новая папка 2 / 49948

11

танно инвазированным мониезиями (Moniezia benedeni), стронгилятами пищеварительного тракта. В качестве базового препарата использовали фенбендазол в дозе 5 мг/кг на 20 овцах. Эффективность препаратов учитывали по результатам копроовоскопических исследований до и через 15 суток после дегельминтизации.

Производственное испытание вигисокса при желудочно-кишечных стронгилятозах овец. Вигисокс назначали животным однократно в дозе 60 мг/кг в смеси с 0,3 кг овсяной дерти (на 1 голову) путем групповой дачи с кормом. Эффективность препарата учитывали по результатам копроовоскопических исследований до и через 18 суток после дегельминтизации.

Данные всех опытов обрабатывали статистически по методу СтьюдентаФишера.

2.2.Результаты исследований

2.2.1.Токсикологические свойства вигисокса

2.2.1.1.Острая токсичность вигисокса при введении в желудок

Установили, что введение в желудок вигисокса в тестируемых дозах:

для белых мышей – 10000 мг/кг и белым крысам 6000 мг/кг ни в одном случае не вызывало гибели животных. У животных обоих видов не отмечали признаков интоксикации. Они сохраняли обычную двигательную активность, охотно потребляли корм и воду и после введения препарата динамично прибавляли в массе тела. Доза препарата 6000 мг/кг являлась максимально возможной для внутрижелудочного введения крысам и 10000 мг/кг - мышам. В связи с этим ЛД50 будет превышать 6000 мг/кг при введении в желудок белым крысам и 10000 мг/кг - мышам, что позволяет сделать вывод о том, что животные не обладают видовой чувствительностью к препарату. Согласно ГОСТа 12.1.007-76 вигисокс относится к IV классу малоопасных веществ.

2.2.1.2. Острая токсичность вигисокса при нанесении на кожу

При аппликации вигисокса на кожу в дозах 3000 и 6000 мг/кг у животных наблюдали адекватную реакцию на нанесение чужеродного вещества; какихлибо симптомов интоксикации, изменений состояния и поведения крыс не отмечали в течение всего периода наблюдений, т.е. 14 суток. Вместе с тем доза 6000 мг/кг была максимально возможной для аппликации на кожу. С уче-

12

том этого ограничивающего фактора ЛД50 вигисокса будет превышать 6000 мг/кг (IV класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76).

2.2.1.3. Раздражающее действие вигисокса на кожу и слизистые оболочки

Препарат в дозах 3000 и 6000 мг/кг не оказывал отрицательного воздействия на неповрежденную кожу крыс. Примерно через 10 сут после нанесения препарата кожа покрылась ровным шерстным покровом. При оценке влияния препарата на конъюнктиву глаза при внесении 1%-ной суспензии вигисокса кроликам за исключением адекватной реакции у животных на внесение инородного тела, никаких других признаков не наблюдали. Таким образом, вигисокс не проявил раздражающего действия на неповрежденную кожу крыс и слизистую оболочку глаз кроликов.

2.2.1.4. Кумулятивные свойства вигисокса

При введении препарата в течение двух месяцев в дозе 1/10 от максимально возможной для внутрижелудочного введения крысам суммарная доза, полученная животными, составила 26400 мг/кг. При введении дозы 1/20 от дозы максимально возможной для внутрижелудочного введения крысам суммарная доза 13200 мг/кг. Падежа крыс в обеих подопытных группах не отмечали. Так как, отсутствовала гибель животных, то нам не удалось определить коэффициент кумуляции. Следовательно, можно сделать вывод о том, что вигисокс не обладает кумулятивными свойствами.

2.2.1.5. Субхроническая токсичность вигисокса

При ежедневном введении вигисокса в трех тестированных дозах (1200, 600 и 300 мг/кг) внешних признаков токсикоза и гибели крыс не наблюдали в течение всего опытного периода. Динамика живой массы крыс разных групп позволяет заключить, что введение вигисокса в указанных дозах не оказало существенного влияния на этот параметр. Массовые коэффициенты органов у животных двух опытных групп колебались в пределах контрольных значений и референтнаых значений для данного вида животных. В частности, значение относительной массы печени у крыс, получавших вигисокс в дозах 1/5, 1/10 и 1/20 от дозы максимально возможной для внутрижелудочного введения кры-

сам – 6000 мг/кг, составило 12,57±0,45 г; 12,68±0,35 и 12,64±0,33 г против контрольного значения 12,83±0,26 г; почек – 1,94±0,03 г; 2,01±0,07 и

13

1,84±0,03 г против 2,03±0,05 г в контроле и сердца – 1,17±0,08 г; 1,09±0,07 и 1,19±0,06 г против 1,25±0,04 г в контроле (Рис. 1).

