2 курс / Нормальная физиология / XXIV_съезд_физиологического_общества_им_И_П_Павлова

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

ЛИГАНД РЕЦЕПТОРОВ СИГМА 1 BD 1063 ПОДАВЛЯЕТ СА2+-ОТВЕТЫ, ВЫЗЫВАЕМЫЕ МОЛИКСАНОМ В МАКРОФАГАХ

Миленина Л. С.1,*, Крутецкая З. И.1, Антонов В. Г.2, Крутецкая Н. И.1, Бадюлина В. И.1, Симонян А. О.1

1Санкт-Петербургский государственный университет, г. Санкт-Петербург 2Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет, г. Санкт-Петербург

*e-mail: l.milenina@spbu.ru

Введение. Рецепторы сигма 1 – ​повсеместные многофункциональные лигандрегулируемые молекулярные шапероны в мембране эндоплазматического ретикулума, имеющие уникальную историю, структуру и фармакологический профиль. Выполняя функции шаперонов, рецепторы сигма 1 модулируют широкий спектр клеточных процес- соввнормеипатологии,включаяпроцессыCa2+-сигнализации.Фармакологическийаналогокисленногоглутатиона препарат моликсан® («ФАРМА-ВАМ», Санкт-Петербург) используется как иммуномодулятор и цитопротектор в комплексной терапии бактериальных, вирусных и онкологических заболеваний. Клинические исследования показали, что моликсан эффективен в профилактике и лечении коронавирусной инфекции COVID 19. Приводит к более быстрому регрессу тяжести заболевания в более легкую форму. Ранее нами было впервые показано, что моликсан увеличивает внутриклеточную концентрацию Са2+, [Ca2+]i, вызывая мобилизацию Са2+ из Са2+-депо и последующий депозависимыйвходСа2+ вперитонеальныемакрофагикрысы.Длявыявленияучастиярецепторовсигма 1врегуляции процессов Са2+-сигнализации в макрофагах, исследовали влияние антагониста рецепторов сигма 1, соединения BD 1063, на Са2+-ответы, вызываемые моликсаном в перитонеальных макрофагах крысы.

Методы исследования. Эксперименты проводили на культивируемых резидентных перитонеальных макрофагах крыс линии Wistar на автоматизированной установке для измерения [Ca2+]i на базе флуоресцентного микроскопа Leica DM 4000B (Leica Microsystems, Германия). Для измерения [Ca2+]i использовали флуоресцентный зонд

Fura 2AM (Sigma-Aldrich, США).

Результатыизаключение.Обнаружено,чтопреинкубациямакрофаговс60мкМBD 1063втечение40миндо введения 100 мкг/мл моликсана приводит к значительному подавлению как мобилизации Са2+ из Са2+-депо (на 50.8

± 9.3 %, n = 7; P < 0.05), так и последующего депозависимого входа Са2+ в клетки (на 54.0 ± 10.1 %, n = 7, P < 0.05), индуцируемых моликсаном. Показано также, что добавление 60 мкМ BD 1063 на фоне развившегося входа Са2+, индуцированного моликсаном, вызывает значительное (на 63.1 ± 8.5 %, n = 12; P < 0.05) подавление депозависимого входа Са2+ в макрофаги. Полученные данные свидетельствуют об участии рецепторов сигма 1 в комплексном сигнальном каскаде, вызываемом моликсаном и приводящем к увеличению [Ca2+]i в макрофагах, а также об участии сигма 1 рецепторов в регуляции депозависимого входа Са2+ в макрофагах.

Финансовая поддержка: Договор СПбГУ на выполнение научно-исследовательских работ № 05/03 от 12.03.2020.

СРАВНЕНИЕ НЕКРОЗА И АПОПТОЗА У ТРОМБОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА

Мишуков А. А.1,*, Обыденный С. И.1,2, Подоплелова Н. А.1,2, Гарсон Дасгупта А. К.1, Свешникова А. Н.1,2,3,, Пантелеев М. А.1,2,3

1ФГБУНЦентр Теоретических проблем физико-химической фармакологии РАН, г. Москва 2ФГБУ НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева Минздрава России, г. Москва

3МГУ им. М. В. Ломоносова, г. Москва

*e-mail: artem.mishukov1999@gmail.com

Втромбоцитах реализуется два варианта регулируемой клеточной гибели: mPTP-движимый некроз и апоптоз,

ироль данных типов гибели в норме и при патологии могут отличаться. Есть основания предполагать, что апоптоз отвечает за клиренс тромбоцитов, в том числе после переливания тромбоконцентрата. В то же время к некрозу приводит активация тромбоцитов физиологическими агонистами. Идентификация пути гибели тромбоцитов может быть важна не только для понимания фундаментальных основ клеточной смерти, но также для сугубо прикладных задач таких, как увеличение сроков хранения тромбоконцентратов и помощь пациентам с тромбоцитопениями, вызванными ускоренным клиренсом тромбоцитов. Мы провели сравнительный анализ развития процессов и морфофункциональную диагностику погибших тромбоцитов для выявления специфических маркеров апоптоза и некроза у тромбоцитов.

Вработе использовались методы проточной цитометрии, конфокальной и электронной микроскопии. В качестве индуктора некроза у тромбоцитов использовался тромбин, в качестве индуктора апоптоза – ​ингибитор белка

Bcl-XLABT 737.

Было показано, что по ряду параметров таких, как морфологические особенности, способность связывать белки свертывания крови и участвовать в прокоагулянтных реакциях тромбоциты, полученные в результате апоптоза

ив результате некроза при сильной активации физиологическими агонистами, не отличаются. Однако, апоптотические тромбоциты не имеют на своей поверхности альфа-гранулярных белков таких, как р-селектин, фибриноген, фактор Виллебранда и др. Это указывает на то, что в процессе апоптоза в отличие от некроза не происходит

221

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

высвобождение альфа-гранул. Исследование кинетики развития процессов гибели тромбоцитов методом проточной цитометрии и конфокальной микроскопии указывают на то, что некроз и апоптоз тромбоцитов реализуются через деполяризацию митохондрий, после которой происходит резкое повышение концентрации внутриклеточного кальция с последующей экстернализацией фосфатидилсерина, разрушением цитоскелета и потерей интактности плазматической мембраны. Отсутствие колебаний концентрации внутриклеточного кальция, предшествующих деполяризации митохондрий, является ключевым отличием между некрозом и апоптозом тромбоцитов.

Таким образом, апоптоз тромбоцитов, запущенный при помощи ABT 737, более медленный процесс, чем некроз под воздействием тромбина. В конечной точке мертвые тромбоциты отличаются по наличию или отсутствию связанных с мембраной альфа-гранулярных белков.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 23 74 00057.

ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ И ТРОМБОЦИТОВ В ГЕМОСТАЗЕ И ТРОМБОЗЕ

Пантелеев М. А.1,2,3*

1Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии РАН, г. Москва 2Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии

им. Дмитрия Рогачева Минздрава России, г. Москва 3Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова, г. Москва

*e-mail: mapanteleev@yandex.ru

Системагемостазачеловека – одна​ изключевыхфизиологическихзащитныхсистемкрови,отвечающаязаостановку кротечения при ранениях, а также вовлеченная в регуляцию проницаемости сосудистой стенки, иммунный ответ, регенерацию поврежденных тканей и ангиогенез. В центре этой системы находится взаимодействие двух звеньев, клеточного (представленного тромбоцитами) и гуморального/плазменного (каскад свертывания крови). Главным элементом этих взаимодействий являются так называемые мембранно-зависимые реакции свертывания, которые протекают на поверхности прокоагулянтной субпопуляции активированных тромбоцитов. Однако, механизмы формирования, свойства и физиологическая роль прокоагулятных тромбоцитов остаются во многом загадочными. Наш коллектив исследовал эти процессы in silico с помощью компьютерного моделирования, in vitro на образцах крови здоровых доноров и пациентов с генетическими дефектами функции тромбоцитов с помощью конфокальной и STORM микроскопии, проточной цитометрии, методов клеточной биологии и ферментативной кинетики, а также in vivo в экспериментальных моделях артериального тромбоза на мышах с помощью интравитальной флуоресцентной микроскопии и трансмиссионной электронной микроскопии. Полученные результаты указывают на то, что прокоагулянтныетромбоцитыформируютсяврезультатезапрограммированнойсмертипотипумитохондриального некроза,связанногосперегрузкойкальциемприсильнойактивации;приэтомвероятностьсмертитромбоцитарезко повышается,еслионимеетменее4митохондрий.Специальныймеханизмагрегациипрокоагулянтныхтромбоцитов позволяет их перераспределение внутри тромба в процессе тромбообразования, управляя пространственной организацией фибринового сгустка. Помимо ускорения реакций свертывания, тромбоциты играют критическую роль в защите процессов свертывания крови от потока, т. к. скорости сдвига на границе раны достигают 104 с 1 и выше. Индукция апоптоза в тромбоцитах также ведет к появлению прокоагулянтной активности, однако апоптотические тромбоциты практически не способны к адгезии и агрегации. Совокупность данных позволяет предложить новую картинуфизиологиигемостатическогоответаивозможныемишенидлятерапевтическоговоздействия,отличающие гемостаз от тромбоза.

Поддержано грантом Российского научного фонда № 23 74 00057.

ПОКАЗАТЕЛИ СИСТЕМЫ КРОВИ ПТИЦ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ АНТИМИКРОБНЫХ ПРЕПАРАТОВ

Присный А. А.*

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», г. Белгород

*e-mail: andreyprisny@gmail.com

Кроветворные органы крайне восприимчивы к приему лекарственных препаратов, при этом выявленная картина изменений показателей периферической крови позволяет судить о защитных возможностях организма. В различные периоды функционального напряжения физиологическое состояние птиц можно контролировать путем исследования крови, способной реагировать на внутренние и внешние раздражители. Несмотря на частую применяемость ряда противомикробных лекарственных средств в промышленном птицеводстве, влияние отдельных фармакологических групп на физиологические показатели, в том числе на течение фагоцитарной реакции у птиц является недостаточно изученным.

Осуществлено исследование гематологических показателей крови цыплят и утят, получавших препараты группы фторхинолонов в дозе 200 мг/л на протяжении 10 суток. Отбор крови во всех подопытных группах проводили на

222

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

1, 3, 5, 7 и 9 сутки после отмены препаратов. Влияние фторхинолонов на течение фагоцитарной реакции было ис-

следовано in vitro, с применением культур Staphylococcus aureus и Saccharomyces cerevisiae. Статистический анализ результатов экспериментов проведен с применением U-критерия Манна-Уитни для 5 % уровня значимости

ВрезультатеисследованияВыявленнекоторыйкомпенсаторныйростколичестваэритроцитов,чтонафонепадения содержания гемоглобина способствовало достоверному уменьшению значений цветного показателя, это в свою очередь, свидетельствует о присутствии в крови эритроцитов с низкой концентрацией гемоглобина. Наиболее чувствительными компонентами лейкоцитарной системы кантимикробным препаратам группы фторхинолонов являются лимфоциты и базофилы. Изменения показателей фагоцитоза после инкубации с S. cerevisiae вызваны применением моксифлоксацина, левофлоксацина и энрофлоксацина. Энрофлоксацин и моксифлоксацин оказали существенное влияние на течение фагоцитарной реакции псевдоэозинофилов при инкубации с культурой St. aureus в сравнении

состальными фторхинолонами, что особенно проявилось на третьи и пятые сутки после отмены препаратов.

Вцелом, установлено, что воздействие антимикробных препаратов группы фторхинолонов на систему крови птиц не имеет однозначных последствий.

ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ РОСТА ТРОМБОЦИТАРНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ НА ПРОЛИФЕРАЦИЮ КЛЕТОК

Свешникова А. Н.1,2,*, Шамова Е. В.3, Колесникова И. С.1, Ивановская Е. В.1, Мишуков А.А1, Болдова А. Е.1, Трахтман П. Е.2, Пантелеев М. А.1,2

1Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии РАН, г. Москва 2Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии

им. Дмитрия Рогачева МЗ РФ, г. Москва 3Институт биофизики и клеточной инженерии НАНБ, г. Минск, Беларусь

*e-mail: a.sveshnikova@physics.msu.ru

Клетки тканей многоклеточного организма находятся впостоянном контакте с окружением, от которого они по- лучаютсигналыопродолжениижизнедеятельности,втомчислебелки – факторы​ роста,стимулирующиеихпролиферацию. Тромбоциты – клетки​ крови, ответственные за образование тромбов при повреждении сосуда. Известно, что втромбоцитахсодержитсямножествогранул, содержащих факторыростаиадгезионные молекулы исекретируемых притромбообразовании.Внорметромбоцитарныефакторыростанеобходимыдляуспешногозаживленияраныирепарации ткани. Однако, при сосудистых опухолях активация тромбоцитов в районе опухоли приводит к стимуляции ее роста. Целью настоящей работы было исследование влияния тромбоцитарных факторов роста на пролиферацию клеточных культур тканей человека: MCF 7, SiHa, SH-SY5Y, EA.hy926, ОКP-GS ифибробласты кожи. Культивирование клеток проводилось по рекомендованным для них протоколам сдобавлением к базальной среде следующих растворов: а) фетальная бычья сыворотка; б) лизат стандартного тромбоконцентрата человека; в) сыворотка стандартноготромбоконцентратачеловека;г)фракцияраствора(б)сразмеромменее50кДа;д)фракцияраствора(в)сразмером менее 50 кДа. Оценка пролиферации клеток проводилась проточной цитофлуориметрией. Все исследуемые культуры успешно пролиферировали в присутствии 5 10 % (vol.) растворов (а)-(в), при этом как в скорости пролиферации, так и в морфологии клеток не наблюдалось значимых отличий между используемыми растворами. Пролиферация культур MCF 7 иSiHa вприсутствии 10 % (vol.) растворов (г) или (д) происходила со скоростью в2 5 раз меньше таковой для растворов (а)-(в). Пролиферация остальных культур в присутствии растворов (г) или (д) не наблюдалась. Все клетки, культивируемые в присутствии растворов (г) или (д), имели морфологические признаки сниженной адгезии к поверхности, поэтому было проведено исследование пролиферации в присутствии адгезионных агентов (коллаген I или III типа, фибриноген, фибронектин) в растворе (г) или (д). Только добавление фибронектина незначительно увеличило скорость пролиферации MCF 7 и SiHa. Таким образом, факторы роста тромбоцитарного происхождения обеспечивают достаточное окружение для нормальной пролиферации клеток человека, однако, ключевым составляющим является неидентифицированный компонент с размером более 50 кДа.

