2 курс / Гистология / Эндокринная_регуляция_роста_и_развития_организма_оленевых_Овчаренко

кула имеют разную высоту. Цитоплазма тиреоцитов светлая, ядра красно-фиолетовые, округлой формы, расположены ближе к базальному полюсу клетки. Среди тиреоцитов нередко выявляются крупные клетки округлой или овальной формы с бледно окрашивающейся цитоплазмой. Ядро этих клеток крупное, круглое, лежит в центре клетки. Это так называемые светлые тиреоциты. Они встречаются как в составе интерфолликулярных островков, так и в выстилке фолликулов.

В щитовидной железе маралов при окраске по Гриммелиусу нами обнаружены С-клетки, располагающиеся парафолликулярно. Эти клетки имеют полигональную форму, крупное округлое ядро. Цитоплазма их неоднородна, так как содержит гранулы. В связи с их расположением они не имеют контакта с коллоидом. Встречаются С-клетки в основном в центральной части железы.

Коллоид, содержащийся внутри фолликулов, окрашивается неодинаково. В крупных аденомерах коллоид плотный, темно окрашивается. В мелких – светло окрашен, в нем могут наблюдаться единичные вакуоли.

Согласно нашим данным, у взрослых маралов 5-10 лет масса щитовидной железы составляет 16-20 г. Проведенный нами дополнительно сравнительно-видовой анализ морфологии щитовидной железы у взрослых оленевых, обитающих на Алтае, показал, что у лося масса составляет 27-30 г, пятнистого оленя – 12-15, у косули – 3,5-4,4 г (Власова О.Е., Овчаренко Н.Д., 2003). Даже ограничиваясь данными по оленевым, можно предположить, что масса щитовидной железы коррелирует с массой животного.

При установлении видовых особенностей морфологии в щитовидной железе важным является также наличие или отсутствие перешейка, степень его выраженности, место расположения и характер (железистый или соединительно-тканный). Кроме того, у некоторых видов имеют место несколько вариантов формы железы. У сайгака имеется до 9 модификаций форм, у человека различают 3 варианта (Сидоров С.В., 1995, Фатеева И.Н., 2000). Нами установлено, что у марала перешеек отсутствует, а сама щитовидная железа имеет две разновидности формы. Первая, когда обе доли одинаковые, уплощенные подковообразные, такую же форму имеет и щитовидная железа пятнистого оленя, очень похожа и у лося. Вторая, когда доли удлиненные, причем левая превышает по длине (и массе) правую. Удлиненную форму долей щитовидной железы имеет и косуля. Ни у одного из представителей оленьих мы не обнаружили в щитовидной железе перешейка даже слаборазвитого, который присутствует у северного оленя (Шелепов В.Г., 1998).

31

Нами установлено, что соединительнотканная капсула щитовидной железы марала слабо выражена, как и у всех изученных нами оленевых. Различия имеет только ее толщина: у марала составляет

14,58±1,96 мкм, лося – 17,22±2,89, пятнистого оленя – 14,60±1,52, у

косули – 10,11±1,75 мкм. Причем достоверно отличается только толщина капсулы у косули по сравнению с другими.

Сведения о строении и особенностях соединительнотканной капсулы щитовидной железы млекопитающих очень малочисленны. Нами обнаружены данные A.M. Потаскаева (1967), отмечающего слабое развитие капсулы щитовидной железы у норки и речного бобра. Они согласуются с результатами наших исследований.

Микроскопическое строение щитовидной железы млекопитающих относительно однотипно. Общепризнанным является, что струк- турно-функциональной единицей ее является фолликул.

Нами установлено, что щитовидная железа марала имеет четко выраженное гетерогенное строение, причем на периферии железы располагаются мелкие фолликулы, а в центре – крупные. Такое же строение данной железы отмечает у северного оленя И.А. Антипин (1995). Наши данные по другим оленьим свидетельствуют, что сходную картину микроструктуры щитовидной железы с маралом и северным оленем имеет лось. У пятнистого оленя мелкие фолликулы располагаются по периферии и в центре железы, а крупные – только в центре. Косуля в данном случае является исключением – фолликулы размерно однотипны. Диаметр фолликулов самый крупный у марала

исамый маленький у косули.

Впаренхиме у оленьих нами идентифицированы всего три типа клеток: фолликулярные тиреоциты, интерфолликулярные и С-клетки. Последние довольно малочисленны у взрослых животных и имеют только интерфолликулярное положение. Наши данные не совпадают с мнением В.A. Young (1976), считающим расположение С-клеток в базальной мембране фолликулов характерной чертой семейства оленьих.

