Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

3 курс / Фармакология / Фармакогностическое_изучение_и_перспективы_применения_в_медицине

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
24.03.2024
Размер:
10.15 Mб
Скачать

1 – эпидермис, 2 –хлоренхима, 3 – коровая паренхима, 4 – склеренхима, 5 – эндодерма, 6 – флоэма, 7 – ксилема, 8 – сердцевинная паренхима

Рисунок 8 - Анатомическое строение стебля Filipendula vulgaris. Поперечный срез. Ув. 10х16

По периметру стебля у обоих видов расположен однослойный эпидермис, состоящий из мелких клеток, тангентально-утолщенных клеток у Filipendula vulgaris, а у Filipendula ulmaria почти прямоугольной формы, с более утолщенными наружными стенками. Эти клетки у обоих видов с наружной стороны покрытые кутикулой. У обоих видов под эпидермисом в верхней части стебля залегает зона хлоренхимы, ниже она сменяется коровой паренхимой; проводящая зона отделена откоровым кольцом эндодермы. Центральный цилиндр стебля Filipendula vulgaris состоит из хорошо выраженных пучков, широко-яйцевидной или овальной формы, а Filipendula ulmaria – из крупных сливающими между собой пучков. Пучки у обоих видов коллатеральные, закрытого типа; каждый пучок состоит из тяжа ксилемы с крупными и хорошо выраженными сосудами, а также небольшого тяжа флоэмы; над тяжем флоэмы с наружной стороны размещены участки механической ткани склеренхимы в виде «шапки». Центральная часть в верхней части заполнена клетками сердцевинной паренхимы, в нижней части у Filipendula ulmaria – стебель полый, а у Filipendula vulgaris этот признак отсутствует [143, с. 562].

Лист. Поверхностный препарат.

Эпидермис верхней стороны листа Filipendula ulmaria представлен клетками с прямыми и утолщенными стенками (рисунок 9), с нижней стороны клетки извилистые, которые полностью скрываются под густым войлочным опушением, а у Filipendula vulgaris наоборот - представлен клетками с извилистыми и утолщенными стенками (рисунок 10), с нижней стороны клетки вытянутой формы с прямыми стенками. У обоих видов устьица немногочисленные, расположены преимущественно с нижней стороны листа (гипостоматический тип). Устьица представлены замыкающими клетками бобовидной формы, аномоцитного типа (одно устьице окружено 3-4 клетками эпидермиса одинакового размера и формы) [143, с. 562-563].

51

1 - основные клетки верхнего эпидермиса, 2 - трихомы

Рисунок 9 - Препарат листа Filipendula ulmaria с поверхности. Ув. 16х40

1 – основные клетки эпидермиса, 2 – утолщенные клеточные стенки, 3 – устьица

Рисунок 10 - Препарат листа Filipendula vulgaris с поверхности. Ув. 16х40

С верхней стороны листа у обоих видов наблюдаются немногочисленные простые трихомы, которые хорошо просматриваются по краю пластинки и вдоль жилок (рисунок 11).

1 – простые трихомы

Рисунок 11 - Внешний вид простых трихом листа:

А - Filipendula ulmaria, Б – Filipendula vulgaris. Ув. 16х10

На поперечном срезе листа лабазника обоих видов плоский, дорзовентрального типа (рисунок 12, 13). С обеих сторон лист окружен клетками верхнего и нижнего эпидермиса; клетки почти прямоугольной формы с

52

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

утолщенными наружными стенками, покрыты слоем кутикулы. Мезофилл у Filipendula ulmaria нечетко дифференцирован на столбчатую и губчатую ткани, а у Filipendula vulgaris– хорошо дифференцирован. Столбчатый мезофилл у обоих видов состоит из 2 слоев и расположен с верхней стороны листа, губчатый - мелкоклеточный с нижней стороны, с просветами [143, с. 563].

1 – столбчатый мезофилл, 2 – губчатый мезофилл, 3 – нижний эпидермис, 4 – ксилема, 5 – колленхима, 6 – верхний эпидермис, 7 - трихомы;

А – срез в области средней жилки листа, Б – концевой участок листа

Рисунок 12 - Поперечный срез листа Filipendula ulmaria. Ув. 10х16

1 – нижний эпидермис, 2 – верхний эпидермис, 3 – губчатый мезофилл, 4 – столбчатый мезофилл, 5- флоэма, 6 – ксилема. А - фрагмент центральной части листа в

области средней жилки; Б - фрагмент боковой части листа.