Финансовая поддержка: исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда № 23 45 10039 и № Б 23 РНФ 162.

ГАЗОМЕДИАТОРЫ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА КРОВИ В НОРМЕ И ПРИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЯХ

Тихомирова И. А.1*, Муравьев А. В.1, Петроченко Е. П.1, Лемехова В. А.1

1Ярославский государственный педагогический университет им. К. Д. Ушинского, г. Ярославль 2Областная клиническая онкологическая больница, г. Ярославль

*e-mail: tikhom-irina@yandex.ru

Введение. Газомедиаторы – ​малые короткоживущие газовые молекулы, которые синтезируются в организме человека и благодаря прекрасной растворимости в липидах, легко проникают через клеточную мембрану, реализуя сигнальные и регуляторные эффекты. К настоящему времени накоплены убедительные свидетельства в пользу важ-

223

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

нойролигазомедиаторов(оксидаазота,сероводорода)врегуляциифункционированиясердцаисосудистойсистемы в норме и при патологии, их влияние на реологические и коагуляционные свойства крови изучено недостаточно.

Методы исследования. Исследование выполнено на венозной крови практически здоровых лиц (n=34), пациентов со злокачественными новообразованиями (ЗНО) головы и шеи (n=25) и колоректальным раком (n=28). Вязкость крови измеряли с помощью ротационного вискозиметра Брукфильда DV2T (США). Деформируемость

иагрегацию эритроцитов определяли с помощью системы RheoScan D300 (Южная Корея). Параметры тромбоцитарного гемостаза оценивали с помощью лазерного анализатора агрегации тромбоцитов АЛАТ 2 «Биола» (Москва,

ООО НПФ «Биола»). Процесс свертывания цельной крови исследовали методом низкочастотной пьезотромбоэластографии (НПТЭГ) с помощью программно-аппаратного комплекса АРП 01М «МЕДНОРД» (г. Томск). Влияние

NO и H2S оценивали с использованием их доноров натрия нитропруссида, Spermine NONOate, NaHS и GYY4137. Содержание H2S и метаболитов NO в плазме крови определяли фотометрическим методом.

Результаты. В плазме крови пациентов со ЗНО зафиксирован выраженный рост уровня H2S (на 39,3 %, p<0,05)

иуменьшение суммарной концентрации нитратов и нитритов (NOx) на 32 %, p<0,05 в сравнении с нормой. Сниженное содержание метаболитов NOx у пациентов может быть обусловлено их повышенным расходом в иммунных

реакциях при ЗНО. При разных формах ЗНО зафиксирована повышенная экспрессия H2S-продуцирующих энзимов (CBS, CSE и 3-MST) в клетках опухоли, что свидетельствует о системном эффекте повышенной продукции H2S. Отмечено снижение интенсивности контактной коагуляции и полимеризационного этапа свертывания крови в присутствии доноров газомедиаторов и изменение агрегатных свойств клеток крови (тромбоцитов и эритроцитов).

Заключение. В условиях злокачественного роста опухоли отмечены существенные изменения метаболизма

NO и H2S. Вклад H2S и NO в регуляцию периферического кровотока (который возрастает при ЗНО) подтверждается выявленнымикорреляционнымивзаимосвязямиуровняэтихгазомедиатороввплазмекровиспоказателямисвертывания крови и ее реологическими свойствами.

Постерная секция: Физиология крови

ИДЕНТИФИКАЦИЯ ОСМОТИЧЕСКИ АКТИВНЫХ БЕЛКОВ В СОСТАВЕ АНОДНОЙ ФРАКЦИИ СЫВОРОТКИ КРОВИ У АТЛАНТИЧЕСКОЙ ТРЕСКИ GADUS MORHUA

Базарова З. М.1,*, Андреева А. М.1, Торопыгин И. Ю.1,2, Васильев А. С.1, Федоров Р. А.1, Ламаш Н. Е.1,3, Гарина Д. В.1

1Институт Биологии внутренних вод им. И. Д. Папанина РАН, п. Борок 2Институт Биомедицинской химии им. В. Н. Ореховича, г. Москва

3 ННЦ морской биологии им. А. В. Жирмунского ДВО РАН, г. Владивосток

*e-mail: zinaidabazarova1999@gmail.com

Согласно «безальбуминовой» гипотезе капиллярного обмена, разработанной на карповых рыбах, функцию альбумина, «потерянного» значительной частью Teleostei в ходе 3й полногеномной дупликации, взяли на себя множественные осмотически активные белки (ОАБ) разных функциональных классов (Andreeva, 2020, 2021).

Цель работы – протестировать​ гипотезу на примере атлантической трески Gadus morhua: идентифицировать ОАБ в сыворотке крови и оценить их функциональное разнообразие. Для решения задач использовали методы электрофореза, MALDI, аннотации Gene Ontology (GO) и критерии поиска ОАБ – молекулярная​ масса (Mr) не выше 80 kDa, высокий электроотрицательный потенциал (оценивали по электрофоретической подвижности Rf) и высокое суммарное относительное содержание (ОС); для определения границ фракции из ОАБ на диск- и 2Д-SDS-PAGE (I направление диск-Е) использовали «навигатор» трансферрин (Andreeva et al., 2023). Для расчета Мr и ОС исполь-

зовали ПП ONE-Dscan, Ver 1.31 (Scananalytic Inc.).