32

связи с этим обеднение коры липидами может рассматриваться как признак ее активации только при условии одновременного увеличения ее объема (Алешин Б.Г., Генес С.Г., Вогралик В.Г., 1973 и др.).

У большинства млекопитающих пучковая зона наиболее богата липидами. Однако у человека в пучковой зоне гораздо меньше жировых веществ, чем в клубочковой зоне (Соффер Л. и др., 1966). В сетчатой зоне их количество незначительное.

Винтерстициальных эндокриноцитах изучалась в основном сезонная динамика содержания липидов. При этом обнаружены значительные видовые различия. У европейских кротов в репродуктивный период в клетках Лейдига выявляется много капель липидов, в период покоя их количество уменьшается (Suzuki F., Racey R.,1978). У австралийской кустарниковой крысы количество липидов и кристаллоидных включений в клетках Лейдига весьма вариабельно в течение всего годового цикла (Kerr J.B. et al., 1986). То же установлено и для лесных куниц, но после периода размножения в их эндокриноцитах накапливается липофусцин, что характерно для инволюционирующих клеток (Audi M.C.,1979). Повышение количества липофусцина в период полового покоя отмечено также для летучих мышей (Grandi D., Allegri F., 1984). У американских норок в брачный период при максимальном объеме ядер реакция на липиды и холестерин отрицательная. Вне сезона размножения в клетках Лейдига накапливается значительное количество липидов и холестерина. Сходная ситуация отмечена и для речных бобров: в период гона количество липидов в их интерстициальных эндокриноцитах уменьшается, а в остальные сезоны их содержание умеренно (Сухов Н.М., 1974). В то же время, по данным М.С. Бахшинян (1969), у половозрелых крыс, в отличие от человека, кроликов и кошек, положительная реакция на судан черный В в клетках Лейдига отсутствует.

Г.П. Рушковский и А.Д. Юхимец (1968) установили, что концентрация РНК в цитоплазме тиреоцитов, может являться критерием функциональной активности тиреоидной паренхимы, так как имеется четкая зависимость между содержанием РНК в цитоплазме тиреоцитов, их функцией и формой. Количество РНК нарастает с усилением их функции и увеличением высоты тиреоцитов. Наибольшая концентрация РНК отмечается в апикальных частях клеток (Детюк Е.С., 1973).

Внадпочечниках гистохимически РНК в наибольшей степени выявляется в сетчатой зоне, меньше ее в клубочковой, в пучковой зоне отмечается только пиронинофильная зернистость вокруг липидных капель.

34

Большое количество ДНК обнаруживается в ядрах клеток наружной пучковой зоны, меньше в ядрах клубочковой и сетчатой зон, а минимальное – во внутренней пучковой зоне (Roels H., 1960, Ахметов И.З., 1978). Согласно данным А.К. Носова (1965) больше всего нуклеиновых кислот содержится в паренхиматозных клетках под капсулой, меньше – в клубочковой зоне, еще меньше – в пучковой зоне, очень мало – в сетчатой. В клетках коры обнаруживается обратная зависимость между содержанием липидов и нуклеиновых кислот, причем количественно это зависит здесь от фазы секреторного цикла (Носов А.К., 1965, Артишевский А.А., 1974).

Активация адренокортикоцитов проявляется усилением синтеза РНК и белка. Видимо, накопление РНК при усилении функции коры надпочечников связано с участием рибонуклеотидов в синтезе стероидных гормонов. Накопление РНК в ядрах согласно данным Л.И. Аруина (1966) идет почти параллельно исчезновению из цитоплазмы липидов. Увеличение количества РНК сопутствует повышению активности адренокортикотропного гормона и усилению секреции кортикостероидов. Есть мнение, что количество нуклеиновых кислот – показатель пролиферативной активности надпочечника в связи с изменением его функции (Носов А.К., 1965).

В гистохимическом отношении и активно секретирующие клетки Лейдига характеризуются повышенным содержанием РНК (Сухов Н.М., 1974), кроме того наличием белков, углеводов (Kanwar U., Sheikner, 1978), кислых и нейтральных липидов, в том числе и фосфолипидов, холестерина, аскорбиновой кислоты, щелочной фосфатазы

(Lopez Arrvans J.S. et al., 1976; Волкова О.В., Пекарский, 1976). Обна-

ружена сезонная динамика содержания в эндокриноцитах семенника РНК у американских норок. Показано, что в период гона реакция на РНК наиболее интенсивная, во время полового покоя – слабая или отрицательная (Сухов Н.М., 1974).