Рисунок 1 – Влияние вигисокса на массовые коэффициенты органов

Препарат в дозах 1200, 600 и 300 мг/кг/сутки не оказал достоверного влияния на гематологические показатели. В частности, уровень гемоглобина у крыс, получавших вигисокс в дозах 1200, 600 и 300 мг/кг/сутки равнялся 10,62±1,74; 9,71±2,21 и 11,70±0,97 против контрольного значения 9,77±1,92 г%; количество эритроцитов составляло 4,59±0,95; 5,83±0,52 и 5,34±0,43 против 5,63±0,88 млн/мм3; число лейкоцитов равнялось 6,

80±1,82, 7,73±1,44 и 6,91±2,00 против 8,11±2,46 тыс./мм3 и т.д. (Рис. 2).

Протестировано 10 биохимических показателей, отражающих состояние белкового, жирового и углеводного обмена. В частности, уровень общего белка у крыс, получавших вигисокс в дозах 1200, 600 и 300

мг/кг/сутки равнялся 69,10±4,24; 67,40±4,11 и 67,85±4,37 против кон-

трольного значения 67,80±0,36 г/л; количество глюкозы составляло

3,20±0,56; 3,42±0,35 и 3,35±0,55 против 3,50±0,28 ммоль/л, значения амилазы равнялись 476,15±17,35; 514,70±51,55 и 534,18±35,44 против 483,00±29,08 Ед/л и т. д. (табл. 2)

Статистически значимых изменений по сравнению с контролем не установили.

15

Функциональное состояние почек не претерпело отрицательных изменений при введении вигисокса в трех различных дозах, поскольку уровень креатинина и мочевины был сравним с контрольными значениями. В ходе патоморфологического исследования макроскопических изменений органов и тканей выявлено не было. При микроскопическом исследовании проб печени, селезенки и других внутренних орагнов крыс, получавших препарат в трех дозах, не отмечали патологических изменений.

2.2.1.6. Оценка вигисокса на эмбриотоксическое и тератогенное действие

При введении вигисокса на 1–6; 7–14 и 15–19 сутки эмбриогенеза не отмечали изменений в состоянии и поведении крыс-самок, видимых нарушений беременности и падежа. Прирост массы тела подопытных самок не отличался от прироста животных контрольной группы. При исследовании эмбрионального материала от подопытных крыс показатели гибели плодов не отличались от таковых у контрольных животных. Предимплантационная, постимплантационная гибель и общая эмбриональная смертность при введении вигисокса на 1-6; 7-14 и 15-19 сутки беременности составила со-

ответственно 4,56+0,13, 5,45+0,52 и 6,81+1,01; 5,62+0,84, 3,57+0,44 и 5,20+1,68; 13,15+5,42, 12,64+5,04 и 12,33+2,98 % против контрольных значений 4,15+0,88, 4,45+1,01 и 13,26+3,91 % (табл. 3).

Плоды с аномалиями развития отсутствовали. В ходе исследования сагиттальных срезов было выявлено отсутствие аномалий развития. Продолжительность и течение беременности у подопытных самок находились на уровне контроля и физиологической нормы для данного вида животных. В ходе ежедневного взвешивания беременных крыс было установлено, что животные последовательно прибавляли в массе тела. Течение родов было без патологии. Все крысята родились жизнеспособными. Масса и размеры плодов достоверно не отличались от соответствующих контрольных значений. Физическое развитие потомства протекало без отклонений от нормы. Отлипание ушных раковин, появление первичного волосяного покрова, открытие глаз у крысят подопытной группы находились в пределах контрольных и характерных для данного вида животных. Формирование поведенческих реакций и рефлексов у крысят опытных групп было сравнимым с контролем и в сроки, характерные для данного вида животных. Во всех случаях препарат не индуцировал

16

развития внешних и внутренних аномалий, следовательно, можно говорить об отсутствии его тератогенного действия.

Таблица 3 – Влияние многократного введения вигисокса в различные периоды эмбриогенеза в трехкратной терапевтической дозе (180 мг/кг) на пренатальное развитие крыс (n=6; M±m)

2.2.1.7. Антимитотическое действие вигисокса

Значения основного показателя митотической активности клеток, т.е. митотического индекса, при различных периодах экспозиции после введения вигисокса колебались от 0,38+0,29÷0,53+0,32 до 0,41+0,27 % в контроле. Вигисокс не оказывал статистически значимого влияния на процентное число делящихся клеток. Относительное количество клеток на всех стадиях митоза было сопоставимым с таковым в контроле. Вигисокс не вызывал изменений митоза и для него не характерно антимитотическое действие.