Результаты показали наличие в анодной фракции сыворотки 27 ОАБ. Анализ GO показал доминирование среди них внеклеточных белков – аполипопротеина​ А-I, гемопексина (белок тепловой акклимации «warm temperature acclimated 65 kDa protein» или Wap65), ингибиторов протеиназ Inh (alpha 2-HS-glycoprotein-like, fetuin-B-like, kininogen 1-like, alpha 1-antitrypsin homolog). По ОС им уступали внутриклеточные белки (beta-Ala-His дипептида-

за, низкомолекулярные фрагменты Н-цепи сократительного белка миозина, коактозин-подобный белок). По молекулярной функции белки дифференцировались на 4, по биологическим процессам – ​на 8 групп. Величины Rf ОАБ

вдиск-Е были сопоставимы с Rf ЧСА (1.0): 1.1. для Wap65 и 1.15 для Inh. ОС всех ОАБ в сыворотке составило

51.2±6.5 %, что сопоставимо с ОС ЧСА в плазме Mammalia (~60 %).

Результатыработыподтверждаютположения«безальбуминовой»гипотезы.Подобнокарповым,вкровитрески обнаружены множественные белки разных функциональных классов, соответствующие критериям осмотической активности. В то же время, у трески список ОАБ шире, чем у карповых рыб за счет изоформ АроА-I, ингибиторов протеиназ, внутриклеточных белков мышечного комплекса и внутриклеточных белков. И у трески, и у карповых,

взоне ОА преобладают белки, участвующие в транспорте и иммунной защите (гемопексины, АроА-I, гидролазы и ингибиторы протеиназ).

Работа выполнена в рамках государственного задания, тема № 121050500046 8.

224

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

ПОВЫШЕНИЕ СТРЕССОУСТОЙЧИВОСТИ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА ПРИ ФИЗИЧЕСКОЙ НАГРУЗКЕ ПРИЁМОМ ПАНТОГЕМАТОГЕНА

Блажко А. А.*, Шахматов И. И.

Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул

*e-mail: Blazhko_1990@mail.ru

Физическая нагрузка высокой интенсивности и продолжительности может приводить к развитию в организме реакций дистресса. Такие дезадаптивные реакции при стрессорном воздействии со стороны системы гемостаза и микроциркуляторного русла проявляется в виде повышения риска тромбообразования с развитием состояния тромботической готовности. Для того, чтобы минимизировать тромботические осложнения при стрессе в виде интенсивной нагрузки необходимо увеличивать стрессоустойчивость организма и системы гемостаза либо многократными тренировками, либо предварительным курсовым приёмом адаптагенов, например, продуктов пантового оленеводства.

Исследовали показатели системы гемостаза и микроциркуляторного русла у 60 крыс-самцов линии Вистар, подверженных навязанному бегу в тредбане со скоростью 6 8 м/мин в течение 8-и часов (контрольная группа), подверженных такой же нагрузке, но с предварительным ежедневным приёмом пантогематогена в течение месяца (экспериментальная группа), показатели сравнивали с интактными животными, принимавшими воду и не испытывающими стрессорное воздействие в виде физической нагрузки. В качестве адаптогена использовался концентрат «Пантогематоген (Лубяньгем) », запатентованный ФГБНУ «Федеральный Алтайский научный центр агробиотехнологий» (г. Барнаул).

Предварительный курсовой приём пантогематогена при стрессорном воздействии физической нагрузкой предотвращал развитие маркеров тромбообразования, выявленных у крыс контрольной группы после тренировки без приёма адаптогена, таких как: тромбоцитопения и увеличение агрегационной функции тромбоцитов, гипофибриногенемия на фоне роста растворимых фибрин-мономерных комплексов. Предварительный приём продуктов пантового оленеводства препятствовал снижению фибринолитического и антикоагулянтного потенциала крови, ликвидировал признаки нарушения микроциркуляции: повышение вязкости крови и снижение продукции оксида азота эндотелиальными клетками. Такое адаптивное воздействие приёма продуктов пантооленеводства, возможно, связано с наличием в составе крови марала активных пептидов, цитокинов, активирующих сосудистую стенку, что приводит к усилению выработки ей оксида азота, тканевого активатора плазминогена (t-PA) и других факторов, препятствующих образованию тромба.

Такимобразом,курсовойпредварительныймесячныйприёмпродуктовпантовогооленеводстваустраняетриск развития тромбообразования у экспериментальных животных при интенсивной 8-часовой тренировке, повышая стрессоустойчивость организма.

ВЛИЯНИЕ ПОВРЕЖДЕНИЯ КРОВЕНОСНОГО СОСУДА НА РЕОЛОГИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ В СИСТЕМЕ КРОВООБРАЩЕНИЯ

Быков Г. А.1,2,*, Пантелеев М. А.1,2,3

1Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии РАН, г. Москва 2Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова, г. Москва

3 Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева, г. Москва

*e-mail: bygeoall@yahoo.com

Нарушения целостности кровеносной системы ведут к системной кровопотере и локальному нарушению кровоснабжения. За сохранение жидкого состояния крови, поддержание целостности стенок кровеносных сосудов и остановку кровотечений в организме человека отвечает система гемостаза. Она состоит из клеточного звена (тромбоцитов,образующихагрегаты)иплазменногосвертывания(биохимическойсистемы,преобразующейплазму крови в гель). Критическим регулятором системы является поток: он регулирует адгезию, активацию и агрегацию тромбоцитов, определяет локальные концентрации факторов свертывания внутри и вне тромба. Но, реологические условия работы системы гемостаза плохо изучены. Нашей целью было определить, как распространяются по кровеносной системе изменения потока при проколе срединной локтевой вены, и как меняются локальные реологические условия в зависимости от степени повреждения. Построена математическая модель, описывающая распределение потоков и давлений по венозной системе руки человека. Интактные сосуды модели – ​недеформируемые цилиндры, кровь – ​вязкая Ньютоновская жидкость. Её движение по интактным сосудам рассматривалось в одномерном пространстве, а движение в повреждённом сосуде моделировалось в трёхмерном пространстве. На основании уравнений Пуазейля, Навье-Стокса, непрерывности и экспериментальных данных о размерах сосудов, была построена и численно решалась система алгебраических и дифференциальных уравнений в частных производных для полей потоков, давлений и скоростей. При проколе срединной локтевой вены давления на её концах падают с ростом радиуса прокола (до 42 % по сравнению с интактной системой). Давления в остальных узлах системы падают не

225

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

более чем на 1 %. Увеличивается приток крови (до 74 %) из подводящих сосудов, уменьшается отток из отводящих сосудовдополнойостановкипотокаиизмененияегонаправления(до18 %исходногозначения).Измененияпотоков не распространяются на глубокие вены (эффекты менее 0,6 %). При увеличении радиуса раны объём кровопотери возрастает. Скорость сдвига на краю раны возрастает при росте радиуса до 300 мкм и достигает величины порядка 105 с1, после чего падает. Из-за высокого градиента давления в области раны формируется регион с экстремальным значением скорости сдвига. Для больших ранений (более 300 мкм) значение потока крови через рану определяется сопротивлением подводящих сосудов. Для маленьких или заживающих ран (менее 300 мкм) кровопотеря определяется только сопротивлением самой раны.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 23 74 00057.

