6 курс / Медицинская реабилитация, ЛФК, Спортивная медицина / Молекулярные_и_физиологические_механизмы_старения_в_2_т_,_Т_2_Анисимов
.pdfЧасть V. Модифицирующие факторы старения как средства для изучения его механизмов
Рис. 15.9. Метформин угнетает экспрессию Cyclin D1, HER2, E2F1 и передачу сигнала ErbD2 в MCF7/713 (Alimova et al., 2007).
et al., 2005). В опытах на мышах NMRI обнаружено, что диабенол не влиял на динамику веса тела, поглощение корма и жидкости, температуру тела. Препарат тормозил возрастные нарушения эстральной функции, уменьшал смертность животных, увеличивал показатели продолжительности жизни самок, в особенности среднюю продолжительность жизни 10 % максимально проживших мышей (с 480 до 504 дней). У подопытных животных, полу- чавших препарат, по сравнению с интактным контролем средний латентный период развития опухолей молочных желез увеличивался с 259 до 328 дней, снижались количество мышей с метастазами этих опухолей в легких и частота злокачественных лимфом (табл. 15.8).
Влияние диабенола на показатели гомеостаза у мышей HER-2/neu выражалось в замедлении появления возрастных нарушений эстральной функции. Препарат не оказывал значительного влияния на продолжительность жизни животных. У трансгенных мышей, получавших диабенол, отмечена тенденция к уменьшению частоты метастазирования рака молочной железы в легких (с 48.3 до 35.7 %) и максимального диаметра метастазов. Полученные данные свидетельствуют об отсутствии токсического и канцерогенного эффекта диабенола и наличии у диабенола геропротекторных свойств. Следует отметить, что введение диабенола оказывало отчетливое угнетающее влияние на канцерогенез толстой кишки, индуцируемый у крыс 1,2-диме- тилгидразином (Popovich et al., 2005).
181
Â.Н. Анисимов
Òà á ë è ö à 15.8
Влияние диабенола на показатели продолжительности жизни и развитие спонтанных опухолей у самок мышей линии NMRI (Popovich et al., 2004)
Показатели |
Контроль |
Диабенол |
|
|
|
Количество мышей |
50 |
50 |
Средняя продолжительность жизни, сут. |
346 11.9 |
369 12.9 |
Медиана |
371 |
385 |
Средняя продолжительность жизни 10 % максималь- |
480 9.2 |
504 6.4* |
но проживших мышей, сут. |
|
|
Максимальная продолжительность жизни, сут. |
511 |
518 |
a, ñóò.–1 |
0.0140 |
0.0136 |
|
(0.0139; 0.0157)a |
(0.0133; 0.0145) |
MRDT, ñóò. |
49.62 |
51.09 |
|
(44.13; 49.85) |
(47.94; 51.99) |
Количество мышей |
50 |
50 |
Количество мышей с опухолями, % |
25 (50 %) |
17 (34 %) |
Количество мышей с ОМЖ, % |
21 (42 %) |
16 (32 %) |
Возраст обнаружения 1-й опухоли молочной железы |
176 |
273 |
(ÎÌÆ), ñóò. |
|
|
Средний латентный период ОМЖ, сут. |
259 13.8 |
328 12.4** |
Общее количество ОМЖ |
26 |
21 |
Множественность ОМЖ, количество ОМЖ/мышь |
1.24 0.1 |
1.31 0.12 |
Максимальный диаметр ОМЖ, см |
2.51 0.21 |
2.50 0.25 |
Количество мышей с метастазами ОМЖ в легкие, % |
5 (10 %) |
0* |
Количество мышей со злокачественными лимфомами |
4 (8 %) |
1 (2 %) |
П р и м е ч а н и е. Константа a в уравнении Гомпертца: R = R0(exp)at, ãäå R0 = смертность во время t = 0; MRDT — время удвоения силы смертности (mortality rate doubling time). à — в скобках — 95%-ный доверительный интервал. Различие с соответствующим показателем для контрольной группы статистиче- ски достоверно, * — p < 0.05; ** — p < 0.01.
