клеточной стенки обеспечивают адгезию к чувствительным клеткам и антифагоцитарную активность путем блокировки фагосомо-лизосомального слияния. ЛПС клеточной стенки выполняет функцию эндотоксина. Экзотоксином являются термолабильные белки, которые вызывают гибель мышей и нейтрализуются антисывороткой.
Эпидемиология, патогенез, клинические проявления, иммунитет
В зависимости от источников инфекции все хламидиозы делятся на две группы – зоонозные, при которых возбудитель передается человеку от инфицированных птиц и животных контактным, воздушно-пылевым (аэрогенным)
124
или алиментарным путем, и антропонозные – первичные патогены человека. Заражение человека представителями этой группы происходит контактным, контактно-половым, воз- душно-капельным путями. Восприимчивость человека к патогенным хламидиям очень высока.
Возбудителями зоонозных хламидиозов являются:
–C. psittaci (от греч. psittac – попугай), этиологический агент орнитоза (от греч. ornica – птица), артритов, гастроэнтеритов, менингоэнцефалитов;
–C. pecorum, вызывающая генерализованный хламидиоз.
Возбудителями антропонозных хламидиозов являются:
–C. pneumoniae, вызывающая респираторные заболевания и поражения сердечно-сосудистой системы (атеросклероз, коронарная болезнь, эндокардиты, тромбозы, эмболии и др.);
–C. trachomatis, первично патогенный вид для человека, различные серовары которого вызывают определенные нозологические формы болезней. К ним относятся:
•трахома (от греч. trachys – неровный, шероховатый), при которой поражаются роговая оболочка и конъюнктива глаз с образованием фолликулов (трахоматозных зерен). Изъязвление этих зерен приводит к рубцеванию и потере зрения. Болезнь характеризуется эндемичностью и распространена в развивающихся странах, где болеют более 400 млн человек, а 20 млн уже потеряли зрение. Эту болезнь вызывают серовары A, B, Ba, C;
•паховый (венерический) лимфогранулематоз (климатиче-
ский бубон), обусловлен сероварами L1, L2, L3. Болезнь встречается у жителей жарких стран. Характеризуется воспалением паховых лимфоузлов с образованием язв, генерализацией процесса в отдаленные периоды с последующим формированием тяжелого фистульно-спаечного процесса промежности;
125
•хламидийная урогенитальная инфекция (УГИ) – венери-
ческое поражение мочеполовой системы, занимающее по частоте распространения второе место после гонореи. Заражение детей при родах от больных женщин приводит к развитию конъюнктивита новорожденных с включе-
ниями, пневмонии или гастроэнтерита. У лиц с дефектами
иммунной системы возможно развитие болезни Рейтера, проявляющейся уретритом, конъюнктивитом и артритом. В развитии перечисленных инфекций основную роль играют серовары от D до K.
Напряженность и длительность иммунитета при различных хламидиозах неодинакова. После перенесенного пахового лимфогранулематоза формируется стойкий продолжительный иммунитет, обусловленный гуморальными факторами. Во всех остальных случаях иммунитет не обеспечивает надежной защиты от повторных заболеваний.
Микробиологическая диагностика
Микроскопический метод используют для обнаруже-
ния цитоплазматических включений хламидий в эпителиальных клетках материала от больных, окрашенных по Рома- новскому–Гимзе. Эти включения обычно расположены около ядра пораженной клетки, имеют округлую или шлемовидную («шапочка жандарма») форму. ЭТ окрашиваются в красный, а РТ – в сине-фиолетовый цвет. Включения гликогена могут быть обнаружены только у C. trachomatis путем окраски препаратов раствором Люголя. Они имеют вид красно-коричневых включений на фоне светло-желтого цвета самих клеток. Лучшие результаты дает использование РИФ с моноклональными антителами (разработаны коммерческие тест-системы).
Наиболее доказательным является метод культивиро-
вания хламидий в культурах клеток in vitro («золотой стан-
126
дарт»). Несколько худший результат дает культивирование в желточном мешке 6–8-дневных куриных эмбрионов.
Выявление антител успешно применяют при тяжелых воспалительных процессах, УГИ, пневмонии новорожденных. Используют РНИФ, РСК, РТГА, коммерческие тестсистемы для ИФА.
В последние годы широко применяются молекулярнобиологические методы, основанные на обнаружении хламидийной ДНК (спот-гибридизация, сэндвич-гибридизация, гибридизация in situ и др.).
Лечение и профилактика
Лечение проводят антибиотиками широкого спектра действия. Хорошие результаты дают прапараты тетрациклиновой группы, цефалоспорины 2-го и 3-го поколения и др. Следует помнить, что при назначении пенициллина хламидии переходят в L-формы и становятся резистентными к любым антибиотикам в течение 1–2 мес.
Специфическая профилактика не разработана.