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ РИСКА НАРУШЕНИЙ ГЕМОСТАЗА В ПАТОГЕНЕЗЕ ГИПЕРТЕНЗИВНЫХ РАССТРОЙСТВ БЕРЕМЕННЫХ

Власова Т. И.*, Шишканова Т. И., Трофимов В. А., Шутов М. В.

ФГБОУ ВО «Национальный исследовательский Мордовский государственный университет им. Н. П. Огарева», г. Саранск

*e-mail: v. t.i@bk.ru

Введение. В настоящее время остается открытым вопрос роли генетических аспектов в патогенезе гипертензивного расстройства беременности – преэклампсии​ (ПЭ).

Методыисследования.Проведенопроспективноеисследование173пациентоксодноплоднойбеременностью в сроке гестации 22 41 неделя, родоразрешенных в перинатальном центре Республики Мордовия. Группы исследования: первая (n=63) -беременные с умеренной ПЭ; вторая (n=58) – ​беременные с тяжелой ПЭ; группа контроля (n=52) – ​пациентки с физиологической беременностью. Проведена оценка показателей гемостазиограммы и тромбоэластографии(ТЭГ).Сцельюисследованиянекоторыхгеновтромбоцитарныхинтегриновифибриногенаприменен метод ПЦР-диагностики.

Результаты исследования. При умеренной ПЭ регистрировали повышение протромбогенного потенциала крови относительно контроля с появлением признаков коагулопатии потребления: укорочение АЧТВ и протромбинового времени на 17,52 и 17,65 % (р<0,05) соответственно, увеличение фибриногена крови на 7,94 % (р<0,05), уменьшение антитромбина III на 11,10 % (р<0,05), снижение количества тромбоцитов на 15,11 % (р<0,05). Данные ТЭГ: увеличение показателей ɑ-угла, максимальной амплитуды и прочности сгустка на 25,26, 15,17 и 30,72 % (р<0,05) соответственно на фоне укорочения времени реакции и образования сгустка на 13,11 и 31,79 % (р<0,05) соответственно по сравнению с группой контроля. При тяжелом течении ПЭ аналогичные изменения всех вышеуказанных показателей были более выражены. Оценка полиморфизма генов тромбоцитарных интегринов и фибриногена у беременных с ПЭ: распространение мутантного аллеля С гена ITGB3 (Т1565С) отмечено в 17,3, 39,7 и 62,9 % (χ2=22,8,р<0,001)случаевсоответственновконтроле,первойивторойгруппах;аллеляТгенаITGA2(C807T) – в​ 9,6, 31,0 и 56,9 % (χ2=27,9, р<0,001) случаев соответственно; аллеля А гена FGB (G(–455)A) – 7,7,​ 33,3 и 60,3 % случаев соответственно (χ2=33,6, р<0,001). Гомозиготные варианты носительства мутантных аллелей в группе беременных с тяжелой ПЭ встречались достоверно чаще.

Заключение. Для ПЭ характерно значительное повышение протромбогенного потенциала крови, что сопряжено со степенью тяжести данного гипертензивного расстройства беременности. Вышеуказанные компоненты патогенеза ПЭ ассоциированы с высоким распространением мутантных вариантов генов тромбоцитарных интегринов и фибриногена, что является дополнительным фактором риска неблагоприятных исходов беременности.

ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА КЛЕТОЧНОГО СОСТАВА ГЕМОЛИМФЫ BLAPTICADUBIA

Гребцова Е. А.*, Присный А. А.

Белгородский государственный национальный исследовательский университет, г. Белгород

*e-mail: grebtsova_e@bsu.edu.ru

Введение. Отсутствие единых цитохимических тестов для классификации гемоцитов, а также разнообразие клеток у представителей различных отрядов насекомых приводит к затруднениям в идентификации и определении роли отдельных гемоцитарных типов. Анализ клеточного состава гемолимфы на разных этапах развития насекомого, особенно в такой уязвимый период как линька, позволяет увидеть более полную картину.

Методы. Исследованы гемоциты вида Blaptica dubia. Описаны данные по насекомым, прошедшим 4 линьки, а также имаго. Изучение нативных клеток, инкубированных в изотоническом растворе, проводили с помощью микроскопа Nikon Digital EclipseTi-E. Измерены линейные параметры гемоцитов и их структур: диаметр клеток, ядер, гранул; рассчитано ядерно-цитоплазматическое отношение. Измерения осуществляли с помощью программного обеспечения NIS-Elements. Второй этап связан с проведением цитохимических тестов. Выявление лизосом в гемоцитах проводили с помощью нейтрального красного красителя. Тест с альциановым синим при pH 1,0 позволил выявить высокосульфатированные мукополисариды в содержимом гранул сферулоцитов.

226

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

Результаты. Гемоциты имаго B. dubia предствлены семью типами: прогемоциты (Pr), плазмоциты (Pl), гранулоциты (Gr), сферулоциты (Sph), вермициты (Ver), коагулоциты (Co), серповидные клетки (Cr). Максимальное количество Pr зафиксировано у нимф 1 возраста (23,8 %), которое постепенно снижается и не превышает 7 % у имаго. Доля Pl у особей всех возрастов находится в пределах 10 13 %. Количество Gr растет с 18,3 % до 33,8 %. Заметное увеличение их числа зафиксировано после второй линьки.

Доля Sph наоборот имеет тенденцию плавно снижаться с 34,8 % у нимф 1 возраста до 25,6 % у имаго. Максимальноесодержаниеэтихклетокзафиксировановпервыесуткипослелиньки.КоличествоVerнаходитсявпределах 6,5 9 %,однакоданныйгемоцитарныйтипотмеченнеувсехособей.Повсейвидимости,этооднаизформплазмоцитов. Коагулоциты – ​самый немногочисленный и нестабильный тип клеток, их доля не превышает 7,7 % у насекомых любого возраста. Серповидные клетки – ​уникальный гемоцитарный тип, ранее описанный только у Gromphdorhina portentosa (Гребцова, 2017). Их доля в гемолимфе насекомых любого возраста редко достигает 7 %. Регулярный контроль гемоцитарного состава позволил установить наличие промежуточных форм клеток, которые имеют и признаки сферулоцитов, и признаки серповидных клеток. В этой работе нам впервые удалось установить происхождение Cr от Sph благодаря тесту на сульфатированные мукополисахариды.

