2 курс / Нормальная физиология / Функц_основы_жизнедеятельности_систем_организма

исследуемого животного, покрыть его канадским бальзамом и покровным стеклом. Через 5-10 минут поместить на столик микроскопа и посмотреть сначала под малым увеличением, а затем под большим увеличением. На препарате будут видны розовые кристаллы гемоглобина, которые у морской свинки в виде треугольника, у хомяка в виде прямоугольных палочек у человека в виде квадрата.

РАБОТА 4.9 ПРИГОТОВЛЕНИЕ МАЗКОВ КРОВИ

Мазки крови готовят на предметных стеклах, которые предварительно моют и обезжиривают.

Подготовка стекол. Реактивы. Хозяйственное мыло - 2 % раствор или раствор стирального порошка: 20 г растворить в 975 мл воды и добавить 20 мл пергидроля. Спирт этиловый 96%.

Ход работы. Стекла (новые и бывшие в употреблении) помещают в эмалированную посуду в 2 % раствор хозяйственного мыла или стирального порошка на 8 -10 ч. Кипятят в указанном растворе 5-10 мин, старые мазки предварительно стирают ветошью или ватным тампоном. Более длительное кипячение или использование алюминиевой посуды не рекомендуют, так как стекла мутнеют. Промывают в проточной воде. Насухо вытирают и помещают в этиловый спирт на 30-60 мин. Насухо вытирают чистым полотенцем и хранят в широкогорлой чистой посуде с притертой пробкой. Чистые стекла рекомендуется брать либо пинцетом, либо за края (соприкосновение пальцев с поверхностью стекла оставляет жирные следы).

Техника приготовления мазков. На сухое подготовленное описанным выше способом предметное стекло наносят мазок крови следующим образом. На стекло ближе к короткой стороне наносят стеклянной палочкой (или непосредственно из места укола пальца) небольшую каплю крови. Оставляют стекло в горизонтальном положении и размазывают каплю крови по стеклу с помощью чистого шлифованного стекла, помещая его под углом 45°; коротким ребром, подождав, пока вся кровь расплывется по нему, быстро проводят по предметному стеклу. Не следует сильно нажимать на стекло, так как при этом травмируются форменные элементы крови.

Мазки высушивают на воздухе и маркируют (лучше простым карандашом). Высохший мазок должен быть равномерно тонким, желтоватого цвета, достаточной величины (располагаться на 1-1,5 см от краев, занимать почти всю длину стекла) и оканчиваться «метелочкой». Толстые (густо-розового цвета) мазки не следует использовать, так как в них морфология клеток плохо различима.

Мазки крови для исследования лейкоцитарной формулы готовят следующим образом:

https://t.me/medicina_free

Шаг 1.

Поместить небольшую каплю венозной крови на предметное стекло, с помощью стеклянной капиллярной пипетки, (или непосредственно из места укола пальца перенесите выступившую каплю крови на конец стерильного предметного стекла.

Избегайте при этом всякого контакта между проколотым участком кожи и стеклом.) Оставляют стекло в горизонтальном положении.

Шаг 2.

Размазывают каплю крови по стеклу с помощью чистогошлифованного стекла, помещая его под углом 45°; коротким ребром, подождав, пока вся кровь расплывется по нему

Шаг 3.

Как только кровь растеклась по ребру, быстрым движением от капли проводят по предметному стеклу. Не следует сильно нажимать на стекло, так как при этом травмируются форменные элементы крови.

Шаг 4.

После приготовления мазки быстро сушат на воздухе до исчезновения влажного блеска. Подсушить мазок можно, подержав его над абажуром лампы или помахав им в воздухе. Хорошо сделанный мазок тонок, имеет желтоватый цвет и оканчивается «метелочкой».

РАБОТА 4.10 ФИКСАЦИЯ И ОКРАСКА МАЗКОВ КРОВИ

Фиксация предохраняет эритроциты от гемолиза и закрепляет мазок на стекле. Фиксаторы:

1.Фиксатор - краска Май - Грюнвальда – 3 мин до высыхания;

https://t.me/medicina_free

2.Этанол 96%, 15-25 минут;

3.Краситель Романовского (1 часть краски романовского + 3 части этанола 96%) 3-5 минут;

4.Смесь Никифорова (этанол 96% + эфир) экспозиция 30 минут ( в настоящее время практически не используется из-за наличия в составе эфира).

Мазки кладут на «мостик» строго горизонтально, на небольшом расстояние друг от друга. И наносят краситель. Окраска мазков крови.