127
Глава 10. ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ
10.1. ГЕРПЕСВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ
Общая характеристика вирусов герпеса
Возбудители герпесвирусных инфекций относятся к семейству Herpesviridae (от греч. herpes – ползучий), которое подразделяется на 3 подсемейства: Alphaherpesvirinae, Betaherpesvirinae и Gammaherpesvirinae. Это крупные ДНК-
содержащие вирусы сферической формы, состоящие из нуклеотида, капсида и суперкапсида. Геном представлен двунитевой линейной ДНК, состоящей из ковалентно связанных короткого и длинного фрагментов, на концах которых расположены повторяющиеся нуклеотидные последовательности. Наличие таких повторов, которые могут менять свои позиции, приводит к мутациям. При репликации ДНК наблюдается так называемая ДНК-изомерия. Капсид имеет форму икосаэдра и состоит из 162 белковых капсомеров. Суперкапсид состоит из двойного липидного слоя с гликопротеиновыми шипами на поверхности.
Воспроизведение вируса начинается с его прикрепления к рецепторам клетки, после чего его оболочка сливается с клеточной мембраной и освобождается нуклеокапсид. Следующий этап – проникновение нуклеокапсида в ядро клетки и его депротеинизация. Затем происходит транскрипция вирусного генома и перемещение образовавшихся иРНК в цитоплазму. Далее синтезируются «ранние» белки, участвующие в репликации геномной ДНК вируса, а также «поздние» структурные белки (простые и сложные гликопротеиды). Капсид окружает вирусную ДНК и выходит из клетки путем почкования через участки ядерной мембраны клетки. При этом нуклеокапсид покрывается внешней оболочкой (суперкапсидом).
128
Вирусы герпеса малоустойчивы во внешней среде. Они быстро разрушаются под действием органических растворителей, протеолитических ферментов, детергентов, ультразвука, УФ-облучения, инактивируются при температуре 50˚С через 30 мин. Более длительно сохраняются при понижении температуры. На поверхности различных предметов герпесвирусы сохраняют жизнеспособность 2–6 ч в зависимости от консистенции материала, из которого они изготовлены (металл, стекло, дерево и др.), и условий влажности окружающей среды.
Герпесвирусы культивируются в первичных и перевиваемых культурах клеток, в хорионаллантоисной полости куриных эмбрионов и в организме лабораторных животных. В пораженных клетках цитопатический эффект проявляется в виде образования гигантских многоядерных клеток (симпластов), телец включения.
Антигенная структура герпесвирусов представлена типоспецифическими гликопротеинами внешней оболочки и группоспецифическими белками нуклеокапсида.
Герпесвирусы различных подсемейств вызывают ряд заболеваний, отличающихся, прежде всего, по клиническим проявлениям. Так, вирусы, относящиеся к подсемейству Alphaherpesvirinae, являются возбудителями простого герпеса 1-го и 2-го типа, ветряной оспы и опоясывающего лишая. К Betaherpesvirinae относится цитомегаловирус, вызывающий цитомегалию человека и мышей. Представитель подсемейства Gammaherpesvirinae – вирус Эпштейна–Барра служит причиной инфекционного мононуклеоза, лимфомы Беркитта, саркомы Капоши.
129
10.1.1. ВИРУСЫ ПРОСТОГО ГЕРПЕСА
Заболевания вызывают вирусы герпес человека 1-го и 2-го типа (ВГЧ-1 и ВГЧ-2).
Эпидемиология, патогенез, клинические проявления, иммунитет
Источником инфекции являются больные люди и носители. Есть данные о том, что в настоящее время инфицированность населения земного шара близка к 100%.
Пути передачи:
–контактно-бытовой (через посуду, игрушки, полотенца и другие предметы). Вирусы передаются также при поцелуях и медицинских манипуляциях (стоматологических, офтальмологических);
–воздушно-капельный (особенно при течении герпесвирусной инфекции в форме острого респираторного заболевания – ОРЗ);
–при прохождении плода по родовым путям;
–половой. Этот путь наиболее характерен для ВГЧ-2, по-
скольку он обладает тропизмом к эпителию половых органов.
Для простого герпеса характерно латентное течение с периодическими рецедивами. Это обусловлено тем, что возбудители способны к длительной персистенции в организме. При этом ВГЧ-1 персистирует в ганглиях тройничного нерва, а ВГЧ-2 – в ганглиях крестцового сплетения.
Инфекция может протекать в нескольких клинических формах. Наиболее характерный признак – везикулезные высыпания на коже в углах и по контуру рта, на крыльях носа и слизистых оболочках ротовой полости, глотки, половых органов. При более тяжелых формах поражаются роговица глаз (кератит), ЦНС (менингиты и энцефалиты). У новорожденных герпетическая инфекция нередко протекает в виде
130