РАЗРАБОТКА МИКРОФЛЮИДНЫХ СИСТЕМ ДЛЯ ТЕСТИРОВАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ

Гречаная Ю. С.1, Грязнова М. А.2, Тюрикова И. А.1, Скверчинская Е. А.2, Букатин А. С.3*

1Политехнический университет Петра Великого, Институт биомедицинских систем и биотехнологий, г. Санкт-Петербург 2Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И. М. Сеченова РАН, г. Санкт-Петербург 3Санкт-Петербургский Академический Университет им. Ж. И. Алфёрова РАН, г. Санкт-Петербург

*e-mail: antbuk.fiztek@gmail.com

Микрофлюидные технологии предоставляют новые возможности для биофизического фенотипирования одиночных клеток в условиях, имитирующих микроциркуляцию. Их главное преимущество – близкое​ соответствие микрофлюидных устройств, МФУ, биологическим структурам (свойство биомиметиков), хорошие условия для манипуляции потоками и составами растворов, высокая скорость сбора статистики. Оценка нарушений микрореологии крови является актуальной задачей для многих областей медицины – хирургии​ , хронических заболеваний, медицины катастроф. Для исследования эритроцитов человека разработаны различные топологии МФУ, которые позволяют регистрировать ключевые параметры эритроцитов, Эр, – форма​ в потоке и восстановление формы после сдвига, скорость транзита через узкие микроканалы, адгезия к стенкам микроканалов. Новые методы терапии как правило проходят тестирование на животных, однако в литературе практически нет данных о разработке МФУ для исследования поведения Эр в потоке у лабораторных животных.

Были разработаны несколько вариантов топологий микрочипов, с учетом размерных характеристик Эр крыс (45 65 фЛ). Нарушения деформируемости Эр вызывали при индукции окислительного стресса, ОС, трет-бутилпе- роксидом, tBOOH (модель Besedina et al., Cells, 2021). Видеофайлы движения Эр в микроканалах (микроскоп Leica, скоростная видеокамера, 800 fps) обрабатывали с помощью скрипта в MATLAB. При обращении с животными соблюдались нормы биоэтики.

Топология МФУ, биомиметик межэндотелиальных щелей синусов селезенки, с размерами микроканалов 1.5х0.7 1.2х15 мкм была выбрана как основной орган, рекрутирующий из циркуляции старые и изношенные Эр. Здоровые Эр крыс проходили микроканалы, а при обработке tBOOH регистрировали массовые окклюзии, что подтверждает соответствие МФУ биомиметику синусов селезенки. Вторая топология – биомиметик​ капиллярной сети (16 параллельных микроканалов, 2.5х8х200 мкм, показала и высокую чувствительность к нарушениям деформируемости Эр крыс при индукции ОС, и давала возможность оценить скорость клеток в потоке. Установлено, что при развитии ОС происходит накопление Эр с нарушениями микрореологии – возникает​ субпопуляция медленных клеток (бимодальное распределение). Цитологические изменения Эр крыс при индукции ОС были подтверждены методамипроточнойцитометрии.Такимобразом,былиразработаныипротестированыМФУ,пригодныедляоценки Эр в потоке у лабораторных крыс.

Финансовая поддержка: государственное задание ИЭФБ РАН № 075 00967 23 00.

ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ОЦЕНКИ ГЕМОРЕОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ КРОВИ НА ОСНОВЕ ГИСТОГРАММЫ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ КЛЕТОК КРОВИ ПО СКОРОСТЯМ

Гришачева Т. Г.1*, Петрищев Н. Н.1, Скедина М. А.2, Ковалева А. А.2

1Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И. П. Павлова, г. Санкт-Петербург

2 ГНЦ РФ-ИМБП РАН, г. Москва

е-mail: tgrishacheva@gmail.com

Известно, что скорость движения клеток крови в потоке колеблется в широких пределах и зависит от диаметра сосудов, вязкости крови, гематокрита и т. д.

227

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

Цель исследования – изучение​ влияния локальных изменений скорости кровотока в сосудах микроциркуляторного русла (МЦР) кожи и системных изменений гематокрита на диапазон скоростей форменных элементов крови

(ФЭК).

Опыты проводились на наркотизированных крысах сток Вистар. Гистограммы распределения клеток крови (ГРКК) по скоростям и показатели МЦР в коже определяли с помощью УЗ допплерографа («Минимакс-Допплер К», РФ). Системные изменения гематокрита моделировали путем гемодилюции и введения взвеси эритроцитов. Изменения скорости кровотока в коже вызывали путем локального нагревания +420С. Проводили исследования in vitro – моделирование​ изменений скорости движения крови и гематокрита, используя имитатор МЦР.

У интактных крыс (n=15) средняя систолическая скорость кровотока в сосудах МЦР кожи составляет Vas=0,283 см/с при следующих значениях ГРКК по скоростям: низкая – 47​ %, средне-низкая – 38​ %, средне-высо- кая – 4​ %, высокая – 0​ %. При системном снижении гематокрита (гемодилюция, n=9) скорость кровотока в сосудах МЦР кожи достоверно снизилась Vas=0,236 см/с (р=0,0283). Обращает на себя внимание увеличение ФЭК в диапазоне низких скоростей на 57,4 %. При экспериментальном эритроцитозе (гематокрит 60 %, n=6) скорость кровотока

всосудах МЦР кожи достоверно увеличилась Vas=0,36 см/с (р=0,0104), на 27,2 %. Увеличилось количество ФЭК

вдиапазоне средне-низких скоростей на 11,8 %. В зоне нагревания участка кожи крыс (n=5) линейная скорость достоверноувеличиваласьна41,3 %(р<0,05).Приэтомотмечаетсядостоверное(р<0,01)увеличениеФЭКвдиапазоне средне-высоких скоростей практически в четыре раза.

Вопытах in vitro на имитаторе МЦР соотношение скоростей ФЭК при одинаковом потоке крови и диаметре сосуда имитатора позволяет определить зависимость распределения клеток крови по диапазонам скоростей при разных гемодинамических условиях и, таким образом, определять взаимосвязь между гемодинамическими и реологическими свойствами крови.

Таки образом, как при действии системных факторов, влияющих на МЦР (гематокрит), так и при локальных изменениях(нагревание),соотношениемеждуклеткамикрови,двигающимисясразнойскоростью,изменяется.Это свидетельствует об адекватности оценки гемореологического состояния крови по ГРКК по скоростям.