В связи с приведенными выше данными необходимо указать, что при изучении противодиабетической активности диабенола ранее была показана способность исследуемого препарата восстанавливать физиологический профиль секреции инсулина, снижать резистентность тканей к инсулину, улучшать утилизацию глюкозы периферическими тканями и пролонгировать гипогликемический эффект инсулина. Показано нормализующее действие диабенола на периферическую утилизацию глюкозы при использовании моделей инсулинрезистентности различного генеза (экзогенной гиперинсулинемии и ожирения у старых животных, сопровождающихся повышенным содержанием гормона в организме), что в первую очередь может быть связано с улучшением чувствительности тканей к инсулину (Popovich et al., 2005). Все это подтверждает предположение о том, что эффект диабенола обусловлен несколькими механизмами, как панкреотропными, так и экстрапанкреатическими. Есть основания полагать, что отмеченные
182
Часть V. Модифицирующие факторы старения как средства для изучения его механизмов
Ò à á ë è ö à 15.9
Механизм действия антидиабетичсеких бигуанидов (Anisimov, 2003)
Влияние на метаболические |
Влияние на гомеостатическую |
Влияние на возрастную |
||||
параметры |
|
регуляцию |
патологию |
|||
|
|
|
||||
Снижает избыток инсулина при |
Увеличивает чувствительность |
Тормозит развитие атеро- |
||||
глюкозной нагрузке у лиц с |
гипоталамо-гипофизарной |
склероза |
|
|||
ожирением и диабетом |
|
системы к торможению эст- |
|
|
||
|
|
|
рогенами |
|
|
|
Уменьшает уровень IGF-1 в сы- |
Восстанавливает функцию |
Тормозит развитие спон- |
||||
воротке крови |
|
яичников у старых крыс |
танных опухолей |
|||
Угнетает глюконеогенез в пече- |
Увеличивает |
чувствитель- |
Снижает артериальное дав- |
|||
íè |
|
|
ность гипоталамо-гипофи- |
ление у пациентов с ги- |
||
|
|
|
зарной системы к торможе- |
пертензией |
|
|
|
|
|
нию глюкокортикоидами |
|
|
|
Снижает уровень холестерина и |
Изменяет гипоталамическую |
Увеличивает |
фибриноли- |
|||
триглицеридов в сыворотке |
регуляцию пищевого пове- |
тическую ативность кро- |
||||
крови |
|
|
дения |
|
âè |
|
Повышает чувствительность тка- |
Увеличивает |
высвобождение |
Улучшает показатели кле- |
|||
ней к инсулину |
|
дофамина |
в мезолимбиче- |
точного иммунитета у |
||
|
|
|
ских структурах мозга |
людей |
|
|
Увеличивает |
утилизацию |
глюСнижает активность моноамиУменьшает |
иммуноде- |
|||
êîçû |
|
|
нооксидазы |
прессивный эффект си- |
||
Уменьшает |
метаболизм |
õîëå- |
|
|
льных канцерогенов |
|
стерина в фибробластах чело- |
|
|
|
|
||
âåêà |
|
|
|
|
|
|
Снижает концентрацию холестерина в лимфоцитах и тромбоцитах
механизмы могут быть ответственными за геропротекторные и антиканцерогенные свойства диабенола.
В совокупности имеющиеся данные позволяют рассматривать применение антидиабетических средств с учетом их химической природы и механизма действия (табл. 15.9) в качестве перспективного направления в области профилактики ассоциированной с возрастом патологии. В клинических наблюдениях было установлено, что применение антидибетических бигуанидов улучшает 5- и 10-летнюю выживаемость онкологических больных (Berstein, 2005) и снижает риск развития рака молочной железы у больных сахарным диабетом 2-го типа (Evans et al., 2005). В ряде исследований показано, что применение метформина снижает на 36 % общую смертность у людей, смертность от инфарктов миокарда (на 39 %) и на 42 % смертность от осложнений сахарного диабета (Scarpelli, 2003; Eurich et al., 2005).