17

2.2.2. Антигельминтная эффективность вигисокса при основных гельминтозах овец

2.2.2.1. Титрация терапевтической дозы вигисокса при мониезиозе овец

Через 10 сут после введения вигисокса в дозе 60 мг/кг все животные полностью освободились от мониезий, о чем свидетельствует отсутствие яиц мониезий в фекалиях овец. Инвазированность овец контрольной группы в течение опыта изменялась несущественно (Р > 0,05). Среднее число яиц мониезий в г фекалий составило до опыта 255,7+13,2 и в конце опыта 260,4+12,8 экз. Базовый препарат – фенасал в дозе 60 мг/кг показал 86 %- ное снижение количества яиц мониезий в фекалиях овец. Следовательно, дозу вигисокса 60 мг/кг можно считать терапевтической при мониезиозе овец. Препарат в испытанных дозах хорошо переносился овцами.

2.2.2.2. Титрация терапевтической дозы вигисокса при стронгилятозах пищеварительного тракта овец

Результаты испытания вигисокса в разных дозах при желудочнокишечных стронгилятозах свидетельствуют о 100 %-й эффективности препарата в дозе 60 мг/кг. Препарат хорошо переносился животными и не оказывал побочного действия на их организм. При стронгилятозах пищеварительного тракта овец вигисокс в дозах 40 и 50 мг/кг проявил соответственно 95 и 98,6 %-ное снижение количества яиц стронгилят в фекалиях при 90 %- ной экстенсэффективности. Базовый препарат – фенбендазол в дозе 5 мг/кг показал 94,7%-ный эффект по результатам учета числа яиц стронгилят до и после дегельминтизации.

2.2.2.3. Эффективность вигисокса при диктиокаулезе овец

Вигисокс в дозе 60 мг/кг показал 100 %-ную эффективность против Dictyocaulus filaria. Препарат в дозе 50 мг/кг по результатам копроларвоскопических исследований проявил 97,5 %-ную эффективность. Базовый препарат фенбендазол в дозе 5,0 мг/кг показал также хорошую переносимость, равную 97,6 %. Зараженность овец контрольной группы диктиокаулюсами в период опыта существенно не изменялась (Р > 0,05) и среднее число личинок диктиокаулюсов составило в г фекалий до опыта 150,6+11,8 и в конце опыта 154,8+12,0.

18

2.2.2.4. Эффективность вигисокса при трихоцефалезе овец

Наилучшую эффективность вигисокс против трихоцефал показал в дозе 80 мг/кг. Препарат проявил 98,9 %-ную эффективность по результатам учета числа яиц нематод в фекалиях до и после лечения. При этом 6 из 7 обработанных овец полностью освободились от трихоцефал. Эффективность вигисокса в дозе 70 и 60 мг/кг составила соответственно 95,1 и 92,4 %. Учитывая недостаточно высокий эффект вигисокса против трихоцефал в дозе 60 мг/кг (рекомендуемая терапевтическая доза при других гельминтозах) целесообразно для обеспечения более высокой эффективности дозу препарата повышать до 80 мг/кг.

2.2.2.5. Действие антигельминтиков против мониезий разного возраста

Эффективность против взрослых мониезий фенбендазола составила 84,0 % и альбендазола 88,0 %, а против неполовозрелых мониезий соответственно 64,3 и 75,0 %. Никлозамид и вигисокс показали одинаковую эффективность, равную против взрослых мониезий 100 % и против неполовозрелых 89,3 %. Эффективность празиквантела составила 100 % против неполовозрелых и взрослых мониезий. У молодняка овец контрольной группы обнаружили, в среднем, по 2,8+0,5 экз. неполовозрелых и 2,5+0,5 экз. имагинальных мониезий, из них 62 % составляли M. еxpansa и 38 % M. benedeni.

Испытанные препараты оказались высокоэффективными против взрослых мониезий. Их эффективность против неполовозрелых мониезий была ниже кроме празиквантела. В связи с этим для проведения преимагинальных дегельминтизаций животных целесообразно применять антигельминтики с учетом их действия против неполовозрелых мониезий.

2.2.2.6. Эффективность вигисокса против аноплоцефалят разных видов

14 из 16 овец, инвазированных M. expansa, освободились после дачи вигисокса в дозе 60 мг/кг. Количество яиц M. expansa снизилось с 142,4+8,4 до 3,0+0,6 экз., т.е. на 97,9 %. Эффективность вигисокса при мониезиозе овец, вызванной M. benedeni, оказалась практически аналогичной. Количество яиц M. benedeni в фекалиях леченых животных снизилось на 97,5 %. 98,9 %-ная эффективность получена нами при испытании вигисокса на овцах, инвазированных Th. giardi. Количество яиц тизаниезий в фекалиях овец через 10 суток после дегельминтизации снизилось с 123,5+8,0 до 1,3+0,4 экз. При вскрытии овец из разных хозяйств, у которых после лече-

19

ния обнаруживали яйца аноплоцефалят в фекалиях, находили в тонком ки-

шечнике по 1-2 экз. M. expansa и M. benedeni и 1 экз. Th. giardi.

