Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Жидкостная цитология

.pdf
Скачиваний:
40
Добавлен:
15.03.2015
Размер:
673.67 Кб
Скачать

Справочник заведующего КДЛ / № 5 май 2009

а)

б)

в)

Рис. 6. Цитосистема на основе цитокамеры с прямыми перпендикулярными каналами: a) цитосистема в сборе; б) варианты цитокамер с прямым каналом; в) фильтр-вставки для различных вариантов цитокамер

и низкоклеточные суспензии). Жидкая проба вносится в цитокамеру, закрепленную на слайде, уже после ее установки в центрифугу. Возможно использование фильтрподложки для осушения рабочей зоны. Недостатком данных систем является потеря клеточного материала в элементах конструкции и соответственно снижение эффективности диагностики. Такие камеры также позволяют получить не более 2 рабочих зон на одном слайде.

Цитокамеры с прямыми каналами (рис. 6) центрифугируют на роторах со свободными съемными горизонтальными цитоподвесками. Одна или две 1-, 2-, 3-, 4-канальные цитокамеры могут быть за-

 

креплены на слайд при помощи специально-

 

 

го основания и винтового или пружинного

 

фиксатора. Во время центрифугирования

 

подвеска с цитокамерой отклоняется на 90°

 

и происходит осаждение клеток на слайд.

 

Технология может быть использована для

а)

любых вариантов цитологического исследо-

вания широкого спектра биоматериалов.

 

Дополнительным преимуществом является

 

возможность проведения в такой системе

 

различных преаналитических операций с

 

клеточными элементами на слайде (дополни-

 

тельная отмывка, удаление эритроцитов,

 

фиксация, последовательное окрашивание,

б)

спиртовая проводка, изолированное введение

разных иммунохимических меток в каждый

 

канал). Ограничением подобной системы

 

Рис. 7. Цитосистема на основе

выступает возможность пассивного осажде-

цитокамер с каналом, расположен-

ния клеток в цитокамере до ее установки

ным под углом к слайду: а) цитосис-

в центрифугу, что может нарушить соотноше-

тема в сборе, б) виды цитокамер

ние клеточных субпопуляций в готовом

с угловым расположением канала

препарате.

39

Оснащение современной лаборатории

Цитокамеры с каналом, расположенным под углом к поверхности слайда (рис. 7), предназначены для роторов со свободными съемными горизонтальными подвесками. Цитокамеры такого типа удобны для получения слайд-препаратов из суспензий фиксированных в объеме и нефиксированных клеток высокой концентрации при малом объеме пробы (препараты тонкоигольной биопсии, ликвор, отпечатки и мазки, фракции клеток, клеточные культуры). Преимуществом их использования является возможность проведения дополнительных операций с пробой прямо в центрифуге, ограничением – одноканальность технологии.

Современный слайд-препарат

для цитологических исследований

Традиционным слайд-препаратом является предметное стекло для микроскопии с расположенными на его поверхности клетками. Оно обладает хорошими оптическими свойствами и устойчиво к воздействию агрессивных химических веществ, которые часто используются при окрашивании и фиксации клеток для цитологического исследования. В силу положительного заряда стекла происходит оптимальное для микроскопии расположение на нем клеточных элементов, имеющих отрицательный заряд мембраны.

Однако стеклянные изделия небезопасны для персонала. Чтобы предотвратить возможные травмы кожи и потенциальное инфицирование персонала, предлагаются варианты предметных стекол со специальной закругленной шлифовкой края или пластиковым футляром в нерабочей части поверхности.

Для нанесения фиксированных клеток используют слайд-препараты из стекла со специальным покрытием, которое усиливает адгезию клеток (типа полилизина). Слайды для автоматизированных исследований часто имеют специальную структуру с выделенной рабочей зоной.

В настоящее время разрабатываются пластиковые одноразовые аналоги предметных и покровных стекол, которые уже нашли применение в новых цитологических технологиях, основанных на использовании люминесцентных и флуоресцентных меток и маркеров. По оптическим характеристикам пластиковые слайды не уступают стеклянным, одновременно они безопаснее в использовании и при утилизации.

При производстве пластиковых слайдов, в отличие от стеклянных, возможно создавать новые конструкции и конфигурации для разных методов исследования. Поверхность пластиковых слайдов может быть модифицирована путем специальной химической обработки для усиления адгезии клеток и даже селективного связывания отдельных клеточных субпопуляций. Создаются также новые оригинальные системы для специальных цитологических методов с несколькими ячейками для исследования, слайды в виде ванночек или планшетов для исследований живых клеток или в виде съемной панели сосуда для культивирования клеток. Пластиковые системы также могут быть сделаны с применением непрозрачных или окрашенных элементов для флуоресцентных или люминесцентных методов детекции, а также с включением стеклянных элементов.

(Продолжение следует)

40