Данные литературы и результаты наших исследований свидетельствуют о перспективности использования антидиабетических бигуанидов как для профилактики и лечения опухолей, так и в качестве геропротекторов. Таким образом, в опытах на крысах и мышах нами выявлен геропротекторный
183
Â.Н. Анисимов
Òà á ë è ö à 15.10
Влияние антидиабетических бигуанидов на канцерогенез у грызунов*
Âèä |
Препарат |
Канцероген |
Основная локализация |
Эффект |
|
опухолей |
|||||
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
Ìûøè |
Фенформин |
Спонтанные опухоли |
Молочная железа |
|
|
|
Òî æå |
ÌÕ |
Подкожные опухоли |
|
|
Крысы |
Буформин |
Спонтанные опухоли |
Общая частота |
|
|
|
Фенформин |
Спонтанные опухоли |
Òî æå |
|
|
|
Òî æå |
ÄÌÁÀ |
Молочная железа |
|
|
|
» » |
ÍÌÌ |
Òî æå |
|
|
|
Буформин |
ÄÌÁÀ |
» » |
|
|
|
Òî æå |
НММ, трансплацентарно |
Нервная система |
|
|
|
Фенформин |
НЭМ, трансплацентарно |
Нервная система, почки |
|
|
|
Òî æå |
ÄÌÃ |
Толстая кишка |
|
|
|
» » |
Общее рентгеновское облу- |
Общая частота |
|
|
|
|
чение |
|
|
|
Хомячки |
Метформин |
НБОПА |
Поджелудочная железа |
|
П р и м е ч а н и е. ДМБА — 7, 12-диметилбенз(а)антрацен; ДМГ — 1,2-диметилгидразин; МХ — 20-метилхолантрен; НБОПА — N-нитрозо-бис(2-оксопропил)амин; НММ — N-нитрозометилмочевина; НЭМ — N-нитрозоэтилмочевина. * — полная библиография цитированных работ приведена в работах (Anisimov, 1987, 2006).
эффект антидиабетических бигуанидов, сопровождавшийся снижением частоты развития спонтанных опухолей. Наши результаты соответствуют наблюдениям американских исследователей, использовавших крыс и мышей других линий и также не обнаруживших канцерогенного эффекта фенформина. Следует отметить, что антидиабетический препарат толбутамид (производное сульфонилмочевины) при хроническом введении крысам и мышам не оказывал влияния на продолжительность жизни животных и частоту развития у них спонтанных опухолей (Anisimov, 1987). На различных моделях химического и радиационного канцерогенеза установлено, что фенформин и буформин тормозят развитие опухолей различных гистогенеза и локализаций. Этот эффект проявлялся не только в снижении частоты опухолей, но и в увеличении латентного периода их развития (Anisimov, 1987) (табл. 15.10). Показано, что фенформин угнетает in vitro пролиферацию клеток рака предстательной железы LNCaP и клеток нейробластомы SH-SY5Y человека (Caraci et al., 2003). В опытах с перевиваемыми опухолями выявлено тормозящее действие феноформина на рост карциномы Эрлиха (Dilman, 1994) и потенцирует цитостатический эффект на перевиваемый рак шейки матки SCC, гепатому-22а и карциному легкого Льюис (Dilman, Anisimov, 1979). Установлено, что метформин уменьшает проявления окислительного стресса, вызываемого адриамицином и его мутагенный эффект (Aleisa et al., 2007).