2.2.2.7. Действие антигельминтиков на яйца мониезий

Вигисокс проявлял овоцидные свойства. На первые, вторые и третьи сутки после дегельминтизации овец вигисоксом в дозе 60 мг/кг нежизнеспособными оказались соответственно 45,0; 66,9 и 78,8 % яиц мониезий, выделяющихся с фекалиями. Учитывая полученные нами результаты о неполной гибели всех выделяющихся с фекалиями яиц цестод после дегельминтизации, целесообразно первые трое суток после лечения животных не выпасать на пастбище во избежание его контаминации инвазионными элементами.

2.2.3. Влияние вигисокса на организм овец

В результате исследований нами было установлено, что вигисокс в терапевтической (60 мг/кг) и в три и пять раз увеличенных (180 и 300 мг/кг) дозах не оказывает отрицательного влияния на общее клиническое состояние овец. Показатели клинического статуса овец, получавших антигельминтный препарат в дозе 300 мг/кг, соответствовали референтному уровню для данного вида животных. Гематологические показатели подопытных овец на протяжении всего периода наблюдений были в переделах физиологической нормы и существенно не отличались от показателей овец до введения вигисокса (Р > 0,05).

При биохимическом исследовании крови подопытной группы овец, получавших дозу 300 мг/кг, на 1, 3 и 5-е сутки показатели активности амилазы были сравнимы с контрольной группой: 252,0+4,8; 252,6+5,0 и 251,7+5,2 Ед/л к 253,2+4,3; 253,4+5,0 и 252,6+4,9 Ед/л. Показатели активности щелочной фосфатазы подопытной группы овец, получавших препарат в дозе 300 мг/кг, на 1, 3, и 5 сутки были также сравнимы с показателями контрольной группы животных: 60,9+6,1; 61,3+5,9 и 59,0+5,8 Ед/л к 61,4+5,8; 60,2+5,8 и 59,4+5,6 Ед/л. Биохимические показатели общего билирубина, креатинина, мочевины, глюкозы у всех подопытных групп соответствовали физиологическим нормам. Таким образом, вигисокс в терапевтической и в 3 и 5 раз увеличенных дозах (180 и 300 мг/кг) не оказывает отрицательного влияния на клинический статус, гематологические и биохимические показатели овец, что свидетельствует о хорошей переносимости препарата животными этого вида.

20

2.2.4. Сроки выведения действующих веществ вигисокса из организма овец

2.2.4.1. Сроки выведения фенбендазола и его метаболита из организма овец после введения вигисокса

Остаточные количества фенбендазола в максимальном количестве отмечены на первые сутки после обработки овец вигисоксом и соответствуют следующим значениям: в пробах печени – 2250,88+450,18 нг/г, селезенки – 708,26+141,65 нг/г, сердца – 355,14+71,03 нг/г, мышечной ткани – 277,59±55,52 нг/г. Отмечены высокие концентрации сульфоксида фенбендазола в тканях печени, почек и мышечной ткани через 3 суток после окончания обработки животных: 1054,27+210,85; 502,93+ 97,16 и 225,67+45,13 нг/г соответственно. В результате проведенных исследований установлено, что фенбендазол создает достаточно высокие концентрации в тканях печени, почек, мышечной ткани и др. органах в основном через сутки и трое суток после применения вигисокса. В то же время на 7-мые сутки в организме овец в большем количестве обнаруживаются остаточные количества его метаболита – оксфендазола, так, например, в печени его концентрация составляет 71,43+14,29 нг/г, в почках: 76,84+15,37, мышцах 86,08+17,21

нг/г. Однако на 10-ые сутки анализ фенбендазола и оксфендазола дал отрицательный результат во всех органах и тканях. Следовательно, период полного выделения остаточных количеств фенбендазола, сульфоксида из органов и тканей овец составляет 10 суток после окончания обработки.

2.2.4.2. Сроки выведения фенасала из организма овец после введения вигисокса

Установлены максимальные концентрации фенасала в органах и тканях овец на первые сутки после обработки овец антигельминтиком и соотвествуют следующим значениям: в пробах печени – 4036,69+807,34; почек –

1226,57+245,31; легких – 925,54+185,11; сердца – 713,07+142,61; селезенки

–581,84+116,37; жировой ткани – 8470,60+1694,12 нг/г; период полного выделения фенасала – 10 суток.

2.2.5. Комиссионное испытание вигисокса при смешанной инвазии овец

При нематодирозе овец количество яиц нематодирусов в фекалиях после дегельминтизации вигисоксом в дозе 60 мг/кг снизилось на 98,6 %, а 21 из 23 овец полностью освободились от нематодирусов. Эффективность вигисокса в терапевтической дозе при других стронгилятозах пищеварительного тракта