Реакция тетразониевого сочетания выявляет белки, богатые аминокислотами тирозином, триптофаном и гистидином. Тирозин и гистидин входят в состав продуцируемого тиреоцитами тиреоглобулина, легко йодируются и обеспечивают синтез гормона щитовидной железы – тироксина. Содержание аминогрупп в тиреоидной паренхиме колеблется в зависимости от функционального состояния. Повышение активности тиреоцитов сопровождается понижением в них концентрации аминогрупп (Рушковский Г.П., Юхимец А.Д., 1968). Количество аминогрупп уменьшается при активации функции в связи с обильным всасыванием образующихся гормонов (Шиникерман Н.М., Рушковский Г.П., 1966). С возрастом происходит снижение содержания белков (Быков В.Л., 1976).

35

Тиоловые группы важную роль играют в структурных белках и активизации многочисленных энзимов в некоторых из белковых гормонов. В щитовидной железе содержащие серу соединения имеются как в коллоиде фолликулов, так и в фолликулярном эпителии [104]. С.И. Окулова (1990) обнаружила у крупного рогатого скота SH-груп- пы в виде диффузной зернистости в ядрах и цитоплазме фолликулярных и интерфолликулярных клеток. А.Д. Юхимец и Г.П. Рушковский (1967) отметили, что больше всего SS- и SH-групп содержится в коллоиде. Секретирующий кубический эпителий, по их мнению, содержит большие количества этих групп. При снижении активности и уплощении эпителия содержание тиоловых групп в нем уменьшается. При резорбции цитоплазма тиреоцитов окрашивается так же интенсивно, как и коллоид. По исследованиям Н.М. Шинкермана и Г.П. Рушковского (1968) известно, что при усилении тиреоидной функции концентрация тиоловых групп в коллоиде понижается, а в цитоплазме повышается в связи с разжижением и резорбцией коллоида. Также установлено, что Т4 активирует деятельность ферментов путем восстановления в них дисульфидных групп в сульфгидрильные

(Афонский С.И., 1970), [24].

Показателем активности коркового вещества является присутствие сульфгидрильных и дисульфидных групп как вестников усиливающихся метаболических процессов и в железистой ткани надпочечников. В.В. Харина (1979) указывает, что при нарушении нормального функционирования в коре наряду с разрушением клеточных структур снижением количества предшественников гормонов отмечается уменьшение содержания сульфгидрильных и дисульфидных групп.

Gersh и R.E. Glegg (1950), Y. Clermont, C.P. Leblon (1952) доказа-

ли, что тиреоглобулин дает выраженную ШИК-реакцию, которая по интенсивности идентична ШИК-положительному окрашиванию коллоида. Следовательно, основным ШИК-положительным субстратом коллоида нормальной щитовидной железы является тиреоглобулин (Г.И. Чернокан, 1968). Н.М. Шинкерман и Г.П. Рушковский (1967) отмечают, что тиреоглобулин – это гликопротеид, содержащий 8-10% углеводных компонентов.

Внастоящее время известно, что чистые полисахариды в клетках

имежклеточном веществе у млекопитающих встречаются только в виде гликогена. Все остальные углеводсодержащие биополимеры подразделяются на протеогликаны и гликопротеины согласно клас-

сификации R. Jeanlos (1960) и А. Готтшлака (1969).

36

Содержание гликогена в клетках и тканях связано с синтезом многих веществ, размножением клеток, особенно в организме эмбрионов и молодых животных.

Протеогликаны (особенно сульфатированные) играют важную роль в обеспечении трофической функции соединительной ткани, а гликопротеины являются составной частью клеточных мембран, секретов желез, гормонов, ферментов и их ингибиторов и соединительной ткани (Серов В.В., Шехтер А.Б., 1981).

Гликозаминогликаны входят в состав протеогликанов, заполняют тканевые промежутки (особенно глалуровая кислота), противодействуют распространению инфекций и токсинов, а также обладают способностью к инактивации бактериальных инфекций (Mora R.T., Young B.G., 1972). Входя в состав капсул внутренних органов, они обеспечивают защитную функцию соединительной ткани и структур- но-образовательную.

Нейтральные гликопротеины (НГП) локализуются главным образом в коллоиде фолликулов, и незначительное их количество наблюдается в цитоплазме тиреоцитов (Рушковский Г.П., Юхимец А.Д., 1968). При изменении функциональной активности щитовидной железы количество НГП в цитоплазме тиреоцитов изменяется в направлении, противоположном изменению концентрации этих веществ в коллоиде и строме. В.Л. Быков (1976) отмечает, что у молодых мышей уровень ШИК-реакции невысок, а с возрастом происходит постепенное накопление ШИК-положительных веществ.

