Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

4 курс / Дерматовенерология / Диссертация_Рауш_Е_Р_Особенности_возбудителей_внутрибольничного

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
23.03.2024
Размер:
4.19 Mб
Скачать

61

35 (10,9%), C.tropicalis –29 (9,0%), C.krusei –20 (6,2%), C.guilliermondii –16 (5,0%), C. dubliniensis –13 штаммов (4,0%), C.lusitaniae –3 штамма (0,9%),

C.rugosa –2 (0,6%), C.kefyr –1 (0,3%), C.lipolytica – 1 (0,3%). Для двух штаммов видовая принадлежность неопределена (0,6%).

 

5

0.9 0.6

0.3

6.2

4

0.3

 

9

 

 

 

 

 

 

 

 

0.6

10.9

41.6

20.2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. albicans

 

 

 

C. parapsilosis

 

C. glabrata

 

C. tropicalis

 

 

 

 

 

 

C. krusei

 

 

 

C. guilliermondii

 

C. dubliniensis

 

C. lusitaniae

 

 

 

 

 

 

 

C. rugosa

 

 

 

C. kefyr

 

C. lipolytica

 

Candida spp.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рисунок 9 – Видовая идентификация Candida spp. с помощью тест-системы

AUXACOLOR 2 (n=322).

При сравнении полученных результатов видовой идентификации 322

штаммов совпадение составило 93,2%, (таблица 10 и 11), у C. albicans (139)

доля неверной идентификации была - 7,9%, среди C.не- albicans видов - 6,0%.

Таблица 10 – Сравнение результатов идентификации возбудителей ИК тест-

системой AUXACOLOR2

MALDI-TOF MС

 

AUXACOLOR 2

 

 

 

 

 

Верная ИД

 

Неверная ИД

C. albicans (139)

128

 

11

 

 

 

 

C. parapsilosis (65)

64

 

1

 

 

 

 

C. glabrata (37)

35

 

2

 

 

 

 

C. tropicalis (31)

29

 

2

 

 

 

 

C. krusei (21)

20

 

1

 

 

 

 

C. guilliermondii (17)

16

 

1

 

 

 

 

62

Продолжение таблицы 10

MALDI-TOF MС

 

AUXACOLOR 2

 

 

 

 

 

Верная ИД

 

Неверная ИД

 

 

 

 

C. lusitanie (4)

3

 

1

 

 

 

 

C. pararugosa 2

0

 

2

 

 

 

 

C. bracarensis (1)

0

 

1

 

 

 

 

C. dubliniensis 2

2

 

0

 

 

 

 

C. lipolytica (1)

1

 

0

 

 

 

 

C. kefyr (1)

1

 

0

 

 

 

 

C. inconspicua (1)

0

 

1

 

 

 

 

C. utilis (1)

0

 

1

 

 

 

 

Всего (322) (%)

300 (93,2%)

 

22 (6,8%)

 

 

 

 

Таблица 11 Причины расхожения результатов видовой идентификации

MALDI-TOF MС

AUXACOLOR 2

Причины

 

 

 

C. parapsilosis (1)

C. guilliermondii (1)

AUX: ассимиляция в лунке в

 

 

целлобиозой

 

 

 

C. bracarensis (1)

C. glabrata (1)

Идентифицируется только молекуляр-

 

 

но генетическими методами

 

 

 

C. tropicalis (2)

C. albicans (2)

AUX: ошибка тест-системы

 

 

 

C. pararugosa (2)

C. rugosa (2)

Идентифицируется только молекуляр-

 

 

но генетическими методами

 

 

 

C. krusei (1)

C. albicans (1)

AUX: ошибка тест

 

 

 

C. glabrata (1)

C. guilliermondii (1)

AUX: ошибка тест

 

 

 

C. inconspicua (1)

Candida spp. (1)

Идентифицируется только молекуляр-

 

 