Окраска по Паппенгейму: Эозин метиленовый синий по МайГрюнвальду (раствор) (при отсутствии готового раствора готовят 5 г/л раствора сухого красителя в метиловом спирте (хч). Раствор готов к употреблению через 4 дня), рабочий раствор азурэозина по Нохту. Окраска. Сухие нефиксированные мазки помещают в контейнер и опускают в кювету

сраствором красителя-фиксатора Май-Грюнвальда на 5 мин, после чего контейнер с мазками ополаскивают в кювете с дистиллированной водой и помещают в кювету с рабочим раствором азурэозина (по Нохту) на 8 - 15 мин. Затем смешивают краску, перенося контейнер в кювету с водопроводной водой. Мазки высушивают на воздухе.

РАБОТА 4.11 ОПРЕДЕЛЕНИЕ СКОРОСТИ ОСЕДАНИЯ (СОЭ)

Метод Панченкова: в градуированный капилляр от 9 до 100 делений набирают до отметки Р 5% раствор цитрата натрия и выдувают на часовое стекло. Этим же капилляром набирают два раза кровь до отметки К и выдувают каждый раз на стекло. Кровь стеклянной палочкой перемешивают с раствором и набирают до отметки К, затем ставят в штатив. Учитывают СОЭ через 15, 30, 45, 60 минут по столбику образовавшейся плазмы над эритроцитами.

РАБОТА 4.12 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСМОТИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ (ОРЭ)

Для измерения ОРЭ эритроциты помещают в раствор хлористого натрия различной концентрации и наблюдают, в каких растворах произошел частичный или полный гемолиз (разрушение эритроцитов).

Ход работы: Берут раствор хлористого натрия в убывающей концентрации: 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3%.

В каждую пробирку набирают по 5 мл хлористого натрия выше указанной концентрации и прибавляют кровь по 1 мл. Путем встряхивания перемешать содержимое пробирки и выдержать при комнатной температуре 15 минут. По степени прозрачности раствора отмечаю максимальную и минимальную резистентность эритроцитов. Обычно эритроциты выдергивают снижение концентрации хлористого натрия в растворе до 0, 44- 0, 48% не разрушаясь. В 0,34 % растворе хлористого натрия наблюдается

https://t.me/medicina_free

максимальное разрушение эритроцитов (рис. 4.12 а).

Рисунок 4.12 а – Осмотическая резистентность эритроцитов

РАБОТА 4.13 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВРЕМЕНИ СВЕРТЫВАЕМОСТИ КРОВИ

Необходимо: скарификатор, предметное стекло, иголка, вата, спирт, холодная вода (0-50С) и теплая (37-400С), водяная баня.

Ход работы: Поместите несколько капель крови на обезжиренное и подогретое на ладони стекло. Чтобы избежать охлаждения стекла, а тем самым и крови, не ставьте его на стеклянную и металлическую поверхность. Каждые 0,5 мин проводите через кровь чистую иглу. Отметьте время, когда на стекле появятся первые сгустки крови (фибрина).

РАБОТА 4.14 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ

При переливании крови от одного человека к другому или одного вида животного другому может наступить склеивание эритроцитов донора (дающего кровь). Реакция склеивания эритроцитов одной крови сывороткой другой называется агглютинацией.

Существует два вида агглютининов - альфа и бета, в плазме крови, и два вида агглютиногенов А и В, в эритроцитах. Агглютинация наступает, когда в крови будут одноименные агглютинины и агглютиногены.

Ход опыта: на обезжиренное предметное стекло наносят (не смешивая) по капле стандартной сыворотки 2 и 3 групп. Обычным методом добывают кровь у испытуемого. Стеклянной палочкой небольшую каплю, крови переносят в каплю сыворотки 2 группы, затем другим концом палочки в сыворотку 3 группы, осторожно покачивая стекло, смешивают кровь с сывороткой и через 15 мин. по показаниям реакции агглютинации определяют группу крови. При наличии агглютинации капля становится прозрачной, а эритроциты склеиваются в комочки:

а) если реакция агглютинации отсутствует, это кровь 1 группы.

б) агглютинация произошла с сывороткой 3 группы, это кровь 2 группы.

https://t.me/medicina_free

в) агглютинация произошла с сывороткой 2 группы, это кровь 3 группы. г) агглютинация произошла с сывороткой 2 и 3 групп, это кровь 4 группы.

У с.-х. животных при переливании крови реакцию определяют на совместимость. Для этого берут каплю, крови реципиента и каплю, крови донора, смешивают их и наблюдают за реакцией. Если реакция агглютинации произошла, то следовательно, кровь несовместима.

Контрольные вопросы

1.Кровь как внутренняя среда организма, ее функции.

2.Функции крови.

3.Удельный вес, его величина и методы определения.

4.Вязкость крови, ее значение и методы определения.