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ТРОМБОЦИТОВ ПРИ СТИМУЛЯЦИИ АДФ

Пономаренко Е. А.1,2,*, Игнатова А. А.1, Полохов Д. М.1, Филькова А. А.1, Сунцова Е. В.1, Жарков П. А.1, Федорова Д. В.1, Писарюк А. С.3,4, Мерай И.3,4, Кобалава Ж. Д.3,4, Тухсанбоев Ё. С.3,4, Масчан А. А.1, Новичкова Г. А.1, Свешникова А. Н.1,2, Пантелеев М. А.1,2,5

1Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева Минздрава России, г. Москва

2Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова, г. Москва 3Городская клиническая больница им. В. В. Виноградова, г. Москва 4Медицинский институт Российского университета дружбы народов, г. Москва 5Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии РАН, г. Москва

*e-mail: pappe@bk.ru

Главной физиологической функцией тромбоцитов в организме человека является гемостатическая, для реализации которой тромбоциты располагают разнообразными механизмами. Их нарушения могут приводить к возникновению кровотечений или тромбозов, поэтому исследование функциональной активности тромбоцитов имеет и фундаментальное, и прикладное значение. Аденозин дифосфат (АДФ) является уникальным агонистом тромбоцитов: действуя через P2Y12 рецептор, он усиливает активирующее влияние других агонистов, а через P2Y1 рецеп- тор – ​стимулирует тромбоциты самостоятельно. Определение активности тромбоцитов при стимуляции АДФ имеет важное значение для пациентов, получающих двойную антиагрегантную терапию, поскольку недостаточное ингибирование приводит к развитию тромбов на стенте, а избыточное – ​к кровотечениям. Мы развели цельную кровь 1:20 в хепес-тиродном буфере. Для активации смесь 2,5 мкМ CaCl2 и 5 мкМ АДФ добавляли к тромбоцитам одновременно с антителами и инкубировали 15 мин. Мы определяли прямое и боковое светорассеяние, CD42b, CD61, PAC 1, связывание аннексина V и флуоресценцию мепакрина. Мы оценивали функцию тромбоцитов у 11 здоровых детей (3 месяца 16 лет), 22 здоровых взрослых добровольцев (19 30 лет), 9 пациентов после месяца на двойной антиагрегантной терапии, 7 взрослых пациентов и 6 детей с хронической иммунной тромбоцитопенией (ИТП). В покое пациенты на двойной антиагрегантной терапии практически не отличались от здоровых добровольцев, однако после активации у пациентов связывание PAC 1 и уровень экспрессии CD62p были в 3 раза ниже. У взрослых пациентов и детей с ИТП тромбоциты в покое имели повышенные в 2 раза уровни PAC 1 и CD62p, то есть были предактивированы. У пациентов ответ на стимуляцию АДФ был выше, чем у здоровых добровольцев и детей. Сравнивая влияние предактивации тромбоцитов здоровых доноров плазмой пациентов с ИТП и низкой дозой АДФ (1 мкМ) на их активационный ответ, мы обнаружили, что плазма пациентов с ИТП вызывала его усиление, а низкая доза АДФ –​  снижение. Следовательно, у пациентов с ИТП предактивация тромбоцитов не связана с действием АДФ. Таким образом, разработанный нами протокол исследования активационного ответа тромбоцитов на стимуляцию АДФ обладаетвысокойчувствительностьюкизменениямвфункциональнойактивноститромбоцитовподдействиемдвойной антиагрегантной терапии и потенциально может использоваться для ее мониторинга. Он также высокочувствителен

228

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

к предактивации тромбоцитов пациентов с ИТП и изменениям в их активационном ответе.

Финансовая поддержка: эндаумент фонд «Наука-детям».

ВЛИЯНИЕ ДИТРИМА НА ПОКАЗАТЕЛИ ЛЕЙКОЦИТАРНОЙ ФОРМУЛЫ У ПТИЦ

Потапова М. С.*, Артеменко О. А., Иванова А. О.

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», г. Белгород

*e-mail: potapova_m@bsu.edu.ruс

Дитрим – ​комбинированный препарат, содержащий в себе сульфадимезин (группа сульфаниламидов) и триметоприм. Сульфадимезин подавляет синтез фолиевой кислоты с помощью конкурентного антагонизма с парааминобензойной кислотой, в то время как триметоприм блокирует бактериальную редуктазу дегидрофолиевой кислоты, необходимой для выработки тетрагидрофолиевой кислоты. Дитрим, как и остальные представители сульфаниламидов обладает химиотерапевтической активностью против широкого спектра бактерий. Существуют сведения о том, что эта группа лекарственных средств является одной из лидеров по количеству проявления негативных реакций в организме после применения, в том числе может обуславливать нарушение гематологических реакций, вызывать агранулоцитоз и нейтропению. Тем не менее, в некоторых исследованиях установлено, что сульфаниламиды оказывают активизирующее действие на факторы неспецифической резистентности (Моисеева, 2023).

Для исследований использованы цыплята суточного возраста кросса Хайсекс-Браун, которые были сформиро- ванывдвегруппы.Группа I – контрольная​ ,которойдавалиобычнуюводу.Группа IIнапротяжении10сутокполуча- ла дитрим в дозе 200 мг/л. Отбор крови во всех группах осуществляли методом внутрисердечной пункции на 1, 3, 5, 7 и 9 сутки после отмены препарата. Полученные пробы крови стабилизировали 3,8 % цитратом натрия. Статистическая обработка цифрового материала проведена с использованием программы SPSS Statistic 17.0, достоверность полученных результатов оценивали при помощи непараметрического критерия Манна-Уитни.

В результате исследования установлено, что, несмотря на имеющуюся информацию о частоте возникновения нежелательных реакций после применения сульфаниламидов, значительного негативного воздействия на гематологические показатели цыплят не происходит. При этом, в группе II выявлена кратковременная эозинопения, установленная в последние сутки опыта, снижение данных составило 45 %, что, вероятно, все же не свидетельствует о серьезных нарушениях в физиологическом состоянии цыплят.

ХАРАКТЕРИСТИКА СТРЕСС-ЧУВСТВИТЕЛЬНОЙ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИИ: ОБЩИЙ АНАЛИЗ КРОВИ

Серяпина А. А.1,*, Политыко Ю. К.1, Малявко А. А.1, Себежко О. И.2

1Федеральный исследовательский центр Институт цитологии и генетики Сибирского отделения Российской академии наук, г. Новосибирск

2Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Новосибирский государственный аграрный университет», г. Новосибирск

*e-mail: seryapina@bionet.nsc.ru

Стресс-чувствительная артериальная гипертония крыс линии НИСАГ моделирует гипертоническую болезнь людей с учётом влияния на уровень артериального давления (АД) как генетической предрасположенности, так и средовых факторов. Регуляция АД сложна и многообразна, поэтому как изучение патогенеза артериальной гипертонии (АГ), так и разработка методов диагностики и лечения требуют комплексного подхода. В данной работе рассмотрены результаты общего анализа крови крыс НИСАГ с целью охарактеризовать стресс-чувствительную АГ.

Экспериментальные животные – самцы​ крыс линии НИСАГ с наследственной индуцированной стрессом артериальной гипертонией (n=10) и контрольной нормотензивной линии WAG (n=10) в возрасте 3 4 месяцев – содер​ - жались в стандартных условиях конвенционального вивария ИЦиГ СО РАН (Новосибирск). Общий анализ крови проводили на базе лаборатории эколого-ветеринарной генетики и биохимии Новосибирского государственного аграрного университета на полуавтоматическом анализаторе Photometer 5010V5 (ROBERT RIELE, Germany). Статистическая обработка данных (one-way ANOVA, Tukey post-hoc) проводилась с использованием пакета программ Statistica 8. Значения при р<0.01 считали статистически значимыми.