но генетическими методами

C. utilis (1)

Candida spp. (1)

Идентифицируется только

 

 

молекулярногенетическими методами

C. albicans (11)

(11) C. dubliniensis

AUX: ошибка тест-системы

 

 

 

При сравнении полученных данных с использованием тест-системы

AUXACOLOR 2 и метода MALDI-TOF масс-спектрометрии достоверных различий между ними выявлено не было (рисунок 10). Вследствии выхода тест-системы AUXACOLOR 2 за пределы допустимой ошибки, для видовой идентификации, особенно, C.не- albicans видов лучше использовать метод

MALDI-TOF масс-спектрометрии, в связи с тем, что именно среди этих видов постоянно появляются штаммы со сниженной чувствительностью к противогрибковым препаратам.

63

Рисунок 10 – Сравнение данных полученных методами MALDI-TOF массспектрометрии и AUXACOLOR 2

Таким образом, можно заключить, что использование современных методов видовой идентификации (ДНК-секвенирование и MALDI-TOF масс-

спектрометрия) помогает точнее установить этиологию внутрибольничного инвазивного кандидоза в России (рисунок 11): 43,2% C. albicans и другие виды Candida spp. - 56.8%.

 

0.6 0.3

0.3

 

 

0.6

0.3

 

 

1.3

0.3

 

 

5.3

0.3

43.2

6.2

 

 

 

 

 

9.6

11.5

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

20.2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. albicans

C. parapsilosis

 

C. glabrata

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. tropicalis

 

 

C. krusei

 

C. guilliermondii

 

 

 

 

 

C. lusitaniae

 

 

C. pararugosa

 

C. dubliniensis

 

 

 

 

 

C. inconspicua

 

 

C. bracarensis

 

C. utilis

 

 

 

 

 

C. kefyr

 

 

C. lipolytica

 

 

 

 

 

 

 

Рисунок 11 – Cпектр возбудителей внутрибольничного ИК в РФ (n=322)

64

Также был рассмотрен спектр Candida spp. в различных биосубстратах

(рисунки 12 и 13)

45

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

40

38.8

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

35

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

30

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

25

22.3

 

 

 

 

 

 

 

 

 

%

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

20

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

15

11.6

11.2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

10

 

6

5.2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

5

 

 

1.5

0.7

0.7

0.4

0.4

0.4

0.4

0.4

 

 

 

 

 

 

 

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

parapsilosis

 

tropicalis

 

 

guilliermondii

 

pararugosadubliniensis

 

 

 

 

inconspicuaC

 

bracarensis

 

 

 

.

 

 

 

 

 

lusitaniae

 

 

 

 

 

 

.

 

 

 

albicans

 

glabrata

 

 

.

 

 

 

 

 

 

C

 

C

utilis

 

 

 

.

 

 

 

 

C

krusei

 

 

 

 

 

.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

kefyr .

 

 

 

 

C

 

 

C

.

 

 

 

 

.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

.

C

 

 

 

 

 

C

 

.

.

 

 

 

.

 

.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C

 

 

 

 

 

 

.

 

 

C

 

C

 

 

 

C

 

 

C

 

 

 

 

 

 

 

 

C

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рисунок 12 – Спектр Candida spp., выделенных их крови.

Следует отметить, что в крови в качестве возбудителя ИК, преимущественно изолировали C. не-albicans виды 61,2%, в том числе C. krusei (природно устойчивый к флуконазолу вид) 6%, а также редкие виды (4,9%). В других биосубстратах (перитонеальная и плевральная жидкости, желчь, ЦСЖ)

доминировали C. albicans, в биоптатах с одинаковой частотой выделяли C. albicans и C. glabrata.

Таким образом, анализируя данные видового спектра Candida spp.,

было обнаружено, что среди 268 штаммов, выделенных из крови преобладали C. не-albicans виды (р=0,008), а среди 54 штаммов, выделенных из других биосубстратов - C. albicans (р=0,013).