Сравнение эффектов, вызываемых ограничением калорийности диеты и антидиабетическими препаратами, показывает, что последние имеют
184
Часть V. Модифицирующие факторы старения как средства для изучения его механизмов
Ò à á ë è ö à 15.11
Сравнительные характеристики у грызунов при нормальном старении, ограничении калорийности питания
и воздействии антидиабетических бигуанидов (Anisimov et al., 2005)
|
|
|
|
|
|
|
Àíòè- |
|
Старе- |
|
Ìûøè |
GHR–/– |
Igf1r+/– |
|
диабети- |
Параметры |
ÎÊÄ |
FIRKO |
ческие |
||||
|
íèå |
|
Эймса |
|
|
|
бигуа- |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
íèäû |
|
|
|
|
|
|
|
|
Продолжительность жизни |
|
+40—50 % |
50 % |
46 % |
+33 % |
+18 % |
+20 % |
Толерантность к глюкозе |
|
|
|
|
a |
= èëè |
|
Чувствительность к инсу- |
|
|
|
|
|
â æè- |
|
ëèíó |
|
|
|
|
|
ровой |
|
|
|
|
|
|
|
ткани |
|
Уровень в плазме: |
|
|
|
|
|
|
|
инсулин |
|
|
|
|
= |
|
|
гормон роста |
|
|
0 |
|
ÍÄ |
|
|
IGF-1 |
|
|
|
|
|
|
|
Размеры тела |
|
|
|
|
|
|
|
Содержание жира |
|
|
|
ÍÄ |
|
|
|
Репродуктивная функция |
|
b |
b |
b |
=b |
ÍÄ |
|
Тиреоидная функция |
|
|
|
|
= |
ÍÄ |
|
Кортикостерон в сыворотке |
|
|
= |
= |
ÍÄ |
ÍÄ |
|
Иммунная функция |
|
|
= èëè |
ÍÄ |
ÍÄ |
ÍÄ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Резистентность к окисли- |
|
|
|
|
|
|
|
тельному стрессу |
|
|
|
|
|
|
|
Частота опухолей |
|
|
= èëè |
= |
= |
ÍÄ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
П р и м е ч а н и е. — снижение; — увеличение; = нет эффекта; 0 — отсутствует; НД — нет данных. a — Толерантность к глюкозе увеличивалась у самок, но уменьшалась у самцов. b — Репродуктивная функция по отношению к нормально стареющим мышам.
ряд очевидных преимуществ перед ограниченным калорийно питанием и могут рассматриваться как миметики последних (табл. 15.11) (Ingram et al., 2006).
15.12.МЕЛАТОНИН
15.12.1.Опыты на мышах
Впервые способность мелатонина увеличивать продолжительность жизни мышей была установлена W. Pierpaoli и G. J. M. Maestroni (Pierpaoli, Maestroni, 1987). В ноябре 1985 г. авторы начали ежедневные введения мелато-
185
В. Н. Анисимов
нина с питьевой водой (10 мг/л) 10 самцам мышей линии C57BL/6J. 10 контрольных животных получали 0.01 % раствор этанола, служивший растворителем для мелатонина. В начале опыта возраст мышей составлял 575 дней (около 19 месяцев), и все они были вполне здоровы. Мелатонин животные получали с 18.00 до 8.30 ч. Через 5 месяцев после начала опыта контрольные животные стали терять в весе, были малоактивны, облысели. Введение мелатонина предохраняло животных от возрастной потери веса, и он сохранялся на уровне 18-месячных. Средняя продолжительность жизни мышей под влиянием мелатонина увеличилась на 20 %, составив 931 ± 80 дней против 752 ± 81 дней в контрольной группе. По расчетам авторов различие достоверно (р < 0.01, при вариантном анализе). Однако при расчете по критерию t Стьюдента, различие оказывается незначимым (t = 1.57;
ð< 0.05).
Â1991 г. W. Pierpaoli и соавт. представили результаты трех серий опытов с хроническим введением мелатонина мышам различных линий. Во всех опытах мелатонин вводили только в ночное время с питьевой водой (10 мг/л). 15 самкам мышей линии С3Н/Не мелатонин начинали вводить с 12-месячного возраста. В контрольной группе было 14 мышей. Мелатонин не только не увеличил продолжительность жизни этих мышей, но привел к увеличению частоты развития новообразований, преимущественно поражавших органы репродуктивной системы (лимфоили ретикулосаркомы, карциномы яичников). Данные о средней продолжительности жизни и частоте новообразований в контрольной и подопытной группах не были приведены. Следует отметить, что самок мышей линии С3Н/Не характеризует высокая частота развития спонтанных опухолей молочной железы (Storer, 1966), однако авторы не сообщают каких-либо сведений об их обнаружении в контрольной или подопытной группах. Мыши, получавшие мелатонин, жили в среднем на 2 месяца меньше контрольных. На 2 месяца была короче и максимальная продолжительность жизни мышей, которым вводили мелатонин.