Рисунок 13 - Поперечный срез листа Filipendula vulgaris. Ув. 16х10

Венчик цветка у обоих видов представлен мелкими округлыми клетками эпидермиса со слабо-извилистыми стенками (рис. 14). Хорошо прослеживается жилкование лепестков.

53

1 – основные клетки;

А – Filipendula ulmaria; Б – Filipendula vulgaris

Рисунок 14 - Анатомическое строение венчика цветка Filipendula ulmaria

и Filipendula vulgaris. Ув. 16х10

Нами проведено сравнение микроскопических признаков надземных органов Filipendula vulgaris и Filipendula ulmaria (табл. 5) [143, с. 565].

Таблица 5 - Микроскопические признаки надземных органов Filipendula vulgaris

и Filipendula ulmaria

Показатели

 

Filipendula vulgaris

 

Filipendula ulmaria

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

1

 

 

 

2

 

 

 

3

 

 

 

Верхний

 

Представлен

клетками

с

Представлен

клетками

c

эпидермис листа

прямыми

и

утолщенными

извилистыми

и

утолщенными

 

 

 

стенками.

 

 

 

 

стенками.

 

 

 

 

Нижний

 

Клетки извилистой формы.

Представлен клетками вытянутой

эпидермис листа

 

 

 

 

 

формы с прямыми стенками

 

Тип

устьиц,

Немногочисленные,

 

 

Немногочисленные,

расположены

локализация

 

расположены преимущественно

преимущественно

с

нижней

 

 

 

с нижней

стороны

листа

стороны листа (гипостоматический

 

 

 

(гипостоматический

 

тип).

тип). Устьица аномоцитного типа.

 

 

 

 

Устьица аномоцитного типа.

 

 

 

 

 

Опушение

 

Густое войлочное опушение из

Умеренное опушение из

простых

 

 

 

простых трихом.

 

 

трихом.

 

 

 

 

Тип

листа

на

Плоский, дорзо-вентрального

Плоский, дорзо-вентрального типа.

поперечном срезе

типа,

мезофилл

нечетко

Мезофилл

 

 

хорошо

 

 

 

дифференцирован

 

на

дифференцирован на столбчатую и

 

 

 

столбчатую и губчатую ткани.

губчатую ткани.

 

 

 

 

Форма стебля

на

Округлый, гладкий.

 

 

Округло-лопастной, гладкий.

 

поперечном срезе

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Тип

проводящей

Проводящая

зона

отделена,

Проводящая зона пучкового типа.

системы

 

переходного типа, состоит из

Пучки широко-яйцевидной или

 

 

 

крупных и сливающихся между

овальной формы; коллатеральные,

 

 

 

 

собой

пучков.

Пучки

закрытого типа. По периметру

 

 

 

коллатеральные, закрытые, с

каждый пучок

снабжен

участком

 

 

 

наружной стороны имеют тяжи

склеренхимы в виде «шапки».

 

 

 

 

склеренхимы в виде «шапки».

 

 

 

 

 

54

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Продолжение таблицы 5

1

 

2

 

 

 

3

 

 

Строение

Центральная часть

стебля в

Центральная часть стебля на всем

центральной

верхней

части

 

заполнена

протяжении

заполнена

клетками

части стебля

клетками

 

сердцевинной

сердцевинной паренхимы.

 

паренхимы, в нижней части –

 

 

 

 

 

стебель полый.

 

 

 

 

 

 

Строение клеток

Представлен

 

мелкими

Представлен

мелкими

округлыми

эпидермиса

округлыми

 

 

клетками

клетками эпидермиса

 

со слабо

венчика цветка

эпидермиса

 

со

слабо

извилистыми

стенками.

Хорошо

 

извилистыми стенками. Хорошо

прослеживается

жилкование

 

прослеживается

 

жилкование

лепестков.

 

 

 

 

лепестков.