 

 

 

 

 

 

65

 

 

 

 

 

 

 

 

Перитонеальная жидкость (n=24)

 

 

 

 

80

75

 

 

 

 

 

 

 

 

70

 

 

 

 

 

 

 

 

 

60

 

 

 

 

 

 

 

 

%

50

 

 

 

 

 

 

 

 

40

 

 

 

 

 

 

 

 

 

30

 

 

 

 

 

 

 

 

 

20

 

8.3

8.3

 

 

 

 

 

 

10

 

4.2

4.2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. albicans

C. glabrata

C. krusei

C.

C. tropicalis

 

 

 

 

 

 

 

parapsilosis

 

 

 

 

 

Биоптаты (n=5)

 

Плевральная жидкость (n=6)

 

45

40

40

 

60

 

 

 

 

 

 

 

50

 

 

 

40

 

 

 

 

 

 

 

 

35

 

 

 

 

50

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

%

30

 

 

 

 

40

 

33.3

 

25

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

20

 

 

 

 

 

 

 

 

 

% 30

 

 

 

 

20

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

15

 

 

 

 

20

 

 

16.7

 

10

 

 

 

 

 

 

 

 

 

5

 

 

 

 

10

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

0

 

 

 

 

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. albicans

C. glabrata

C. krusei

 

C. albicans

C.

C. parapsilosis

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

guilliermondii

 

 

 

 

Желчь (n=4)

 

 

ЦСЖ (n=6)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

75

 

 

90

83.3

 

 

 

80

 

 

 

80

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

70

 

 

 

 

70

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

60

 

 

 

 

60

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

%

50

 

 

 

 

% 50

 

 

 

40

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

40

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

30

 

 

25

 

30

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

20

 

 

 

 

20

 

16.7

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

10

 

 

 

 

10

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

0

 

 

 

 

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. albicans

C. glabrata

 

C. albicans

C. guilliermondii

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

66

 

 

 

 

Содержимое абсцессов (n=8)

 

 

40

37.5

 

 

 

 

35

 

 

 

 

 

30

 

25

25

 

 

25

 

 

%

 

 

 

 

20

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

15

 

 

 

12.5

 

10

 

 

 

 

 

5

 

 

 

 

 

0

 

 

 

 

 

 

C. parapsilosis

C. albicans

C. glabrata

C. krusei

Рисунок 13 – Видовой спектр Candida spp., выделенный из других в норме

стерильных биосубстратах.

3.4 Видовой спектр возбудителей ВБИК в течение 2012-2014 гг.

Мониторинг видового спектра возбудителей ИК необходим для своевременного обнаружения его изменения. Мы проанализировали видовой спектр возбудителей ВБИК, выделенных нами в период исследования в 2012, 2013 и 2014 годах.

В 2012 году нами изучен 61 изолят Candida spp.и было отмечено, что в данной группе преобладали C. albicans - 54 %, C. не-albicans составляет 46 %

(рисунок 14).

100

 

 

 

 

 

 

 

80

 

 

 

 

 

 

 

60

54

 

 

 

 

 

 

%

 

 

 

 

46%

 

 

40

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

20

 

16.4

9.8

 

 

 

 

 

 

8.2

8.2

 

 

 

 

 

 

1.7

1.7

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. albicans

C. glabrata

C.

C. krusei

C. tropicalis

C.

C. lipolytica

 

 

 

parapsilosis

 

 

bracarensis

 

Рисунок 14 – Этиология ВБИК в 2012 гг (n=61)

 

 

67

Среди изученных в 2013 году 198 штаммов Candida spp., доля C. albicans

составила 43,4 %, а C. не-albicans виды -56,6% (рисунок 15)

100

90

80

70

60

%

50

43.4

 

 

56.6%

 

 

 

 

 

40

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

30

20.2

 

 

 

 

 

 

 

 

20

 

 

 

 

 

 

 

 

10.6

10.1

6.1

5.6

 

 

 

 

 

10

1.5

1

 

0.5

 

 

 

 

 

1

 

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C

 

parapsilosis .