5.Состав крови (клеточный, биохимический).

6.Форменные элементы крови.

7.Что такое плазма и функция ее отдельных компонентов.

8.Белки плазмы и их физиологическая роль.

9.Эритроциты, их строение, количество и функции.

10.Счет эритроцитов, их функции и количество в крови у различных видов животных.

11.Гемоглобин, его строение, функции, методы определения.

12.Что такое цветной показатель крови, для чего его вычисляют?

13.Соединение гемоглобина с газами.

14.Скорость оседания эритроцитов, осмотическая резистентность эритроцитов.

15.Лейкоциты, их строение, количество, лейкоцитарная формула и

функции.

16.Функции лейкоцитов.

17.Счет лейкоцитов и их количество в крови у различных видов

животных.

18.Кровяные пластинки, их строение, количество и функции.

19.Гемолиз и его виды.

20.Гипертонический, гипотонический, физиологические растворы.

21.Реакция крови, буферные системы крови.

22.Щелочной резерв крови, значение. Что такое ацидоз и алкалоз?

23.Тромбоциты и их роль в свертывании крови.

24.Биологическое значение и механизм свертывания крови.

25.Определение групп крови.

26.Функциональная система, определяющая количество форменных элементов крови (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов).

27.Что такое фагоцитоз, и какие факторы на него влияют.

28.Как определить лейкоцитарную формулу?

https://t.me/medicina_free

Глава V ФИЗИОЛОГИЯ КРОВООБРАЩЕНИЯ

Ворганизме позвоночных животных кровь циркулирует по замкнутой системе сосудов и полостей, называемой кровеносной системой, или системой кровообращения.

Центром этой системы, источником энергии, обеспечивающей движение крови в одном направлении, является сердце; периферическим отделом системы служит сеть кровеносных сосудов. Последние подразделяются на артерии, несущие кровь от сердца, и вены, по которым кровь к нему возвращается. Между артериями и венами находится микроциркуляторное русло, включающее артериолы, капилляры, венулы и артериовенозные анастомозы.

При замкнутой системе кровообращения кровь не вступает в непосредственный контакт с клетками. Внутренней средой для клеток является тканевая жидкость, которая обменивается с кровью газами, питательными веществами и метаболитами через стенки капилляров.

Благодаря движению крови осуществляются обмен веществ, питание, дыхание, терморегуляция, выделение и другие функции организма. Прекращается движение крови - прекращается и жизнь.

Вцелостном организме деятельность сердца и сосудов регулируется центральной нервной системой и гуморальными факторами, что обеспечивает необходимое соответствие между величиной кровотока и потребностью органов и тканей в кислороде и питательных веществах (рис.

58).

Рисунок 58 - Регуляция работы сердца

У птиц и млекопитающих сердце представляет собой полый мышечный орган, состоящий из четырех камер - двух предсердий и двух желудочков (рис. 59). Левая и правая половины сердца разобщены сплошной перегородкой. В левой половине сердца находится артериальная кровь, в правой - венозная. Правое предсердие сообщается с правым желудочком, левое - с левым желудочком предсердно-желудочковыми (атриовентрикулярными) отверстиями. При сокращении желудочков

https://t.me/medicina_free

отверстия закрываются створчатыми клапанами. Левая половина сердца обеспечивает насосную функцию для циркуляции крови по большому кругу кровообращения, правая для циркуляции по малому кругу. Ни полного, ни частичного смешивания крови в сердце или сосудах при этом не происходит.

Рисунок 59 - Эволюция кругов кровообращения: 1 - сердце; 2 - большой круг; 3 - малый круг

При сокращении левого желудочка кровь поступает в аорту. Через артериальную систему она направляется к органам и тканям, проходит микроциркуляторное русло, а затем по венам (передней и задней полым) возвращается в правое предсердие. Путь крови от левого желудочка через капилляры до правого предсердия называется большим (системным) кругом кровообращения (рис. 60).

При сокращении правого желудочка венозная кровь выбрасывается в легочную артерию. По разветвлениям этого сосуда она поступает в капилляры легочных альвеол, где отдает углекислый газ и обогащается кислородом. Артериальная кровь по легочным венам (их бывает 2 или 4) направляется в левое предсердие, а затем в левый желудочек (в данном случае мы имеем дело с исключением). Участок сосудистой системы, по

https://t.me/medicina_free

которому кровь движется от правого желудочка до левого предсердия сердца, называется малым (легочным) кругом кровообращения.

Рисунок 60 - Круги кровообращения

5.1 Сократительная функция сердца

Строение и функции миокарда. Основу сердца составляет сердечная мышца - миокард, построенная из сердечной поперечнополосатой мышечной ткани.