Во 2-й серии опытов мелатонин вводили в дневное или ночное время мышам-самкам линии NZB (New Zealand Black), характеризующихся высокой частотой развития аутоиммунной гемолитической анемии, нефросклероза и системных или локализованных ретикулоклеточных опухолей типа А или В. В каждой группе было по 10 животных, и мелатонин начинали вводить с четырехмесячного возраста. Введение мелатонина днем не оказывало влияния на выживаемость мышей, и все они погибли к 20-месячному возрасту (в контроле — к 19-му месяцу жизни). При введении мелатонина в ночные часы в возрасте 20 месяцев были живы 4 из 10 мышей этой группы, а до 22-месячного возраста дожили 2 мыши. Последняя мышь прожила 2 месяца, т. е. на 4 месяца больше максимальной продолжительности жизни в контрольной группе. Авторы не наблюдали каких-либо различий в причи- нах смерти в контрольной и подопытных группах.
Третья серия опытов была повторением опыта с мышами-самцами линии C57BL/6. На этот раз в контрольной группе было 20, а в подопытной —
186
Часть V. Модифицирующие факторы старения как средства для изучения его механизмов
15 мышей в возрасте 19 месяцев. Средняя продолжительность жизни в контроле составила 743 ± 84 дня, а в группе, получавшей мелатонин, 871 ±118 дней (р < 0.001 по данным авторов и t = 0.8; р < 0.05 при расчете с использованием критерия t Стьюдента). Введение мелатонина не сказывалось существенно на весе тела мышей в ту или иную сторону при сравнении с контролем.
Позднее W. Pierpaoli и W. Regelson (1994) обобщили старые данные и представили результаты новых экспериментов по изучению влияния мелатонина на продолжительность жизни мышей разных линий. Мелатонин вводили с питьевой водой (10 мг/л) в ночные часы (с 18.00 до 8.30 ч). Самкам мышей BALB/c гормон начинали вводить с 15-месячного возраста. Средняя продолжительность жизни 26 контрольных животных составила 715 дней, тогда как получавшие мелатонин 12 мышей жили в среднем 843 дня, т. е. на 18 % дольше. Медиана составила соответственно 24.8 месяца в контроле и 28.1 месяца в подопытной группе, а максимальная продолжительность жизни — 27.2 и 29.4 месяца соответственно. Авторы не наблюдали каких-либо различий в весе тела между мышами обеих rpyпп. В другом опыте мелатонин вводили также с питьевой водой в ночные часы в дозе 10 мг/л самцам мышей BALB/c начиная с 18-месячного возраста и убивали группами через 4, 7 и 8 месяцев после начала воздействия. Через 8 месяцев наблюдения вес тимуса, надпочечников и тестикул мышей, получавших мелатонин, существенно отличался от одновозрастного контроля. Аналогичным образом улуч- шались такие показатели, как число лимфоцитов в периферической крови, уровень цинка, тестостерона и тиреоидных гормонов. Авторы полагают, что циклическое введение мелатонина оказывает положительное влияние на мышей, поддерживая в них более молодое состояние эндокринных и ти- мико-лимфоидных органов. Следует отметить, что число старых мышей в группах было крайне невелико (5—6), а контрольная группа 3-месячных мышей включала только 3 животных.
S. P. Lenz и соавт. (1995) вводили мелатонин самкам мышей NZB/W в инъекциях в разовой дозе 100 мкг на мышь (2—3.5 мг/кг) ежедневно в утренние часы (между 08.00 и 10.00 ч) или вечером (между 17.00 и 19.00 ч) начиная с 8-месячного возраста и в течение 9 месяцев. В каждой группе было по 15 животных. Было установлено, что введение мелатонина в утренние часы существенно (р < 0.001) увеличивает выживаемость мышей, тогда как вечерние инъекции таким эффектом не обладали. Так, если до 34-недельно- го возраста дожило только 20 % контрольных мышей, в «утренней» группе были живы 65 % животных, причем 30 % дожили до конца периода наблюдения (44 недели). В «вечерней» группе до 34-недельного возраста дожило практически столько же (60 %) мышей, однако 37-недельный возраст пережили лишь 20 % животных. Авторы отметили замедление возрастного нарастания протеинурии у мышей, которым мелатонин вводили в утренние часы. К сожалению, наблюдение за животными было прекращено до естественной гибели животных во всех группах. Число мышей в группах было весьма невелико, полная аутопсия животных не производилась.