C

 

C

 

 

guilliermondii

.

 

pararugosa dubliniensis

 

 

.

 

 

 

tropicalis

.

 

 

 

 

 

lusitaniae

 

C

 

 

albicans

 

 

 

 

glabrata .

 

 

 

 

 

 

utilis

 

 

 

 

 

 

 

 

krusei

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

.

 

.

C

 

 

 

 

 

.

C

.

.

 

 

 

C

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C

C

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C

 

 

 

 

 

 

 

Рисунок 15 – Этиология ВБИК в 2013 г (n=198).

В 2014 году, среди возбудителей ВБИК (61 штамм), мы обнаружили, что доля штаммов C. albicans составила 32,8%, а C. не-albicans - 67,2% (рисунок

16).

 

100

 

 

 

 

 

 

 

 

 

90

 

 

 

 

 

 

 

 

 

80

 

 

 

 

 

 

 

 

 

70

 

 

 

 

 

 

 

 

 

60

 

 

 

67.2%

 

 

 

 

%

50

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

40

32.8

27.9

 

 

 

 

 

 

 

30

 

 

 

 

 

 

 

 

 

13.2

 

 

 

 

 

 

 

20

 

9.8

8.2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3.3

 

 

1.6

 

10

 

 

 

1.6

1.6

 

 

 

 

 

 

0

 

 

 

 

 

 

 

 

C

.

C

 

guilliermondii C

 

 

 

C

 

 

.

 

parapsilosis

 

.

C

 

.

 

 

inconspicua

.

 

 

.

 

 

tropicalis

 

 

lusitaniae

C

 

 

 

albicans

 

 

glabrata

 

 

.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

krusei

 

 

.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

kefyr

 

 

C

 

 

.

 

 

 

 

 

 

 

C

 

 

 

 

 

C

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рисунок 16 – Этиология ВБИК в 2014 г (n=61).

Таким образом, видовой спектр возбудителей внутрибольничного ИК в течение 2012, 2013, 2014 гг. изменился: во-первых, уровень C. albicans

68

снизился с 54% (2012г.) до 32,8% (2014 г.) (р=0,01) (рисунок 17); во-вторых,

заметно возрос уровень C.не-albicans видов с 46% (2012г.) до 67,2% (2014

г.,р=0,001) (рисунок 17). При этом вырос также уровень C. parapsilosis: с

9,8 % (2012г.) до 27,8% (2014г., р=0,01) (рисунок 17). Доли часто встречающихся видов C. glabrata (16,4% и 13,2%), C. tropicalis (10,6% и 8,2%) и C. krusei (8,2% и 6,1%) существенно не изменились (рисунок 17).

Также были выявлены редкие виды возбудителей ВБИК (рисунок 17).

60

54

 

 

 

18

16.4

 

 

 

 

 

 

16

 

 

50

 

43.4

 

 

 

 

13.2

 

 

 

14

 

 

 

 

 

 

 

 

10.6

 

40

 

 

32.8

 

12

 

 

 

 

 

 

 

10.1

 

% 30

 

 

 

 

10

 

 

 

 

 

 

8.2

8.2

8.2

 

 

 

 

%

8

20

 

 

 

 

6.1

 

 

 

 

 

6

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3.2

10

 

 

 

 

4

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

0

 

 

 

 

2

 

 

 

 

2012

2013

2014

 

0

 

 

 

 

 

 

2012

2013

2014

 

 

 

 

 

 

 

 

C. albicans

 

C. glabrata

C. tropicalis

C. krusei

 

 

 

 

80

 

 

 

30

 

 

 

27.8

 

 

67.2

 

 

 

 

70

 

 

25

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

56.6

 

 

 

 

 

60

 

 

 

 

 

20.2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

46

 

 

20

 

 

 

50

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

% 40

 

 

 

15

 

 

 

 

 

 

 

 

%

 

 

 

 

30

 

 

 

 

 

9.8

 

 

20

 

 

 

10

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

10

 

 

 

5

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2012

2013

2014

0

 

 

 

 

 

C. не - albicans

 

 

 

2012

2013

2014

 

 

 

 

 

C. parapsilosis

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рисунок 17 – Видовой спектр возбудителей ВБИК в течение (2012-2014 гг.).