Мышцы сердца имеют ряд структурных особенностей, обусловленных функциями разных отделов сердца и сердца как органа в целом:

1)неодинаковая толщина миокарда в разных отделах сердца - в предсердиях он меньше, чем в желудочках, в правом желудочке меньше, чем

влевом;

2)обособленность мышц предсердий от мышц желудочков;

3)существование общих мышечных пластов в обоих предсердиях и в обоих желудочках;

4)наличие сфинктерообразных пучков мышечных волокон в области венозных устьев в предсердиях;

5)наличие двух морфофункциональных типов мышечных волокон. Сердечная мышца, как и скелетная мышца, гистологически выглядит

как скопление волокон с поперечной исчерченностью и четко выраженным саркомерным строением. Вместе с тем сердечное мышечное волокно - это, скорее, не морфологический, а функциональный элемент. Оно состоит из цепочки удлиненных мышечных клеток (кардиомиоцитов), соединенных «конец в конец» и заключенных в общую саркоплазматическую мембрану

(рис. 61).

Кардиомиоциты контактируют друг с другом посредством так называемых вставочных дисков. В них расположены нексусы, т. е. участки с

https://t.me/medicina_free

низким сопротивлением, через которые осуществляется переход возбуждения с одной клетки на другую. Благодаря наличию нексусов, а также анастомозов между соседними мышечными волокнами мышечная ткань предсердий и желудочков ведет себя как функциональный синцитий.

Различают два типа сердечных мышечных волокон: 1) волокна рабочего миокарда предсердий и желудочков, обеспечивающие сократительную функцию; 2) волокна проводящей системы, обеспечивающие генерацию и проведение возбуждения к рабочим волокнам.

Клетки рабочего миокарда имеют хорошо развитую систему поперечных трубочек саркоплазматического ретикулума, способного депонировать ионы Са++ и отдавать их миофибриллам. Миофибриллы располагаются продольно, проходят через всю клетку и состоят из толстых и тонких миофиламентов. Между миофибриллами имеется много

митохондрий, которые занимают до половины объема клетки.

Рисунок 61 - Строение сердечной мышцы:

1- вставочный диск; 2 - ядро; 3 - волокно; 4 - фибриллы; 5 - капилляр; 6 - сарколемма; 7- продольная система; 8 – Н-зона; 9 - конечная цистерна; 10 -

митохондрии; 11 - миозиновые нити; 12 - актиновые и миозиновые нити; 13 - актиновые нити

Сердечная мышца более упруга, чем скелетная, благодаря наличию большого числа коллагеновых и эластичных волокон, а также густой сети микрососудов. Снаружи миокард прочно сращен с серозной оболочкой – эпикардом. В области отхождения крупных сосудов он продолжается в околосердечную сумку – перикард.

https://t.me/medicina_free

В узком щелевидном пространстве между эпикардом и перикардом содержится небольшое количество серозной жидкости, увлажняющей поверхность сердца и облегчающей его сокращение.

Внутренняя оболочка сердца - эндокард - состоит из соединительнотканной основы, покрытой эндотелием. Последний обеспечивает гладкость внутренней поверхности сердца, облегчая течение крови и препятствуя ее свертыванию. Складки эндотелия, внутри которых находятся соединительная ткань нервы и сосуды, образуют створчатые (антриовентрикулярные) и полулунные клапаны (рис. 62).

В правом предсердно-желудочковом отверстии располагается трехстворчатый клапан, в левом – двухстворчатый. При сокращении предсердий створки клапанов опускаются вниз, свободно пропуская кровь. При сокращении же желудочков они захлопываются; прогибанию их внутрь предсердий препятствуют сухожильные нити, соединяющие края клапанов с сосочковыми мышцами желудочков.

В устьях аорты и легочной артерии расположены по три полулунных клапана, вогнутая поверхность которых обращена в просвет сосудов. Расправляясь под давлением крови со стороны сосудов и прилегая друг к другу, кармашки клапанов обеспечивает полную герметизацию отверстий.

Рисунок 62 - Клапаны сердца

Относительные размеры сердца (в процентах к массе тела) у мелких и крупных животных одного класса примерно одинаковы (у млекопитающих в среднем 0,9-0,6 %), несмотря на различную интенсивность метаболизма и разную потребность в кислороде. Последняя удовлетворяется не за счет увеличения размеров сердца, а за счет учащения сердечных сокращений.

Вместе с тем при усиленной мышечной нагрузке относительная масса сердца существенно возрастает. Хорошо развито сердце у оленей, лошадей гончих собак. Как правило, увеличение сердца при регулярной физической нагрузке (тренинге) сопровождается замедлением его сокращений. Так, у

https://t.me/medicina_free