 

 

 

 

 

 

 

Таким образом, в результате микро-анатомического исследования надземных органов Filipendula vulgaris и Filipendula ulmaria для обоих видов установлены следующие отличительные диагностические признаки:

-для стебля – форма стебля на поперечном срезе, проводящая система переходного типа, наличие полости для нижней части Filipendula ulmaria, а для

Filipendula vulgaris - отсутствие;

-для эпидермиса листа – форма и строение клеток, расположение устьиц преимущественно с нижней стороны, степень и выраженность опушения на нижнем эпидермисе листа;

-для поперечного среза листа – строение мезофилла и форма трихом; -для венчика цветка – форма клеток.

Изучение макро- и микроскопических особенностей надземных частей данных видов, произрастающего на территории Центрального Казахстана, позволило получить сведения, необходимые для идентификации сырья.

55

4 РАЗРАБОТКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ КАЧЕСТВА И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ТРАВЫ FILIPENDULA VULGARIS И ТРАВЫ

FILIPENDULA ULMARIA

4.1 Сравнительное гистохимическое исследование травы Filipendula vulgaris и травы Filipendula ulmaria

Гистохимический анализ позволяет выявлять закономерности процесса секреции биологически активных веществ, наличие определённых групп действующих и сопутствующих веществ или продуктов их метаболизма, так же устанавливать их локализацию в тканях и органах растения [146]. В свою очередь, данные исследования иллюстрируют отличительные особенности метаболизма железистых трихом и тканей различных хемотипов одного вида растения.

Методы и перечень реактивов для проведения гистохимического анализа представлены в подразделе 2.2.

В результате гистохимического анализа было выявлено характерное окрашивание клеток разных типов в результате взаимодействия реактивов с детектируемыми метаболитами.

Определяли: эфирное масло, полисахариды, крахмал, инулин, сесквитерпеновые лактоны, фенольные соединения, флавоноиды, алкалоиды (таблица 6).

Таблица 6 – Оцениваемые результаты гистохимического анализа

Реактив

Определяемый компонент

Окрашивание

 

 

 

 

1

Метиленовый синий

Эфирное масло

Синее

 

 

 

 

2

1-% спиртовой раствор FeCl3

Флавоноиды

Черно-синее-зеленое

 

 

 

 

3

10% спиртовой раствор

Фенольные соединения

Коричневое, желтое

 

K2Cr2O7

 

 

4

Реактив Драгендорфа

Алкалоиды

Коричневое, бурое

 

 

 

 

5

Конц. H2SO4

Сесквитерпеновые лактоны

Желтое

 

 

 

 

6

10% раствор тимола и конц.

Полисахариды

Оранжево-красное

 

H2SO4

 

 

7

Реактив Люголя

Крахмал

Синее

 

 

 

 

8

70-% раствор С2Н5ОН

Инулин

Сферокристаллы

 

 

 

шарообразной формы

Гистохимический анализ показал наличие фенольных соединений, флавоноидов, следов эфирного масла, алкалоидов и сесквитерпеновых лактонов и отсутствие полисахаридов в исследуемых микропрепаратах.

Наличие группп метаболитов в траве Filipendula vulgaris и траве

56

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Filipendula ulmaria, представлены в таблице 7.

Таблица 7 – Результаты гистохимического анализа травы Filipendula vulgaris и

травы Filipendula ulmaria

Реактив

 

 

 

Реакция надземных органов

 

 

 

 

 

 

Стебель

Поперечный

Поверхностный

Черешок

Цветок

 

 

(А)

срез листа

срез листа (С)

(D)

 

(Е)

 

 

 

 

 

 

(В)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

1

2

1

 

2

1

2

1

 

2

1

 

2

1

Метиленовый синий

+

+

+

 

+

+

+

+

 

+

+

 

+

2

1-% спиртовой раствор FeCl3

+

+

+

 

+

+

+

+

 

+

+

 

+

3

10% спиртовой раствор K2Cr2O7

+

+

+

 

+

+

+

+

 

+

+

 

+

4

Реактив Драгендорфа

+

+

+

 

+

+

+

+

 

+

+

 

+

5

конц. H2SO4

-

-

+

 

+

-

-

-

 

-

+

 

+

6

10% раствор тимола, конц.