У гипертензивных крыс НИСАГ по сравнению снормотензивным контролем было обнаружено повышенное количество лейкоцитов (в основном за счёт лимфоцитов и моноцитов) и пониженное – эритроцитов​ . При этом средний объём и ширина распределения эритроцитов в крови гипертензивных крыс были повышены, как и среднее содержание гемоглобина в эритроците. Общий уровень гемоглобина в крови и гематокрит не имели достоверных межлинейных различий. Концентрация железа и общая железосвязывающая способность сыворотки также не различались.

Совокупность гематологических характеристик крови крыс НИСАГ позволяет предположить участие хронических воспалительных процессов в развитии стресс-чувствительной АГ.

Финансовая поддержка: грант № 22 25 20025 Российского научного фонда совместно с Министерством науки Новосибирской области (соглашение № р 36 от 06.04.2022).

229

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

ВЛИЯНИЕ ВИТАМИНА ПАРААМИНОБЕНЗОЙНОЙ КИСЛОТЫ НА КОЛИЧЕСТВО ОБЩЕГО БЕЛКА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ У КРОЛИКОВ ПОРОДЫ «СЕРЕБРИСТЫЙ» В ОСЕННЕ-ЗИМНИЙ СЕЗОН ГОДА

Смолин С. Г.*, Бабин Н. А.

Красноярский государственный аграрный университет, г. Красноярск

*e-mail: Smolin@mail.ru, e-mail: n. a.babin@mail.ru

Экспериментальные и лабораторные исследования проводили на базе ЛПХ кролиководческой фермы вп. Камарчага Манского района Красноярского края, в физиологической лаборатории ИПБ и ВМ Красноярского государственного аграрного университета, кафедры внутренних и незаразных болезней, акушерства и физиологии сельскохозяйственных животных. Материалом для исследования служили кролики породы «Серебристый». Были сформированы две группы кроликов – контрольная​ и опытная по 10 голов в каждой группе в каждый сезон года. Содержание, взятие крови ипроведение экспериментов проводились согласно биоэтическим нормам. Впериод проведения опыта кролики содержались в ЛПХ на кролиководческой ферме в специальных клетках на открытом воздухе. Контрольная группа кроликов получала основной рацион, представленный водой, сеном и комбикормом полнорационным для кроликов

визмельченной, наилучшей для усвоения форме ввиде гранул: П3К91 ГОСТ 32897 2014, изготовитель ЗАО «Алейскзернопродукт» имени С. Н. Старовойтова. Врацион опытной группы животных втечение 10 дней добавляли парааминобензойную кислоту вдозе 10мг на 1кг живой массы 1 раз всутки вутреннее кормление. После взятия крови укроликов ее направляли вНаучно-исследовательский испытательный центр ФГБОУ ВО Красноярского ГАУ по контролю качества с/х сырья ипищевых продуктов, где всыворотке крови определяли количество общего белка.

Установлено, что в осенний период года в возрасте 2 месяцев у кроликов опытной группы содержание общего белка было выше на 11 % (р<0,05), в возрасте 3 месяцев – ​на 5 % (р<0,05), а в возрасте 4 месяцев – ​на 17 % (р<0,05) по сравнению с контрольной. В зимний период года у кроликов 2-месячного возраста содержание общего белка

всыворотке крови в опытной группе было выше, чем в контрольной группе на 4 %, в возрасте 3 месяцев – ​на 16 % (р<0,05), а в 4-месячном возрасте – ​на 11 % (р<0,05). Содержание общего белка за весь период в контрольных группах было ниже, чем в опытных группах. Добавление витамина парааминобензойной кислоты в рацион кормления кроликов породы «Серебристый» в дозе 10 мг на 1 кг живой массы в течение 10 дней оказывает благоприятное влияние на усвояемость белков корма, повышая уровень общего белка в крови в пределах физиологических норм, что положительным образом сказывается на приросте живой массы кроликов. Повышение количества общего белка

всыворотке крови опытной группы кроликов является свидетельством более эффективных окислительно-восстано- вительных процессов организма.

ВЛИЯНИЕ ОКСИДА АЗОТА И СЕРОВОДОРОДА НА ДЕФОРМИРУЕМОСТЬ ЭРИТРОЦИТОВ КРЫСЫ И НЕКОТОРЫЕ МЕХАНИЗМЫ ИХ ДЕЙСТВИЯ

Фадюкова О. Е.*, Кошелев В. Б.

Московский государственный университет имени М. В. Ломоносова, г. Москва

*e-mail: olefa@hotmail.ru

Введение. Способность эритроцитов деформироваться позволяет им проникать в капилляры и обеспечивать адекватное кровоснабжение органов и тканей. На ДЭ в кровотоке могут оказывать влияние эндогенные газообразные биорегуляторы, в их числе сероводород (H2S) и оксид азота (NO), образующиеся и высвобождающиеся из тканей кровеносных сосудов и из самих клеток крови. Поэтому целью исследования стал анализ эффектов донора сероводорода NaHS и донора оксида азота нитропруссида натрия (SNP) на параметры ДЭ крысы в опытах in vitro. а также определение возможных молекулярных механизмов их действия.

Методы исследования. Пробы крови крыс, полученные под анестезией из нижней полой вены (ЭДТА, 2 мг/ мл), инкубировали с NaHS (6•105 M) или SNP(107 М) в течение 15 мин при 370С. Неселективный блокатор хлорных CFTR-каналов глибенкламид (5•106 М), или неспецифический блокатор Са2+-зависимых калиевых каналов тетраэтиламмоний хлорид (ТЭА, 103 М), или специфический блокатор Са2+-зависимых калиевых каналов клотримазол (2•106 и2•105 М)добавляливпробыкровиза10миндоинкубацииихсдонорамигазотрансмиттеров.ДЭоценивали с помощью лазерного агрегометра-деформометра эритроцитов «РеоАДВ-КФ». Определяли индекс деформируемости эритроцитов (ID) при разных скоростях сдвига и параметры деформируемости эритроцитов: предел текучести мембраны lnγ0, характеризующий ее жесткость; tg(α), характеризующий вязкость внутриклеточного содержимого эритроцита; и IDmax при скорости сдвига 3065 с1.

Результаты. NaHS снижал параметры ДЭ lnγ0 на 5 6 % и tg(α) на 5 % по сравнению с контрольной пробой также как и SNP, который уменьшал lnγ0 на 4 7 % (p<0,05). Когда пробы крови инкубировали одновременно с NaHS и SNP, изменение параметров ДЭ было меньше, чем при раздельном их применении. В присутствии глибенкламида снижение параметров ДЭ в ответ на NaHS исчезало практически полностью (p<0,05), тогда как в ответ на SNPтолько частично. ТЭА и клотримазол подавляли изменения параметров ДЭ в ответ на NaHS и на нитропруссид натрия

(p<0,05).

230

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/