187
Â.Н. Анисимов
E.Mocchegiani и соавт. (1998) вводили мелатонин с питьевой водой (10 г/л) в ночные часы 50 самцам мышей линии Balb/c начиная с 18-месяч- ного возраста. 50 мышей другой группы получали воду с добавлением сульфата цинка (22 мг/л) и 50 служили интактным контролем. За мышами наблюдали до естественной гибели, их регулярно взвешивали и определяли потребление корма. Применение мелатонина и цинка существенно сдвигало вправо кривые выживаемости животных и увеличивало на 2 и 3 месяца соответственно максимальную продолжительность жизни животных по сравнению с интактным контролем. Ни мелатонин, ни цинк не влияли на потребление корма и динамику веса тела животных.
A. Conti и G. J. M. Maestroni (1998) изучали влияние мелатонина на продолжительность жизни самок мышей линии NOD (non-obese diabetic), характеризующихся высокой частотой развития инсулинзависимого диабета. Одной из групп мышей (n = 25) была произведена эпифизэктомия сразу после рождения, 2-я группа (n = 30) получала мелатонин подкожно в дозе 4 мг/кг в 16.30 ч 5 раз в неделю начиная с возраста 4 недели и до 38-й недели жизни. Мышам 3-й группы по такой же схеме вводили подкожно бычью сыворотку (PBS) и они служили контролем к группе 2. Мышам 4-й группы (n = 17) мелатонин вводили с питьевой водой (10 мг/л) в ночные часы 5 раз
âнеделю с 4-й по 38-ю неделю жизни, 5-ю группу составили 29 интактных животных. Эпифизэктомированные мыши начали погибать уже в возрасте 19 недель, аутоиммунный диабет у них быстро прогрессировал, и к 32 неделе жизни 92 % всех животных этой группы погибли. В контроле мыши на- чали погибать с 18-й недели жизни, однако наклон кривой выживаемости был существенно меньшим, и к 50-й неделе жизни вымерло 65.5 % контрольных животных. При хроническом подкожном введении мелатонина в течение 33 недель существенно замедлялась скорость развития болезни и снижалась смертность. До возраста 50 недель не дожило только 10 % мышей, которым подкожно вводили мелатонин. Интересно, что инъекции бычьей сыворотки также замедляли развитие диабета, однако до возраста 50 недель дожило лишь 32 % мышей этой группы. Эффект введения мелатонина с питьевой водой был менее выражен, чем при его подкожном введении: до конца срока наблюдения дожило 58.8 % мышей этой группы против 34.5 % в контроле (р < 0.0019). Таким образом, если эпифизэктомия ускоряла развитие диабета и укорачивала продолжительность жизни мышей линии NOD, то введение мелатонина замедляло развитие заболевания и увеличивало продолжителньость жизни животных (Conti, Maestroni, 1998).
Âдругом большом исследовании мелатонин с кормом (11 ррm или 68 мкг/кг веса тела в день) давали самцам мышей линии C57BL/6 начиная с 18-месячного возраста (Lipman et al., 1998). Динамика веса тела и потребления корма под влиянием мелатонина существенно не отличалась от таковой у контрольных животных. Не наблюдалось также никаких различий в смертности в группе контрольных мышей и мышей, получавших с кормом мелатонин. Так, 50%-ная смертность в контроле наступала в возрасте 26.5 меся-
188
Часть V. Модифицирующие факторы старения как средства для изучения его механизмов
ца, а при введении мелатонина — в 26.7 месяца. Кривые смертности, а также данные о максимальной продолжительности жизни животных в разных группах в работе не представлены. Более того, их убивали в возрасте 24 месяцев (когорта 1) либо в возрасте, когда умирала половина всех животных в группе (возраст 50%-ной смертности), т. е. через 6 или 8.5 месяца после на- чала опыта (когорта 2). Последнюю, 3-ю когорту составили мыши, которые пали ранее двухлетнего возраста или до достижения возраста 50%-ной смертности. В 1-й когорте было по 20 контрольных и получавших мелатонин мышей, во 2-й соответственно 7 и 13 мышей, а в 3-й соответственно 38 и 30 животных в группе. В этих трех когортах раздельно оценивалась частота развившихся патологических процессов. Авторы не обнаружили ка- ких-либо различий в общей частоте патологических процессов между мышами контрольной группы и получавшими мелатонин. Однако такой вывод, на наш взгляд, не вполне корректен и опровергается данными, представленными в статье. Так, авторы объединили под одной рубрикой все патологические процессы, включая дегенеративно-атрофические, лимфопролиферативные, и новообразования. Вместе с тем, если частота лимфом среди мышей контрольной группы и группы, получавшей мелатонин (3-я когорта), была одинаковой (21.1 и 23.3 % соответственно), то среди доживших до срока 50%-ной смертности она составила 28.6 и 77.9 % соответственно. Вызывает крайнее удивление отсутствие какого-либо упоминания о лимфомах у мышей в 1-й когорте, т. е. умерщвленных в возрасте 24 месяца, что лишь на 2.5—3 месяца меньше, чем в когорте 2, притом что у павших до этого срока лимфомы выявлялись в 21—23 % случаев. В статье полностью отсутствуют сведения о новообразованиях других локализаций у мышей различных групп. Приходится констатировать, что работа Lipman и соавт. (1998) содержит ряд серьезных методических ошибок, которые ставят под сомнение результаты всей работы и ее выводы.