-

-

-

 

-

-

-

-

 

-

-

 

-

 

H2SO4

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

7

Реактив Люголя

-

-

-

 

-

-

-

-

 

-

-

 

-

8

70-% раствор С2Н5ОН

-

-

-

 

-

-

-

-

 

-

-

 

-

Примечание: 1 – Filipendula vulgaris; 2 – Filipendula ulmaria; «-» – отрицательная реакция; «+» - положительная реакция

Ниже приведены результаты идентификации групп метаболитов в траве

Filipendula vulgaris и траве Filipendula ulmaria.

Идентификация эфирного масла в траве Filipendula vulgaris и траве

Filipendula ulmaria (рисунок 15-16).

1 – Filipendula vulgaris; 2 – Filipendula ulmaria.

А-поперечный срез стебля; В-поперечный срез листа

Рисунок 15 – Результат гистохимических реакций с метиленовым синим

(ув.×10)

57

1 – Filipendula vulgaris; 2 – Filipendula ulmaria.

С- поверхностный срез листа; D-поперечный срез черешка; E- цветок.

Рисунок 16 – Результат гистохимических реакций с метиленовым синим

(ув.×10)

Обработка микропрепаратов листа, стебля, черешка и цветка раствором метиленового синего показала, что основным местом локализации эфирного масла (по характерной синей окраске) являются:

-на поперечном срезе стебля: головчатые волоски или трихомы, эпидермис и хлоренхима стебля,

-на поперечном срезе листа: мезофилл и проводящие пути, трихомы;

- на поверхностном срезе листа: проводящие пути,

а также

эфирномасличные железки;

 

-на поперечном срезе черешка: коровая зона и проводящие пучки;

-в лепестках цветка: эфирномасличные железки, где видно максимальное накопление эфирного масла в виде синего окрашивания

Идентификация флавоноидов в траве Filipendula vulgaris и траве

Filipendula ulmaria (рисунок 17).

58

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

1 – Filipendula vulgaris; 2 – Filipendula ulmaria.

А-поперечный срез стебля; В-поперечный срез листа; С- поверхностный срез листа; D-поперечный срез черешка; E- цветок

Рисунок 17 – Результат гистохимических реакций с 1% спиртовым раствором

FeCl3 (ув.×10)

После обработки микропрепарата исследуемых образцов 1-% спиртовым раствором FeCl3 наблюдали интенсивное черно-зеленое окрашивание во всех исследуемых органах Filipendula vulgaris и Filipendula ulmaria:

59

-на поперечном срезе стебля окрасились эпидермис, хлоренхима, коровой паренхимы, сосудисто-проводящие пучки стебля (особенно склеренхимы и ксилемы);

-на поперечном срезе листа - губчатый и столбчатый мезофилл и проводящие пути, трихомы;

-на поверхностном срезе листа - проводящие пути;

-на поперечном срезе черешка насыщенно окрашены эпидермис, хлоренхима, ксилемы и проводящие пучки;

-в лепестках цветка окрашивание наблюдается в виде диффузного распределения флавоноидов в основных клетках лепестка (рисунок 17).

Идентификация фенольных кислот в траве Filipendula vulgaris и траве

Filipendula ulmaria.

Для идентификации фенольных кислот в 10% растворе бихромата калия помещали исследуемый материал и оставляли на 7 суток. Наличие фенольных кислот было подтверждено интенсивным желто-коричневым окрашиванием во всех исследуемых органах Filipendula vulgaris и Filipendula ulmaria, что свидетельствует о присутствии фенольных соединений во всех клетках [146, с. 4866]. Однако, окрашивание микропрепаратов было неравномерным, что позволяет судить о различной степени накопления фенольных соединений в клетках [146, с. 4866]. Таким образом, участками с максимальным накоплением фенольных соединений являются:

-на поперечном срезе стебля коровая и проводящая зона;

-на поперечном и поверхностном срезах листа склеренхима, хлоренхима, проводящая зона и пучки;

-на поперечном срезе черешка эпидермис, механические ткани и проводящие пучки;

-в лепестках цветка - проводящая зона лепестка (рисунки 18-19) [146, с.

4866].

1 – Filipendula vulgaris; 2 – Filipendula ulmaria.

А-поперечный срез стебля; В-поперечный срез листа

Рисунок 18 – Результат гистохимических реакций с 10% спиртовым раствором бихромата калия (ув.×10)

60

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/