Э.Н. Александрова (1968) изучала динамику гликогена и НГП в щитовидной железе крыс. При гипертиреозе гликоген представлен весьма скудно лишь в некоторых наиболее крупных фолликулах. При гипофункции гликоген часто встречается в виде глыбок. НГП обнаруживаются в большом количестве в коллоиде всех фолликулов. Гистохимические исследования стромы щитовидной железы при старении выявили снижение содержания сульфатированных гликопротеинов и нарастание интенсивности ШИК-реакции базальных мембран, что свидетельствует о нарушении барьерных и трофических функций стромы.

В надпочечниках в постнатальный период ШИК-реакция выявляет углеводы в капсуле и трабекулярных прослойках соединительной ткани. В клубочковой и наружных частях пучковой зоны коры обнаруживается незначительное содержание гликогена. В сетчатой зоне содержание гликогена несколько ниже, чем в других зонах коры. При усилении функции надпочечников снижается содержание гликогена и повышается активность ферментов, образуемых из него (Войткевич А.А., Полуэктов А.И., 1970). Возможны видовые отличия в содержании гликогена в коре надпочечников, что, например, отмечает Л.К. Понизовская (1975) у разных представителей отряда хищных.

37

Специфической гистохимической реакцией для клеток мозгового вещества является хромаффиновая реакция с солями хрома. Хром фиксируется клетками в ходе реакции. Липидные включения в хромаффиновых клетках, как правило, не встречаются, и этим они резко отличаются от корковых. Нет в хромаффиновых клетках и запасов гликогена. Характерная для этих включений ШИК-реакция бывает положительной только в соединительных прослойках медуллы или в эндотелии сосудов. По этому признаку супрареналовые клетки не отличаются от интререналовых, у которых углеводные включения встречаются обычно в больших количествах только на ранних стадиях развития (Канцнельсон З.С., Стабровский Е.М., 1975).

По данным А.П. Попова (1995), в процессе структурно-функцио- нального становления половых органов быков в онтогенезе в интерстиции семенников и их строме имеет место динамика гликогена, нейтральных гликопротеинов и сульфатированных протеогликанов. Этот же автор отмечает, что белочная оболочка и соединительнотканные структуры сети семенника содержат отдельные аминокислоты (лизин, гистидин, цистеин, аргинин) в несколько больших количествах, чем другие структуры.

В1987 г. А.Н. Яцковский предложил методику, которая позволяет дифференцировать в ядрах эу- и гетерохроматин. Для этого используются альциановый синий и сафранин. Различия размеров молекул красителя определяют их способность диффундировать в неодинаковые по плотности структуры, вследствие чего гетерохроматин окрашивается сафранином, а эухроматин – альциановым синим. Этот метод предлагается одним из критериев оценки функциональной активности железистых клеток.

При выборе морфологических критериев оценки функционального состояния семенника руководствовались работами Б.Я. Хесина (1967), Ю.И. Ухова, А.Ф. Астраханцева (1983).

Из морфологических показателей, характеризующих общее состояние семенника, исследовались: масса семенника, толщина белочной оболочки, объемные доли интерстиция, семенных канальцев и их просветов, отношение объемных долей семенных канальцев и интерстиция.

При анализе функционального состояния интерстиция учитывались объемная доля и количество клеточных элементов на условную единицу площади, объем ядер интерстициальных эндокриноцитов.

Вкачестве морфологических критериев функциональной активности эндокриноцитов использовали форму и размер клеток и их ядер, состояние ядерного хроматина (Шевлюк Н.Н. и др., 1998).

38

При выборе морфологических критериев оценки функциональ-

E. Vuschke (1954). Для характеристики их функционального состояния исследовались: абсолютная толщина коркового и мозгового слоя и их соотношение, абсолютная и относительная толщина клубочковой, пучковой и сетчатой зон коры, диаметр клеток и объем ядер клеток клубочковой, пучковой, сетчатой зон коры и двух типов клеток в мозговом веществе.

Мы в своих исследованиях при выборе морфологических критериев оценки функциональной активности щитовидной железы руководствовались работами Я.Е. Хесина (1967), В.Л. Быкова (1978, 1979), А.Ф. Киселёвой и др. (1983), Г.Г. Автандилова (1980, 1992). Из морфологических показателей, характеризующих функциональное состояние щитовидной железы, исследовались: диаметр фолликулов, их число в поле зрения, процентное соотношение мелких, средних и крупных фолликулов, высота тиреоцитов и объем их ядер, ядерноцитоплазматическое соотношение в этих клетках, паренхимо-стро- мальный коэффицент, высчитывался индекс Брауна. Кроме этого учитывали форму тиреоцитов и состояние коллоида.

39