В наших опытах (Anisimov et al., 2001a) 50 подопытным самкам мышей линии СВА начиная с шестимесячного возраста курсами (5 дней подряд раз в месяц) вводили с питьевой водой мелатонин (20 мг/л). 50 интактных самок служили контролем. За животными наблюдали до их естественной гибели. Ежемесячно мышей взвешивали, определяли количество потребленного корма. Каждые три месяца исследовали эстральную функцию, мышечную силу, утомляемость, двигательную активность мышей, а также измеряли температуру тела. Всех животных вскрывали. Обнаруженные опухоли исследовали гистологически. Было установлено, что длительное введение мелатонина самкам мышей СВА замедляло у них возрастные изменения эстральной функции и не оказывало сколько-нибудь неблагоприятного влияния на их физическую активность. В ходе эксперимента было установлено, что у мышей контрольной группы температура тела не падала, а на 9-м месяце опыта была достоверно выше по сравнению с 6-м месяцем. У мышей, получавших мелатонин, напротив, температура тела в ходе всего эксперимента достоверно снижалась (p < 0.001). Сходная тенденция отме- чена также при измерении средней температуры отдельных фаз эстрального
189
В. Н. Анисимов
Рис. 15.10. Влияние мелатонина на продолжительность жизни самок мышей CBA с фатальными опухолями.
По оси абсцисс — возраст, сут.; по оси ординат — доля выживших мышей. Штриховая линия — контроль; сплошная линия — мелатонин.
цикла. Однако различий между значениями температуры отдельных фаз цикла практически не было. Только у мышей подопытной группы на 3-м месяце опыта температура во время эструса была достоверно выше, чем во время метаэструса и проэструса (p < 0.05).
Данные о влиянии мелатонина на продолжительность жизни мышей представлены на рис. 15.10. Можно видеть, что динамика выживаемости не различалась в обеих группах до возраста 22 месяца, после чего наблюдалось отчетливое уменьшение смертности под влиянием мелатонина. Если к двухлетнему возрасту не осталось в живых ни одной контрольной мыши, то мышей, получавших мелатонин, было 9. Таким образом, кривая выживаемости мышей, получавших мелатонин, была смещена вправо по сравнению с кривой выживаемости контрольных мышей. Средняя продолжительность жизни мышей в обеих группах достоверно не различалась, тогда как максимальная продолжительность жизни под воздействием мелатонина увеличилась почти на 2.5 месяца. Сведения о частоте, локализации и типе опухолей в контрольных и подопытных группах представлены в табл. 15.12.
Таким образом, применение мелатонина оказало определенное усиливающее спонтанный канцерогенез действие у самок мышей СВА. Число мышей со злокачественными опухолями в подопытной группе было достоверно (на 20 %) больше, чем в контрольной. Под влиянием мелатонина отмечено появление 4 лейкозов и 5 аденокарцином легких (р < 0.01), отсутствовавших в контрольной группе. Показано наличие опухолей матки в под-
190