69

3.5 Географические особенности этиологии инвазвиного кандидоза

Исследуемые штаммы грибов рода Candida были выделены от пациентов из стационарах 12 городов 6 федеральных округов (ФО) РФ: Южного (Ростов-

на-Дону, Краснодар), Центрального (Москва), Северо-Западного (Санкт-

Петербург, Петрозаводск),Приволжского (Пермь, Нижний Новгород, Казань),

Уральского (Тюмень, Сургут), Сибирского (Иркутск, Омск) (рисунок 18).

127

53

38

32

60

12

Рисунок 18 – Географическое распределение исследуемых штаммов Candida spp (n=322).

При изучении видового спектра возбудителей ИК в федеральных округах установлены географические особенности. Так в Сибирском и Уральском (рисунок 19) федеральных округах доля C. albicans в структуре возбудителей ИК была достоверно выше, чем в Северо-Западном и Южным федеральных округах, р < 0.05.

70

100%

 

 

8.4

90%

8.3

 

80%

8.3

70%

 

60%

50%

40%

75

30%

20%

10%

0%

2.7 2.7

2.7

2.7

15.7

15.7

57.8

7.5

3.1

0.8

0.8

5

1.6

 

6.3

 

0.8

 

 

 

11.8

 

 

 

 

3.1

 

 

 

 

 

 

 

15.1

9.3

 

 

 

 

 

 

8.7

26.7

 

 

 

 

 

 

3.1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

6.3

 

8.7

 

 

30.2

12.5

 

7.8

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

16.7

 

 

9.4

 

23.6

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

15

 

47.2

46.9

 

 

 

 

 

 

 

37

35

 

 

 

 

 

 

 

Сибирский ФО*

Уральский ФО* Центральный ФО Приволжский ФО

Северо-Западный

Южный ФО (60)

(12)

(38)

(53)

(32)

 

 

ФО (127)

 

 

C. albicans

 

 

C. parapsilosis

 

 

C. glabrata

 

 

C. tropicalis

 

 

C. krusei

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. guilliermondii

 

 

C. lusitaniae

 

 

C. dubliniensis

 

 

C. pararugosa

 

 

C. utilis

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. inconspicua

 

 

C. lipolytica

 

 

С. bracarensis

 

 

C. kefyr

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рисунок 19 – Распределение видов Candida spp. – возбудителей ИК в федеральных округах РФ. *р <0.05 в сравнении с Северо-Западным и Южным ФО.

При анализе видового распределения штаммов в различных городах РФ было выявлено, что между крупными городами (Санкт-Петербург и Москва)

достоверных различий в видовом спектре нет (р=0,2), тогда как существуют видовые различия между долями C. albicans в структуре возбудителей ИК в Иркутске и Ростове на Дону, достоверно (р=0,0009) выявлено преобладание

C. albicans в Иркутске. Помимо городов, указанных на рисунке 20 также были выделены единичные штаммы из следующих городов: Омск C.

tropicalis (1), Петрозаводск -

C.guilliermondii (1), Нижний Новгород C.

*

*

parapsilosis (1), Казань – 3 штамма: C. tropicalis, C. parapsilosis, C.lusitaniae ,

Сургут 4 штамма: C. albicans (2), C. krusei (1), C. inconspicua (1)

Соседние файлы в папке Дерматовенерология